AIDS的流行趋势及防治措施研究进展

目的:综述获得性免疫缺陷综合征(AcquiredImmunodeficiencySyndrome ,AIDS)的流行趋势及防治措施研究进展。方法:参阅中外文献阐述AIDS是由人类免疫缺陷病毒(HumanImmunodeficiencyVirus ,HIV)引起的一种严重的传染病。HIV通过病毒包膜糖蛋白gp12 0 / gp4 1主要与人体免疫细胞膜上表达的CD4受体和辅助受体结合,进而侵入易感细胞,并且损伤宿主的免疫系统,最终导致AIDS的发生。HIV主要通过密切性接触、静脉吸毒经感染者的血液传播以及母婴传播。结果:自1981年由美国首次报道以来,到2 0 0 4年底,全球已有190多个国家报道有HIV/AIDS感染者已达394 0万人,其中310万人已死于AIDS。疫情蔓延迅速,死亡率极高,至今尚无有效防治措施。其传播方式已由高危人群转向普通人群。发病率、死亡率均有上升趋势。结论:因此,有效的预防及治疗措施的研究已经刻不容缓。本文就AIDS的流行趋势及防治措施研究进展作一简要综述。

脂质体介导外源基因体外转染牛胎儿成纤维细胞条件的优化

通过脂质体(FuGENE-6)介导,将真核表达载体pEGFP-C1成功导入体外培养的牛胎儿成纤维细胞,探讨影响外源基因转染效率的参数,如DNA和脂质体的用量、转染的细胞数量以及细胞暴露于DNA与脂质体复合物的时间长度。通过实验发现,绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein,GFP)基因的表达随DNA、脂质体量的增加而增加,延长细胞暴露时间反而使转染效率下降,转染细胞数适当才能得到较高的转化率。

牛胎儿成纤维细胞的组织块贴附法分离培养与电穿孔法基因转染

为获得转基因克隆牛的供体细胞，采用组织块贴附培养的方法分离培养牛胎儿皮肤成纤维细胞，经2～3次传代纯化，绘制生长曲线，分别分析体外传代培养10代以内和20代以上细胞的核型特征。分别采用800、900、1000V／cm和1、5、10、15和20ms的参数组合，将线性化的带有新霉素抗性和绿色荧光蛋白双重筛选标记的人胰岛素原乳腺特异表达载体pNEI电穿孔转入体外培养的牛胎儿成纤维细胞，经800μg／mLG418筛选2周，继续以300μg／mLG418扩大培养2～3代，取部分筛选后的细胞进行PCR检测结果表明，体外培养的牛胎儿成纤维细胞生长旺盛，体外传代20次后核型未发生改变；转染后24～48h在荧光镜下检测各组均可观察到绿色荧光表达，筛选后各组克隆形成数以900V／cm和5ms组最多；PCR检测得到了预期条带，说明目的基因已经成功导入。分离得到的牛胎儿耳成纤维细胞有可能作为体细胞核移植的供体，进行转基因克隆研究。

牛胎儿成纤维细胞的分离与体外培养

分别用胶原酶Ⅲ和胰蛋白酶成功地分离了牛胎儿成纤维细胞,并对其进行了体外培养,同时探讨了两种酶消化分离牛胎儿组织的时间对牛胎儿成纤维细胞原代培养的影响。用组织块直接培养也成功得到了牛胎儿成纤维细胞,并探讨了不同组织块大小对牛胎儿成纤维细胞原代培养的影响。通过绘制生长曲线,可以研究牛胎儿成纤维细胞增殖规律;通过制备牛胎儿成纤维细胞的细胞染色体发现,经过传代(12代)、冷冻保存、解冻,牛胎儿成纤维细胞染色体数目不变。

砷的生殖发育毒性及雌激素效应研究进展

砷作为一种环境毒物，对健康的损害是全身性的、多系统的。人暴露于无机砷，可引起膀胱癌、肺癌、皮肤癌、肝癌、肾癌以及许多其他非癌毒性效应，如皮肤损害、心脑血管疾病、糖尿病、神经系统效应及生殖毒性效应等。多年来．有关砷中毒的发病机制提出了多种假说。然而，迄今为止，还没有一个被广泛认可、具有说服力并且符合砷的生物效应的机制学说。特别是砷的致癌作用还未复制出一个理想的砷致癌动物模型。

去除卵丘细胞的小鼠卵母细胞体外成熟过程中的超微结构变化

去除卵丘细胞会降低小鼠卵母细胞的成熟质量。利用透射电子显微镜技术观察去卵丘细胞的小鼠卵母细胞体外成熟过程中的超微结构变化,目的是在亚细胞水平上寻找由于卵丘细胞的去除而导致卵母细胞质量降低的原因。结果显示,成熟培养过程中微绒毛逐步从透明带内撤出,并竖直于卵膜表面;卵周隙逐步形成;线粒体由成簇到散布于卵质内;皮层颗粒由多到数量极少。因此,皮层颗粒的减少或继续生成路径的障碍可能是去除卵丘细胞的小鼠卵子成熟质量降低的重要原因。

大鼠胎脑神经干细胞的分离和培养

从胚龄14.5～16.5d(E14.5～16.5)的大鼠胎脑组织获得大鼠胎脑神经干细胞(ratfe-talneuralstemcells,rFNSCs),培养于含有碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)和表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)的无血清培养液DMEM/F12中,用3[H]胸苷掺入试验检测EGF和bFGF对大鼠胚胎神经干细胞分裂和增殖的影响.BrdU结合反应和nestin免疫组化检测显示培养细胞在早期时代约90%以上具有分裂增殖能力并显示nestin阳性,而且这些细胞在培养过程中可以分化神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞,证明分离培养的是神经干细胞,可用于移植、定向分化和基因转移的研究.

砷雌激素样效应及对HeLa细胞生长的影响

目的观察砷雌激素样效应及对HeLa细胞体外生长的影响作用。方法实验分为8组，RPMI1640培养液分别含雌二醇（E2，1nmol／L）、三氧化二砷（As2O3，0．5、1．0、5．0μmol／L）、雌二醇拮抗剂（ICI，500nmol／L）、E2（1nmol／L）＋ICI（500nmol／L）、As203（1．0μmol／L）＋ICI（500nmol／L）以及对照组，以含有不同处理因素的RPMI1640培养液培养HeLa细胞24、48、72h。光镜下观察72h时HeLa细胞生长状况，四甲基偶氮唑盐（MTr）法检测各时间点HeLa细胞存活率，流式细胞计量术检测48h时HeLa细胞周期。结果形态学观察E2组和0．5μmol／LAs203组细胞数量明显多于对照组，长势旺盛。24、48、72hE2组和0．5μmol／LAs203组对HeLa细胞的增殖促进率分别为6．35％、11．56％、38．33％及6.35％、8．50％、20．26％，两组作用效果相似，对细胞生长起到增殖促进作用。与对照组[（41．68±1．05）％]比较，E2组[（55．72±2．31）％]和0．5μmol／LAs203组[（47．82±1．41）％]S期细胞有增多趋势，其他各组则减少，其中5．0μmol／LAs203组[（21．11±4．99）％]、ICI组[（20．16±4．76）％]明显减少，组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论小剂量As2O3具有雌激素样效应，可促进HeLa细胞的生长。

慢性砷暴露对小鼠动情周期的影响

目的探讨慢性砷暴露的雌激素样效应。方法采用宫颈黏液结晶法对不同浓度慢性砷暴露小鼠动情周期和动情期进行检查。结果不同浓度的三氧化二砷均使小鼠动情周期和动情期发生紊乱,但与对照组无显著差异(P>0.05),也无明显规律(或缩短、或延长),尤其是动情期。结论动情周期的紊乱是反应性激素代谢失调的敏感指标,本研究初步证明砷具有影响机体内分泌的作用,当属环境内分泌干扰物。