SARS-CoVS2蛋白基因的克隆及其在Vero E6细胞中的表达

目的 克隆人SARS病毒S2蛋白分子的编码序列 ,并在VeroE6细胞上获得表达。方法 从人SARS病毒cDNA文库中用PCR技术克隆编码SARS病毒S2蛋白的片段。将它插入质粒载体pVAX1中构建重组S2 pVAX1真核表达载体 ,并对插入片段序列进行测序。采用脂质体法转染VeroE6细胞 ,用Westernblotting检测SARS CoVS2蛋白的表达情况。结果 用PCR方法扩增出一个 1845bp的基因片段 ,并插入pVAX1载体中 ,成功构建出重组S2表达载体 ,经测序证实克隆的S2片段阅读框正确完整。将其转染的VeroE6细胞经WesternBlotting检测获得一条特异性目的蛋白条带。结论 成功克隆基因并获得表达S2分子的VeroE6细胞系。