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家畜卵母细胞玻璃化冷冻损伤研究进展
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作者 莫显红 李俊杰 +4 位作者 郭成 温诏禹 邹宇柱 赵文博 徐振军 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期2524-2532,共9页
卵母细胞玻璃化冷冻保存对加快优良品种繁育、提高畜牧生产效率、维持物种多样性、拯救濒危动物具有重要意义。目前玻璃化冷冻技术已广泛应用于猪、牛、羊等家畜卵母细胞的冷冻保存。然而,相较新鲜卵母细胞,冷冻-解冻后卵母细胞的成熟... 卵母细胞玻璃化冷冻保存对加快优良品种繁育、提高畜牧生产效率、维持物种多样性、拯救濒危动物具有重要意义。目前玻璃化冷冻技术已广泛应用于猪、牛、羊等家畜卵母细胞的冷冻保存。然而,相较新鲜卵母细胞,冷冻-解冻后卵母细胞的成熟率、受精率、卵裂率及囊胚发育率仍然偏低,这显著影响卵母细胞冷冻保存的实际应用。冷冻损伤是制约卵母细胞保存效率与质量的关键。玻璃化冷冻引起卵母细胞透明带破裂、膜脂相变、DNA损伤、染色体异常及胞质内皮质颗粒分布异常、内质网和线粒体结构功能受损、纺锤体形态异常等结构损伤,以及引起细胞氧化应激和钙稳态失衡等生理状态紊乱,导致细胞发育能力降低。因此,认识冷冻损伤产生的原因及其损伤机制,有助于进一步提高卵母细胞冷冻保存效率,促进卵母细胞冷冻技术的提升。作者综述了家畜卵母细胞冷冻损伤类型,分析了冷冻损伤原因,针对不同类型的冷冻损伤提出了改善方法,并对其研究前景进行展望,旨在为提高卵母细胞冷冻保存效率和质量提供参考。 展开更多
关键词 卵母细胞 玻璃化冷冻损伤 发育能力 家畜
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深度学习在基因组学中的研究进展
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作者 鲍艳春 石彩霞 +7 位作者 张传强 谷明娟 朱琳 刘在霞 周乐 马凤英 娜日苏 张文广 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期701-715,共15页
随着高通量测序技术的迅猛发展,基因组学领域迎来了数据量的爆炸性增长,这对传统生物信息学处理复杂数据模式的能力构成了严峻挑战。在此技术革新的关键时刻,深度学习作为人工智能领域的前沿技术,以其强大的数据解析与模式识别能力,为... 随着高通量测序技术的迅猛发展,基因组学领域迎来了数据量的爆炸性增长,这对传统生物信息学处理复杂数据模式的能力构成了严峻挑战。在此技术革新的关键时刻,深度学习作为人工智能领域的前沿技术,以其强大的数据解析与模式识别能力,为基因组学研究注入了新的活力。本文聚焦于4种核心深度学习模型——卷积神经网络(convolution neural network,CNN)、循环神经网络(recurrent neural network,RNN)、长短期记忆网络(long short term memory,LSTM)及生成对抗网络(generative adversarial network,GAN),系统阐述了它们的基础原理,重点回顾了这些模型近5年在DNA、RNA和蛋白质研究领域的广泛应用。此外,文章进一步探讨了深度学习在畜禽基因组学中的应用案例,揭示了其在遗传特征解析、疾病预防以及遗传改良等领域的潜在应用价值与面临的挑战。通过深入分析,本文旨在阐述深度学习技术在增强基因组数据分析的准确性和处理能力方面的作用,并构建一个概念性框架,以指导畜禽基因组学研究策略的发展及其在具体场景下的应用,进而推动精准农业和遗传改良技术的发展。 展开更多
关键词 深度学习 基因组 卷积神经网络 循环神经网络 长短期记忆网络 生成对抗网络
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荷斯坦奶牛胚胎基因组遗传评估研究
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作者 郭子骄 郑伟杰 +10 位作者 孙伟 吴宝江 包向男 张琪 贺巾锋 包斯琴 赵高平 王子馨 韩博 李喜和 孙东晓 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期2940-2950,共11页
旨在建立一种荷斯坦奶牛胚胎细胞早期基因组检测和遗传评估的方法并筛选优秀种用胚胎,通过胚胎移植技术选育优秀种牛,进一步缩短世代间隔,加快遗传进展。本研究基于4头荷斯坦种公牛克隆细胞,比较分析2细胞、5细胞的微量基因组DNA提取效... 旨在建立一种荷斯坦奶牛胚胎细胞早期基因组检测和遗传评估的方法并筛选优秀种用胚胎,通过胚胎移植技术选育优秀种牛,进一步缩短世代间隔,加快遗传进展。本研究基于4头荷斯坦种公牛克隆细胞,比较分析2细胞、5细胞的微量基因组DNA提取效果、全基因组芯片检出率及错配率;随后提取24枚荷斯坦奶牛早期胚胎5细胞样本的基因组DNA,利用150K芯片进行基因组检测;基于大规模基因组选择参考群体,采用GBLUP方法计算每枚胚胎9个性状的基因组育种值。结果表明,2和5克隆细胞的基因组DNA浓度、纯度和相对完整性均较好;5克隆细胞样品的150K芯片检出率较高(89.54%~95.07%)、错配率较低(1.02%~4.67%)。24枚胚胎的5细胞样品基因组DNA质量、总量和相对完整性均较好,150K芯片数据检出率为92.28%~98.51%,9个性状(产奶、体型和体细胞评分)基因组评估准确性为55%~79%,平均基因组评估准确性不低于65%。综上,本研究优化并建立了奶牛胚胎少量细胞DNA提取及基因组评估技术,胚胎样本基因组检出率不低于90%,平均基因组评估准确性不低于0.65。 展开更多
关键词 荷斯坦奶牛 胚胎 基因组选择
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粪菌微生物移植在哺乳动物中的研究进展
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作者 姚文娜 闫烁 +6 位作者 薛越 赵宇龙 苏和 宋永利 李喜和 包花拉 包斯琴 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期3384-3390,共7页
在小鼠、猪、牛、羊、人等哺乳动物肠道中含有大量微生物,这些微生物对肠道稳态和宿主健康至关重要。肠道微生物紊乱会导致肠道炎症、神经系统疾病、功能代谢障碍等多种疾病,从而对动物及人类健康造成严重危害。在不同物种及不同品种间... 在小鼠、猪、牛、羊、人等哺乳动物肠道中含有大量微生物,这些微生物对肠道稳态和宿主健康至关重要。肠道微生物紊乱会导致肠道炎症、神经系统疾病、功能代谢障碍等多种疾病,从而对动物及人类健康造成严重危害。在不同物种及不同品种间都会表现出各自独特的肠道微生物特征,这些微生物的稳态平衡对动物的健康非常重要。现阶段研究发现,粪菌微生物移植(fecal microbiota transplantation,FMT)在恢复肠道微生物失调、干预或重建哺乳动物肠道微生物菌群平衡中发挥着重要作用,FMT这一治疗手段也逐渐在感染性疾病和非感染性疾病中得到广泛应用。随着FMT技术的发展,在哺乳动物中通过调控微生物治疗肠道疾病或其他疾病的研究都有了新的方向,而这一技术手段也逐渐广泛应用于各个研究领域。本综述基于FMT在现有研究领域中的应用,总结了其被广泛应用于肠道及与肠道相关疾病中的研究进展,旨在为建立更规范、高效、安全、有益的哺乳动物FMT体系,以及FMT在提高哺乳动物生产性能、养殖、疾病防治等方面提供新参考、新思路。 展开更多
关键词 微生物失调 肠道微生物群 粪菌微生物移植(FMT)
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DHI报告在内蒙古规模化牛场的应用分析 被引量:3
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作者 丽丽 张铁柱 +4 位作者 池慧慧 乌云高娃 郭文花 白强 孙伟 《中国奶牛》 2022年第4期45-49,共5页
本研究旨在分析DHI报告对内蒙古地区规模化牛场乳脂率、乳蛋白率、体细胞数量、日产奶量等的影响。收集了内蒙古地区某规模化牛场12个月的DHI数据记录和牛只档案。应用Excel软件进行数据处理,与DHI理想参数进行对比。结果表明该场根据DH... 本研究旨在分析DHI报告对内蒙古地区规模化牛场乳脂率、乳蛋白率、体细胞数量、日产奶量等的影响。收集了内蒙古地区某规模化牛场12个月的DHI数据记录和牛只档案。应用Excel软件进行数据处理,与DHI理想参数进行对比。结果表明该场根据DHI报告及时改进饲养管理,取得了如下成绩:①自参测之日起一年内日产奶量从31kg增加至34.4kg,测定期间最高达到了37.1kg,305d奶量从9712kg增加至10244kg,测定期间最高达到了10502kg;②一、二、三胎次占比自第一次参测的42.4%、27.2%、30.4%、变化至35.98%、29.04%、34.98%,比参测之前更加接近于理想牛群结构;③高峰日在泌乳69~92d之间,高峰奶自43.7kg增加到48.0kg;④平均乳脂率为4.54%,平均乳蛋白率为3.55%,脂蛋比为1.28;⑤尿素氮值从17.4 mg/dL下降至12.0 mg/dL,测定期间的平均值为15.03 mg/dL;⑥测定月份平均体细胞数为16万/mL,所有测定月份体细胞数均低于20万/mL。 展开更多
关键词 DHI 奶牛 产奶量 体细胞数 乳成分
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肠道菌群与肠上皮细胞互作关系的研究进展
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作者 薛越 闫烁 +6 位作者 姚文娜 赵宇龙 苏和 宋永利 李喜和 包花拉 包斯琴 《动物医学进展》 北大核心 2023年第5期86-91,共6页
肠道菌群数量大、种类繁多,会对宿主产生各种各样的影响,包括营养代谢、免疫系统调节和抵御感染等,在维持肠道稳态平衡中起着重要作用。肠道上皮细胞是肠道防御系统的关键。肠道上皮是动物机体抵御微生物的第一道屏障,具有吸收和屏障功... 肠道菌群数量大、种类繁多,会对宿主产生各种各样的影响,包括营养代谢、免疫系统调节和抵御感染等,在维持肠道稳态平衡中起着重要作用。肠道上皮细胞是肠道防御系统的关键。肠道上皮是动物机体抵御微生物的第一道屏障,具有吸收和屏障功能,还是宿主与微生物群交流的主动传感器,而这样的功能是肠道菌群与肠上皮各类细胞间相互作用的结果。论文以肠道菌群与肠上皮细胞中的几类典型细胞之间的互作关系展开论述,旨在为如何通过各类细胞发挥的功能来协调肠道菌群的稳定,进而为预防或治疗某些由于肠道菌群失调而导致的疾病提供理论依据。 展开更多
关键词 肠道菌群 肠道上皮细胞 黏液
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山羊基因编辑研究进展
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作者 贾宇 杜瑞麟 +7 位作者 闫烁 张思雨 赵宇龙 高原 郭鹏飞 杨燕燕 宋永利 李喜和 《当代畜禽养殖业》 2023年第6期25-28,38,共5页
山羊是人类最早驯化的家畜之一。山羊养殖业是畜牧业经济的重要组成部分,具有广泛的用途与价值。山羊的基因编辑已成为研究热点,是基因水平上研究山羊最有效的方法之一。通过改造山羊基因组,可大力改良山羊奶源,肉源,皮、绒及毛源等经... 山羊是人类最早驯化的家畜之一。山羊养殖业是畜牧业经济的重要组成部分,具有广泛的用途与价值。山羊的基因编辑已成为研究热点,是基因水平上研究山羊最有效的方法之一。通过改造山羊基因组,可大力改良山羊奶源,肉源,皮、绒及毛源等经济性状,进行性别选择,降低患病率及提高饲料利用率等。基因编辑技术应用前景广阔,为山羊产业的进一步发展做出了极大贡献,也对人类社会具有不可估量的价值。本文基于多个品种山羊及部分家畜的基因敲除(geneknockout)技术研究进展进行概述、归纳,以期为后续深入研究提供理论参考依据,为山羊基因敲除领域提供新的研究思路,并对家畜产业后续发展进行展望。 展开更多
关键词 山羊 基因编辑 基因敲除 研究进展
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高糖培养的双峰驼肾细胞抗氧化基因检测
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作者 孟凡华 常龙维 +3 位作者 王亮 王申元 薛日夫 张东 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第11期48-56,共9页
为了揭示双峰驼肾脏在高糖环境中的抗氧化能力,以其离体培养的肾皮质和髓质细胞为材料,以双峰驼生理血糖值7.1 mmol/L浓度的葡萄糖培养基为对照,10、15、25和40 mmol/L葡萄糖浓度进行高糖逆境模拟培养,检测各处理组的活性氧(ROS)水平和... 为了揭示双峰驼肾脏在高糖环境中的抗氧化能力,以其离体培养的肾皮质和髓质细胞为材料,以双峰驼生理血糖值7.1 mmol/L浓度的葡萄糖培养基为对照,10、15、25和40 mmol/L葡萄糖浓度进行高糖逆境模拟培养,检测各处理组的活性氧(ROS)水平和抗氧化基因的水平。结果显示:高糖应激下,肾皮质细胞内ROS含量在10、15、25 mmol/L糖浓度下有极显著增加(P<0.01),肾髓质细胞内ROS含量在15、25、40 mmol/L糖浓度下有极显著增加(P<0.01);肾皮质细胞中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)2、SOD3、谷胱甘肽过氧化物酶(Gpx)1、Gpx3、溶质载体家族6成员1(SLC6A1)、溶质载体家族14成员1(SLC14A1)在10 mmol/L糖浓度下mRNA表达量极显著上升(P<0.01);Gpx1、Gpx3、Gpx4、糖皮质激素受体(GR)、过氧化物酶体生物发生因子5(PEX5L)、多聚结合蛋白2(PCBP2)、ATP柠檬酸裂合酶(ACLY)在40 mmol/L糖浓度下mRNA表达量极显著上升(P<0.01)。肾髓质细胞中CAT、Gpx1、Gpx3在10 mmol/L糖浓度下mRNA表达量极显著上升(P<0.01);CAT、SOD1、Gpx1、Gpx3在40 mmol/L糖浓度下mRNA表达量极显著上升(P<0.01);SLC6A1在25 mmol/L糖浓度下mRNA表达量极显著上升(P<0.01)。提示:双峰驼肾皮质细胞对糖浓度变化敏感,糖浓度偏离生理范围即引发ROS增加,激活抗氧化基因表达,产生显著氧化应激反应;相比之下,肾髓质细胞对糖浓度变化较不敏感,仅在极端糖浓度偏离时表现出类似反应。高糖环境下两者均展现抗氧化能力,但肾皮质细胞表现出更强的抗氧化适应性。 展开更多
关键词 双峰驼 肾细胞 氧化应激 抗氧化基因
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北方地区荷斯坦牛体内超数排卵反应性状群体特征及影响因素分析
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作者 黄越川 张海亮 +7 位作者 刘展鹏 赵善江 孙伟 李喜和 王林 朱化彬 黄锡霞 王雅春 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期4851-4859,共9页
【目的】体内超数排卵(以下简称超排)是现代奶牛繁育关键技术之一,对于奶牛群体遗传改良具有重要意义。试验旨在揭示超排反应性状在荷斯坦牛群体中的表型规律及主要影响因素,以期为奶牛超排反应性状的遗传规律解析提供表型研究基础。【... 【目的】体内超数排卵(以下简称超排)是现代奶牛繁育关键技术之一,对于奶牛群体遗传改良具有重要意义。试验旨在揭示超排反应性状在荷斯坦牛群体中的表型规律及主要影响因素,以期为奶牛超排反应性状的遗传规律解析提供表型研究基础。【方法】本研究收集了宁夏和内蒙古地区共9个牧场2021年3月至2023年8月间1842头荷斯坦牛的1855条体内超排记录,对总胚胎数、可移植胚胎数、可移植胚胎率、未受精卵数、未受精卵率、退化胚胎数和退化胚胎率共7个性状进行了统计分析,使用SAS 9.2软件中Mixed程序分析了非遗传因素对7个性状的影响,并使用SPSS 21.0软件的双变量相关程序计算了7个超排反应性状间的Pearson相关系数。【结果】本研究群体中,荷斯坦牛体内超排生产的总胚胎数、可移植胚胎数和可移植胚胎率的平均值分别为9.49枚、6.01枚和61.95%,未受精卵数和未受精卵率的平均值分别为1.50枚和17.16%,退化胚胎数和退化胚胎率的平均值分别为2.29枚和23.34%。各超排反应性状间存在不同程度的表型相关,相关系数介于-0.629~0.882之间。除可移植胚胎率外其余性状均受季节因素的显著影响(P<0.05);激素类型及剂量对7个超排反应性状均有显著影响(P<0.05);冻精使用剂量显著影响了可移植胚胎数、退化胚胎数、未受精卵数和未受精卵率(P<0.05);供体月龄仅对可移植胚胎率和退化胚胎率有显著影响(P<0.05)。【结论】中国荷斯坦牛的超排反应性状表型与世界平均水平相近,并受到多种非遗传因素的影响。研究结果为进一步对奶牛超排反应性状进行遗传分析奠定了模型基础。 展开更多
关键词 荷斯坦牛 超数排卵 群体特征 Pearson相关性
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牛3种妊娠相关糖蛋白可视早孕试剂盒检测效果比较
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作者 张传强 鲁静 +10 位作者 张铁柱 王子馨 赵高平 温慧 王景霖 律登元 苏晓凤 祁晓霞 王丽霞 曹贵方 李喜和 《动物医学进展》 北大核心 2024年第4期40-44,共5页
旨在确定牛妊娠相关糖蛋白(PAGs)可视早孕试剂盒与超声检查的差异、检测准确性的判断标准,并比较牛3种PAGs可视早孕试剂盒的检测效果。采用酶联免疫吸附试验法检测牛的“未孕(特异性)”和“怀孕(灵敏性)”,并将检测结果与超声检查相比较... 旨在确定牛妊娠相关糖蛋白(PAGs)可视早孕试剂盒与超声检查的差异、检测准确性的判断标准,并比较牛3种PAGs可视早孕试剂盒的检测效果。采用酶联免疫吸附试验法检测牛的“未孕(特异性)”和“怀孕(灵敏性)”,并将检测结果与超声检查相比较,以此判断牛PAGs的检测准确性及检测效果。结果显示,3种PAGs试剂盒的检测结果与超声检查不存在显著性差别,可以用作商业化检测。该类试剂盒的灵敏性与超声检查的一致性高于93%,但不能达到100%,原因在于PAGs存在一定的半衰期,灵敏性只能作为牛PAGs检测准确性的参考依据,不能作为最终判断依据。而3种试剂盒的检测特异性与超声检查的一致性均可达100%,该类试剂盒可以作为准确性最终判断依据。3种试剂盒中,试剂盒2、3可以在人工输精后第27天达到100%,比试剂盒1提前4 d。 展开更多
关键词 妊娠相关糖蛋白 可视早孕检测 准确性 特异性
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白血病抑制因子对牛卵母细胞体外发育能力的影响
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作者 莫显红 陶庆华 +4 位作者 房义 梁婧 张佳音 梁小航 徐振军 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期462-469,共8页
[目的]探究白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor, LIF)对牛卵母细胞和早期胚胎发育能力及多潜能基因表达的影响。[方法]将牛卵丘-卵母细胞复合体(cumulus oocyte complexes, COCs)分为4组,对照组:在卵母细胞体外成熟(in vitro ma... [目的]探究白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor, LIF)对牛卵母细胞和早期胚胎发育能力及多潜能基因表达的影响。[方法]将牛卵丘-卵母细胞复合体(cumulus oocyte complexes, COCs)分为4组,对照组:在卵母细胞体外成熟(in vitro maturation, IVM)和胚胎体外培养(in vitro culture, IVC)过程中均不添加LIF溶液;处理组1(T1组):IVM过程添加25 ng/mL LIF,IVC过程不添加LIF;处理组2(T2组):IVM过程不添加LIF,IVC过程添加25 ng/mL LIF;处理组3(T3组):IVM和IVC全过程均添加25 ng/mL LIF。用Fluo-3荧光指示剂检测卵母细胞胞内游离钙离子([Ca2+]i)浓度;挑选有第一极体排出的卵母细胞进行孤雌激活,统计各组卵母细胞卵裂率和囊胚率;利用实时荧光定量PCR检测囊胚中多潜能基因的相对表达量。[结果]与对照组相比,培养8 h后,T1组牛卵母细胞胞内[Ca2+]i浓度极显著下降(P<0.01);培养24 h后,T1组牛卵母细胞胞内[Ca2+]i浓度极显著升高(P<0.01)。T1和T3组孤雌激活后卵裂率和囊胚率均显著高于对照组,且T3组囊胚率显著高于T1和T2组(P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,T3组囊胚中POU结构域5类转录因子1(POU5F1)和同源框蛋白(NANOG)基因表达量均显著高于对照组,尾型同源盒转录因子2(CDX2)基因表达量显著低于对照组(P<0.05)。[结论]在IVM过程中添加LIF可提高卵母细胞的发育能力,在IVM+IVC全过程添加LIF对早期胚胎发育和多潜能基因的表达有积极作用。 展开更多
关键词 白血病抑制因子 多潜能基因 钙离子 胚胎发育
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牛体外胚胎冷冻在生产中的应用效果
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作者 孙伟 赵勇超 +8 位作者 张浩波 王超 郭雅欣 王乐群 王飞飞 刘涛 张博钊 乔嘉明 李喜和 《中国农学通报》 2024年第17期142-148,共7页
本研究旨在评估不同牛体外胚胎冷冻保存方案的效率,以优化技术流程。研究比较了仪器玻璃化与手工玻璃化冷冻牛体外胚胎的2 h复苏率、24 h孵化率及45 d初检妊娠率;比较2种程序化冷冻方案冷冻牛体外胚胎的2 h复苏率、24 h孵化率及48 h孵化... 本研究旨在评估不同牛体外胚胎冷冻保存方案的效率,以优化技术流程。研究比较了仪器玻璃化与手工玻璃化冷冻牛体外胚胎的2 h复苏率、24 h孵化率及45 d初检妊娠率;比较2种程序化冷冻方案冷冻牛体外胚胎的2 h复苏率、24 h孵化率及48 h孵化率;对比牛体外鲜胚、体外冻胚以及体内冻胚45 d移植妊娠率。仪器玻璃化冷冻方案与程序化冷冻方案解冻胚胎的2 h复苏率(72.91%±5.52%vs.70.91%±6.75%)、24 h孵化率(60.42%±6.33%vs.58.18%±5.62%)均不具有显著性差异(P>0.05)。程序化冷冻中过蔗糖方案的冷冻-解冻胚胎的24 h孵化率(44.23%±3.33%vs.37.50%±3.58%)显著高于不经过蔗糖的冷冻方案(P<0.05)。牛体外鲜胚、体外冻胚以及体内冻胚移植45 d初检妊娠率分别为56.81%±6.27%、45.00%±6.13%、49.41%±7.55%。在实际应用中,牛体外生产胚胎的冷冻效果与体内胚胎相比仍有一定的差距。综上所述,在牛体外胚胎的冷冻保存中,仪器玻璃化与手工玻璃化的效果相当,而程序化冷冻方案中使用高浓度蔗糖可以显著提升冷冻效率。 展开更多
关键词 牛体外胚胎 玻璃化 程序化 妊娠率 冷冻保存
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小分子化合物诱导细胞重编程研究进展 被引量:1
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作者 顾珊 赵高平 李喜和 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期79-83,共5页
细胞重编程指细胞内的基因表达由一种类型转变为另一种类型,通常包含两层含义:一是分化的细胞重新恢复到多能性或全能性状态;二是从一种分化的细胞转变为另一种分化的细胞。细胞重编程可为临床患者特异性细胞治疗提供无限的细胞资源。... 细胞重编程指细胞内的基因表达由一种类型转变为另一种类型,通常包含两层含义:一是分化的细胞重新恢复到多能性或全能性状态;二是从一种分化的细胞转变为另一种分化的细胞。细胞重编程可为临床患者特异性细胞治疗提供无限的细胞资源。细胞重编程的途径有细胞核移植、转染特定转录因子、小分子化合物诱导等方法。核移植技术由于通常需要使用到卵子,而被认为存在伦理问题;转录因子的导入存在引起宿主基因突变的问题,限制了这一技术的临床应用。然而小分子化合物容易合成、细胞渗透性好,并且生物效应具有可塑性,使用小分子化合物诱导细胞重编程,避免了核移植的伦理问题和基因操作潜在的危害。目前,使用小分子化合物从体细胞诱导获得更安全的i PSCs(induced pluripotent stem cells),ci CMs(chemically induced functional cardiomyocyte cells)和ci NSLCs(chemical-induced neural stem cell-like cells)。对小分子化合物诱导细胞重编程,包括小分子化合物诱导多能干细胞;小分子化合物诱导潜能扩展的多能干细胞,以及小分子化合物诱导细胞转分化等方面的研究做了总结,并对小分子化合物诱导的未来发展做了展望,旨在为今后这方面的研究提供借鉴。 展开更多
关键词 细胞重编程 细胞转分化 小分子化合物
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膜联蛋白Ⅴ去除奶牛死精子技术及其在性控冷冻精液生产中的应用
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作者 张健 祁琦 +5 位作者 周雪原 梁永厚 董志岷 王贵 吉日嘎拉 李喜和 《中国奶牛》 2021年第10期21-27,共7页
本研究旨在通过膜联蛋白Ⅴ(Annexin Ⅴ)与奶牛死精子的特异结合,并尝试与免疫磁珠技术共用去除奶牛精液中死精子,从而提高性控精液生产效率。试验结果显示,通过膜联蛋白Ⅴ与免疫磁珠筛选后的精子活力、膜完整性、线粒体活性均有不同幅... 本研究旨在通过膜联蛋白Ⅴ(Annexin Ⅴ)与奶牛死精子的特异结合,并尝试与免疫磁珠技术共用去除奶牛精液中死精子,从而提高性控精液生产效率。试验结果显示,通过膜联蛋白Ⅴ与免疫磁珠筛选后的精子活力、膜完整性、线粒体活性均有不同幅度改善,特别是上机分离时X/Y死精率明显下降(P<0.05),说明该技术流程设计可以有效去除部分死精子,提高性控精液生产效率。同时,试验证明膜联蛋白Ⅴ与免疫磁珠筛选操作对于分离后的X或Y精子制备的性控冷冻精液各项产品技术指标均没有明显影响(P>0.05),说明该技术流程并不会对精子造成额外的损伤。综上所述,本研究开发的Annexin Ⅴ蛋白的特异性结合免疫磁珠方法与技术工艺,可以有效去除奶牛精液中的死精子,显著提升奶牛性控冷冻精液生产效率、降低生产成本,为家畜性别控制冷冻精液推广应用提供新的技术支撑。 展开更多
关键词 奶牛精子 膜联蛋白Ⅴ 免疫磁珠 性控冷冻精液
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利用CRISPR/Cas9技术建立小鼠Bdh2、Dnmt3a和Dusp9敲除新型胚胎干细胞系 被引量:1
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作者 付宇婷 曹硕 +4 位作者 陈杨林 吴宝江 多曙光 李喜和 包斯琴 《内蒙古大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2019年第5期501-512,共12页
胚胎干细胞因其具有体外自我更新以及多向分化的能力,成为研究基因功能、细胞治疗和组织再生等的有力工具.胚胎干细胞的基因敲除模型在基因功能研究中起着重要作用.我们利用实验室现有的G3-AH和tWG3II-2两种胚胎干细胞系,通过脂质体转... 胚胎干细胞因其具有体外自我更新以及多向分化的能力,成为研究基因功能、细胞治疗和组织再生等的有力工具.胚胎干细胞的基因敲除模型在基因功能研究中起着重要作用.我们利用实验室现有的G3-AH和tWG3II-2两种胚胎干细胞系,通过脂质体转染嘌呤霉素(puromycin)标记的PX459-sgRNA载体,使用CRISPR-Cas9技术分别构建Bdh2、Dnmt3a和Dusp9敲除的胚胎干细胞系,通过基因型鉴定、PCR产物测序、qPCR和Western Blot等实验得到Bdh2、Dnmt3a和Dusp9纯合缺失的胚胎干细胞系.之后,qPCR、免疫荧光染色分别检测了Bdh2、Dnmt3a和Dusp9缺失的胚胎干细胞中多能基因、DNA甲基化相关基因和胚层分化相关基因表达变化.另外,通过嵌合体制备方法检测Dusp9基因敲除对胎儿卵黄囊(yolk sac)和胎盘(placenta)等发育的影响.实验结果表明,KO细胞系中分别敲除的基因(Bdh2、Dnmt3a和Dusp9)在mRNA水平和蛋白水平的表达均显著降低(p<0.05),且不同程度地影响了DNA甲基化相关基因和胚层分化相关基因的表达.Dusp9KO嵌合体结果显示,Dusp9KO均能贡献到胎儿及卵黄囊,但是,能否贡献到胎盘尚待进一步深入探究.本研究成功获得纯合敲除Bdh2、Dnmt3a和Dusp9基因的胚胎干细胞系,为研究Bdh2、Dnmt3a和Dusp9三种基因在胚胎干细胞中的作用提供了重要依据. 展开更多
关键词 胚胎干细胞 CRISPR/Cas9 Bdh2 Dnmt3a Dusp9
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智慧养殖业中畜禽疾病的防治 被引量:3
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作者 张蕾 丁涵 +1 位作者 刘俊平 曹贵方 《动物医学进展》 北大核心 2023年第11期123-126,共4页
智慧养殖业是指运用现代化电子信息技术和先进管理理念,对养殖生产全过程进行智能化管理和优化,以提高养殖效益和产品质量。在智慧养殖业中,畜禽疾病的防治是关键环节之一,其目标是实现疾病的早期预警、精准诊断和科学防治,以降低疫病风... 智慧养殖业是指运用现代化电子信息技术和先进管理理念,对养殖生产全过程进行智能化管理和优化,以提高养殖效益和产品质量。在智慧养殖业中,畜禽疾病的防治是关键环节之一,其目标是实现疾病的早期预警、精准诊断和科学防治,以降低疫病风险,保障养殖业的可持续发展。畜禽疾病的防治包括:(1)畜禽疾病监测与预警:利用物联网技术和传感器设备,实时收集养殖场的环境数据和动物生理指标,通过对这些数据进行分析和挖掘,可以发现动物异常状况和潜在疾病风险。同时,结合机器学习和大数据分析技术,可以建立疾病预警模型,预测疫病的发生和发展趋势,为养殖场提供科学决策依据。(2)畜禽疾病诊断与评估:运用图像识别、机器学习等技术,对动物的行为、生理状况等进行监测和分析,可以提高疾病诊断的准确性和效率。(3)畜禽疾病防治策略:根据疾病预警和诊断结果,制定科学的防治策略,包括疫苗接种、药物治疗、隔离观察等。还可以运用智能化设备,如自动喂药器、消毒设备等,实现疫病的精准防治。(4)疫病信息管理与服务:建立疫病信息管理系统,实现疫病数据的实时采集、分析和共享,为政府部门、养殖企业、兽医机构等提供决策支持。同时,通过移动端应用、网站等渠道,为养殖户提供疫病防治知识、在线咨询等服务,提高养殖户的疫病防控意识和能力。总之,智慧养殖业中的畜禽疾病防治需要综合运用物联网、大数据、人工智能等技术,实现疾病的早期预警、精准诊断和科学防治,保障养殖业的可持续发展。 展开更多
关键词 智慧养殖 疾病防治 畜禽 兽医
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不同超数排卵方案与供体牛月龄对高产荷斯坦奶牛体外性控胚胎生产效率的影响 被引量:2
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作者 孙伟 吕和 +10 位作者 王超 赵勇超 郭雅欣 王飞飞 刘涛 王茂俊 包向男 张博钊 曹贵方 李海军 李喜和 《中国农学通报》 2023年第10期130-135,共6页
旨在探讨激素处理方案、供体牛月龄对高产荷斯坦奶牛超数排卵效果和性控体外胚胎生产效率的影响,为建立稳定高效且适用于高产荷斯坦奶牛的超数排卵方案以及提高高产奶牛性控胚胎体外生产效率提供技术支持。实验共选取高产荷斯坦奶牛60头... 旨在探讨激素处理方案、供体牛月龄对高产荷斯坦奶牛超数排卵效果和性控体外胚胎生产效率的影响,为建立稳定高效且适用于高产荷斯坦奶牛的超数排卵方案以及提高高产奶牛性控胚胎体外生产效率提供技术支持。实验共选取高产荷斯坦奶牛60头,随机分为3组,分别按照注射FSH两周采卵一次(bi-weekly,BW)、注射FSH一周采卵一次(once weekly,OW)与不注射激素(control,CON)进行OPUIVF体外性控胚胎生产,应用以上最佳方案进一步研究青年牛与经产牛在体外胚胎生产效率上是否存在差异。BW组的超排效果要优于OW组与CON组,BW组头均可用卵数(15.30±0.60)、可用卵占比(68.83%±1.92%)、头均A级卵数(9.86±0.38)与头均B级卵数(5.44±0.37)均显著高于OW组;BW组IVF早期胚胎体外发育优于OW组与CON组,其中BW组卵裂率(77.80%±1.08%)与头均胚胎数(5.11±0.27)均高于OW组与CON组且差异显著,BW组和CON组B级胚胎占比(13.95%±1.23%)均显著低于OW组;经产牛组头均卵子数(27.10±1.35)与头均胚胎数(5.29±0.28)均显著高于青年牛组,但卵子可用率经产牛组显著低于青年牛组,分别为64.44%±1.81%和75.01%±2.33%。BW组可获得最佳的超排效果,应用BW超排方案发现经产牛的体外胚胎生产效率优于青年牛。 展开更多
关键词 高产荷斯坦奶牛 促卵泡素 超数排卵 活体采卵 体外性控胚胎生产
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获能前后绵羊精子的差异蛋白质组学分析
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作者 毛飞 杨燕燕 +6 位作者 苏杰 赵高平 李秀男 王大清 巴音吉日嘎拉 曹贵方 王彩云 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第9期10-16,共7页
为了探索获能前后绵羊精子蛋白质的动态变化,通过串联质谱标签结合液质联用分析技术,对获能前后绵羊精子的总蛋白进行定量分析。结果显示:获能前后绵羊精子的差异表达蛋白共有203个,获能后表达上调蛋白质27个,表达下调蛋白质176个。差... 为了探索获能前后绵羊精子蛋白质的动态变化,通过串联质谱标签结合液质联用分析技术,对获能前后绵羊精子的总蛋白进行定量分析。结果显示:获能前后绵羊精子的差异表达蛋白共有203个,获能后表达上调蛋白质27个,表达下调蛋白质176个。差异表达参与解剖结构发育、生殖等生物学进程;从细胞组分看,差异表达蛋白定位在细胞溶质、质膜中;从分子功能看,主要参与氧化还原等过程。差异表达蛋白也参与蛋白酶体、Hedgehog和cAMP等信号通路。通过差异蛋白表达结合文献分析,筛选出乳铁蛋白。Western blot结果表明,乳铁蛋白在绵羊精子中存在,且在获能后表达量极显著降低(P<0.0001);RT-qPCR结果表明,乳铁蛋白在获能前后绵羊精子中均存在,且差异极显著(P<0.001),说明乳铁蛋白对绵羊精子获能有一定的影响。 展开更多
关键词 蛋白质组学 精子获能 乳铁蛋白 绵羊
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饲料转化率性状在奶牛育种中的应用探究 被引量:2
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作者 张铁柱 丽丽 +6 位作者 孙伟 德亮亮 池慧慧 郭文花 赵丽婷 韩志涛 李喜和 《中国奶牛》 2023年第5期30-32,共3页
饲料成本占到畜牧养殖总成本的65%以上,奶牛养殖中可通过育种手段提高饲料转化率来提升养殖效率。通过借助饲料转化率性状的分子标记,起到提高育种效率、减少育种成本的作用。本文分析了饲料转化率性状在育种工作中的应用,采用分子标记... 饲料成本占到畜牧养殖总成本的65%以上,奶牛养殖中可通过育种手段提高饲料转化率来提升养殖效率。通过借助饲料转化率性状的分子标记,起到提高育种效率、减少育种成本的作用。本文分析了饲料转化率性状在育种工作中的应用,采用分子标记、饲料优化等方式可提高奶牛育种工作的效率。饲料转化率性状在奶牛育种中的应用可以提高产奶量,降低生产成本。 展开更多
关键词 饲料转化率性状 奶牛育种 分子标记 饲料效率
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荷斯坦种公牛X-性控精液对体内胚胎生产效率的影响
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作者 孙伟 郭雅欣 +8 位作者 吴蒙 王超 阿古达木 张建忠 杜贺阳 包向男 赵高平 乌云高娃 李喜和 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期214-218,共5页
本实验旨在系统、整体地评价同一品种不同种公牛个体性控精液质量的差异,研究荷斯坦种公牛X-性控精液对体内胚胎生产效率的影响。通过将精液品质分析与体内胚胎生产技术相结合,检测3头荷斯坦种公牛X-性控精液质量,人工授精后统计体内性... 本实验旨在系统、整体地评价同一品种不同种公牛个体性控精液质量的差异,研究荷斯坦种公牛X-性控精液对体内胚胎生产效率的影响。通过将精液品质分析与体内胚胎生产技术相结合,检测3头荷斯坦种公牛X-性控精液质量,人工授精后统计体内性控胚胎的发育情况和胚胎移植效果。结果表明:不同种公牛精液质量存在较大差异,♂2的精子活力低于♂1和♂3(P<0.05),精子畸形率和细菌菌落数均高于♂1和♂3(P>0.05);3头荷斯坦种公牛X-性控精液人工授精后头均回收胚胎数、头均可用胚胎数和未受精率差异不显著,但♂2的可用胚胎率最低,退化率最高(P<0.05);♂2 A级胚胎占比低于♂1和♂3(P<0.05);移植后发现♂2妊娠率依旧低于♂1和♂3。本研究结果对促进体内胚胎生产效率具有一定指导意义,为荷斯坦种公牛X-性控精液生产优质体内胚胎提供一定参考依据。 展开更多
关键词 荷斯坦种公牛 X-性控精液质量 体内胚胎生产 胚胎移植
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