蓖麻标雌/单雌/两性系花序MSAP反应体系的建立

为了建立Lm型雌性系蓖麻不同发育时期的标雌/单雌/两性系花序MSAP反应体系,提取不同类型不同发育时期的花序基因组DNA,混合成基因池;用EcoRⅠ和HpaⅡ/MspⅠ的组合,12 h可将DNA酶切完全;16℃条件下,将酶切产物与EcoRⅠ、HpaⅡ/MspⅠ接头过夜连接;连接产物用于预扩增。优化后的预扩增反应体系为10×PCR Buffer 2.5μL、d NTPs(10 mmol/L)2.5μL、Mg2+(25 mmol/L)2.0μL、模板2.0μL、E0扩增引物(10pmol/μL)1.5μL、H0扩增引物(10 pmol/μL)1.5μL、LA Taq(5 U/μL)0.25μL、dd H2O 12.75μL。预扩增产物稀释10倍后用于选择性扩增。优化后的选择性扩增体系为10×PCR Buffer 2.5μL、d NTPs(10 mmol/L)2.0μL、Mg2+(25mmol/L)4.0μL、模板3.0μL、EX扩增引物(10 pmol/μL)1.0μL、H/MX扩增引物(10 pmol/μL)1.0μL、LA Taq(5U/μL)0.30μL、dd H2O 11.2μL。

半支莲快繁技术培养

半支莲为马齿苋科马齿苋属一生或多年生肉质草本花卉,具有很高的观赏价值、药用功效和保健价值。为实现半支莲的快速繁殖,满足市场需求,文章以半支莲茎节作为外植体,采用腋芽生枝途径对半支莲进行快繁,筛选出最佳消毒时间以及促进腋芽生枝阶段培养基中PGR最佳浓度配比和芽诱导生根阶段培养基中最佳PGR浓度配比。结果表明:半支莲茎节用0.1%氯化汞处理5.5 min为最佳消毒时间;添加有2.5 mg/L 6-BA、0.1 mg/L NAA生枝数最多,添加有0.5mg/L NAA的PGR配比的培养基中芽的诱导率最高。