工科院校环境生物技术课程的教学内容优化探讨

本文针对我校环境生物技术课程内容和结构体系存在的问题,提出了修订方案和方法。通过删减重复内容,增加一些现代环境生物技术的新内容和研究进展,将以往较为散乱的教学内容进行归纳总结和专题化。教学内容的优化使得环境生物技术课程的整体教学质量有了明显提高。

花生奶皮生产工艺研究

以花生和鲜牛乳为原料生产花生奶皮。结果表明,最佳生产工艺参数为:花生乳105ml,鲜牛奶1.5kg,保温时间6h,保温温度64℃,冷却时间7h。所制得的花生奶皮口感细腻、组织状态均匀、花生香气淡雅、风味独特。

凡纳对虾crustin 1抗菌肽基因的克隆与性质研究

以凡纳对虾crustin 1抗菌肽基因作为研究对象,对基因的序列结构进行了扩增和研究;并且,将该基因的氨基酸序列与其他对虾的crustin类抗菌肽的氨基酸序列进行了序列同源性以及亲缘关系分析.同时,对Lva-crustin 1的分子结构进行了预测,理论结果将为进一步研究该基因的功能奠定基础.

与人遗传病相关的三核苷酸重复序列(GAA)_n·(TTC)_n自然遗传突变研究

目的:研究含重复序列(GAA)n·(TTC)n的菌体在传代培养中氨苄青霉素对其遗传突变的影响。方法:采用分子克隆、PCR等分子生物学实验技术。结果:在100mLLB液体培养基中加入100mg/mL氨苄青霉素35μL对重复序列有明显删减。结论:治疗与重复序列相关的神经系统遗传疾病可以通过促进重复序列的有效删减,将重复序列数目控制在阈值之内来完成。

布鲁氏菌免疫保护抗原与抗病疫苗的研究进展

布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的世界性人畜共患传染病,主要的防治方法是注射疫苗。但当前常用的布鲁氏菌病疫苗具有免疫成本高、时间短、保护效率低、毒力不稳定等问题。介绍了布鲁氏菌病的致病机理与防治,综述了布鲁氏菌病常用疫苗、基因工程疫苗以及免疫保护抗原的研究进展。

耐酸乳酸菌的筛选及初步鉴定

对采自于包头市的2批农家酸菜汁进行了乳酸菌的分离,得到的34株菌经耐酸试验后,发现有6株在pH值3.0的条件下生长。采用传统的形态学、生理生化特性分析对这6株菌进行鉴定,鉴定结果为:3株杆菌中植物乳杆菌、弯曲乳杆菌、干酪乳杆菌各1株;3株球菌中屎链球菌2株、鸟肠球菌1株。

凡纳对虾penaeidin 3抗菌肽基因的克隆及特性分析

以凡纳对虾的penaeidin 3抗菌肽基因作为研究对象,对其进行基因克隆、氨基酸序列比对、系统进化树分析以及分子结构的初步预测等。研究结果表明:凡纳对虾penaeidin 3分子具有典型的对虾素分子结构特征,与其他已知的对虾素分子相似性较高。

凡纳滨对虾对虾素3a基因的克隆与序列分析

抗菌肽分子是无脊椎动物先天免疫系统中的主要免疫效应分子,在防止病原菌入侵方面,发挥着重要作用。为了探索先天免疫系统中抗菌肽分子的多样性以及分子结构之间的关联,本文以凡纳滨对虾为研究对象,对其penaeidin 3a抗菌肽基因进行了基因克隆和生物信息学分析。研究结果表明penaeidin 3a分子具有经典的对虾素结构域,而且存在着一个由8个保守的半胱氨酸残基形成的球状实体结构,尤其是分子中存在富含脯氨残基的结构基序,对于分子功能的形成具有重要作用。本研究可为下一步对虾素分子功能的研究提供理论基础。

猪型布鲁氏菌Omp31抗原表位基因的性质分析

布鲁氏菌病是一种由革兰氏阴性小杆菌:布鲁氏菌(Brucella)引起的,主要在动物中以流产和发热为表现特征的疾病.以猪型布鲁氏菌病Omp31抗原表位基因作为研究对象,对基因的种间同源性、亚型分类、结构性质、抗原表位性质等信息进行了分析,并且作出了相关预测.随着预测方法的不断完善,将会对布鲁氏菌病其它抗原表位基因的研究提供帮助,从而为该疾病的防疫、治疗提供理论依据,同时也可以促进相关疫苗的研制.

猪型布鲁氏菌Omp31基因的抗原表位预测与分析

布鲁氏菌的外膜蛋白在维持细胞结构方面发挥着重要作用,其中,有些外膜蛋白与细菌本身的毒性相关,成为了重要的抗原决定簇相关分子。Omp31分子就是猪型布鲁氏菌的一个重要的抗原表位分子,在研制亚单位疫苗方面有重要作用。本论文以猪型布鲁氏菌Omp31基因作为研究对象,利用DNAStar生物学软件对Omp31分子的立体结构、分子的表面可能性、亲水性、蛋白骨架区的柔韧性、分子的抗原指数进行了详细分析。结果显示:猪型布鲁氏菌Omp31分子一级结构的氨基酸序列中存在4段可能的抗原表位区段,其中,51～80氨基酸残基组成的区段和193～228氨基酸残基组成的区段的抗原指数较高,成为抗原决定簇的可能性很大。

猪型布鲁氏菌rBLS重组蛋白的纯化与抗体制备

以猪型布鲁氏菌的BLS分子作为研究对象,通过重组蛋白质的纯化以及多克隆抗体的制备,研究了重组rBLS分子的免疫原性。结果表明:布鲁氏菌BLS分子具有较好的抗原性质,可以刺激家兔产生相应的抗体。

猪型布鲁氏菌omp31基因的克隆与原核表达

以猪型布鲁氏菌的omp31基因作为研究对象,通过构建原核表达载体,对重组蛋白进行诱导表达和亲和纯化。结果表明:omp31基因可以在大肠杆菌中正确表达,重组蛋白的亲和纯化效果良好。

布菌Omp31-BLS融合肽抗血清的免疫学性质研究

目的:检测Omp31-BLS融合肽抗血清的质量。方法:利用间接酶联免疫吸附实验、免疫双扩散实验以及凝集实验检测Omp31-BLS融合肽制备的抗血清的质量。结果:Omp31-BLS融合肽抗血清可以较好地识别Omp31-BLS融合肽蛋白质,而且,当抗体被稀释4 000倍的时候,酶联免疫吸附实验测定的OD值为1.2,明显高于其他3个对照组。在免疫双扩散实验中,抗血清被稀释64倍的时候,仍然能够出现明显的免疫沉淀线。此外,凝集实验也反映出Omp31-BLS融合肽抗血清可以与Omp31-BLS融合肽抗原发生强烈的凝集作用。结论:Omp31-BLS融合肽抗血清可以较好地识别对应的蛋白质抗原,二者之间存在明显的抗原-抗体反应,为利用Omp31-BLS融合肽进行布鲁氏菌病的血清学诊断提供了理论基础和技术支持。

凡纳对虾SWD抗菌肽基因的克隆与性质研究

目的:为了进一步探索抗菌肽分子的作用机制,我们以凡纳对虾具有单个WAP结构域的抗菌肽基因作为研究对象,进行分子生物学方面的分析。方法:通过cDNA全长序列的扩增,以及氨基酸序列的比较分析、系统进化树的分析以及分子结构的初步预测,我们对凡纳对虾SWD分子的结构进行了详细分析。结果:Lv-SWD的cDNA序列全长为434bp,编码92个氨基酸;Lv-SWD存在由24个氨基酸残基形成的信号肽序列,以及由8个保守存在的半胱氨酸残基形成的WAP结构域和一段富含脯氨酸的结构基序。结论:通过这些分子结构的研究,以及与其他SWD分子的比较,作者推测Lv-SWD分子是一种具有抑菌活性的抗菌肽分子,它在凡纳对虾的先天免疫系统中应该发挥着重要的免疫功能。

凡纳对虾SWD分子的表达、纯化与酶活抑制作用研究

目的:研究甲壳类动物先天免疫系统抗菌肽分子的多样性以及抗菌相关的酶活抑制功能。方法:通过大肠杆菌重组表达载体的构建与重组蛋白的表达与纯化,我们对凡纳对虾SWD分子抗菌相关的蛋白酶活性抑制作用进行了研究。结果:Lv-SWD分子能够被大肠杆菌正确表达,其中,Lv-SWD分子对应的mRNA的开放阅读框为279 bp,重组Lv-SWD分子包括92个氨基酸残基和一个组氨酸标签,理论分子量为12.9 kD;分泌型蛋白酶活性抑制实验的结果显示重组Lv-SWD分子具有较好的蛋白酶活性抑制作用。结论:Lv-SWD分子是在凡纳对虾中发现的一类新的抗菌肽分子,它具有良好的蛋白酶活性抑制作用,可能在无脊椎动物的先天免疫系统中发挥着免疫防御分子的作用。

猪型布鲁氏菌rOmp31_(48-74)-BLS融合肽的诱导表达与纯化

目的:为了研究布鲁氏菌Omp31分子的抗原性质,以及布鲁氏菌BLS蛋白质的聚合功能,通过融合PCR技术,制备布鲁氏菌Omp3148-74与BLS的融合蛋白质,并且进行蛋白质的纯化。方法:以猪型布鲁氏菌Omp31基因和BLS基因作为研究对象,通过融合PCR技术构建重组表达载体,IPTG诱导融合蛋白质表达之后,利用His-tag亲和层析柱进行亲和纯化。结果:Omp3148-74-BLS融合DNA长度为531 bp,编码177个氨基酸;加上原核表达载体上的His-tag标签,融合蛋白质的实际大小为25.07 kD,实验结果证实表达载体构建正确,重组表达正确。结论:通过融合PCR技术构建的重组子pET-28-a-Omp3148-74-BLS,可以在大肠杆菌中成功表达;His-tag亲和层析技术可以纯化到Omp3148-74-BLS融合蛋白,而且蛋白质纯度较高。

布鲁氏菌rOmp31_(48-74)-BLS蛋白的多克隆抗体制备与检测

目的:研究布鲁氏菌Omp31分子的免疫原性。方法:利用IPTG诱导rOmp3148-74-BLS融合重组蛋白表达,经过His-tag镍柱进行亲和纯化之后,作为抗原免疫家兔制备多克隆抗体。结果:rOmp3148-74-BLS重组蛋白能够被大肠杆菌正确表达,而且,能够作为有效的抗原刺激家兔产生可以相互识别的多克隆抗体。结论:Omp31分子具有较好的免疫原性,可以引起较强的免疫反应。

布鲁氏菌外膜蛋白基因omp19序列克隆与原核表达

目的:研究猪型布鲁氏菌外膜蛋白基因omp19的序列性质,同时,进行目的基因的原核表达。方法:以猪型布鲁氏菌基因组作为模板进行基因序列的扩增,利用大肠杆菌原核表达系统进行重组表达。结果:猪型布鲁氏菌外膜蛋白基因omp19的开放阅读框序列全长为534 bp,演绎177个氨基酸。诱导表达的重组蛋白质的理论分子量为17.6 kD,而且实际大小与理论值一致。结论:成功表达了Omp19分子,为进一步研究Omp19分子的免疫保护作用奠定了基础。

布菌rBLS蛋白重组表达载体的构建与诱导表达

目的:构建猪型布鲁氏菌BLS分子原核表达载体,并进行诱导表达,为下一步关于BLS分子聚合功能的研究提供基础。方法:利用pET-28a(+)大肠杆菌原核表达系统,构建bls基因表达载体;利用IPTG诱导rBLS重组蛋白表达。结果:成功构建了布鲁氏菌bls基因的原核表达载体,重组蛋白分子量为21 kDa。结论:rBLS重组蛋白能够被大肠杆菌原核表达系统正确表达。

凡纳对虾对虾素基因的克隆与抗菌性质分析

目的:抗菌肽分子在无脊椎动物的先天免疫系统中,发挥着重要的抗菌作用;为了不断完善无脊椎动物先天免疫系统的抗菌机制,作者以凡纳对虾的对虾素基因作为研究对象,进行分子生物学方面研究。方法:以凡纳对虾的对虾素基因———penaeidin 4抗菌肽基因(Lva-pen 4)作为研究对象,主要进行了基因克隆、氨基酸序列比对、系统进化关系分析以及分子结构初步预测等研究内容。结果:Lva-pen 4的cDNA序列全长624bp,开放阅读框包括204bp,演绎67个氨基酸残基;在Lva-pen 4分子一级结构的氨基酸序列中,存在一个对虾素结构域,其中包括8个保守存在的半胱氨酸残基和6个脯氨酸残基。结论:根据分子结构的分析结果,推测Lva-pen 4是一个重要的免疫反应相关基因,在先天免疫系统中发挥着重要作用。