一株牛副流感病毒3型毒株的分离鉴定与全基因序列分析

目的采集内蒙古通辽地区某牛场牛鼻拭子样品,PCR检测鼻拭子样品中牛副流感病毒3型(BPIV3)感染情况,研究阳性鼻拭子样品中BPIV3毒株的全长基因组和遗传进化。方法将PCR检测结果呈BPIV3阳性且测序正确的鼻拭子样品接种至MDBK细胞,连续传代5次,然后通过RT-PCR对分离株进行鉴定,并对其进行基因组全长测定及同源性和遗传进化分析。结果成功分离到一株BPIV3毒株,PCR检测结果为阳性,将其命名为NMTL-21。该毒株基因组全长为15454 bp,Karber法结果测得,BPIV3 NMTL-21的半数细胞培养物感染剂量为10^(-7) TCID50/100μL。基于基因组全长序列的同源性和遗传进化分析结果显示,NMTL-21与2015年分离自黑龙江省大庆市的NX49株同源性最高,达99.6%;与2013年分离自北京的XJA13株同源性为99.5%。遗传进化分析结果显示,该毒株为基因C型。结论从病牛鼻拭子样品中成功分离到一株能够致细胞病变的BPIV3-C型毒株,可为进一步开展BPIV3研究提供理论参考和实验材料。