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束缚应激致大鼠心肌损伤的线粒体膜机制探讨 被引量:7
1
作者 任会荣 钱令嘉 +2 位作者 弓景波 王新兴 任崇余 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期32-35,共4页
目的观察束缚应激对大鼠心肌细胞线粒体膜生物学特性和功能的影响 ,探讨应激性心肌损伤的线粒体膜机制。方法建立应激动物模型 ,分别束缚不同时间后处死所有大鼠 ,检测线粒体PTP开放程度、膜流动性的改变、膜脂质过氧化水平及线粒体呼... 目的观察束缚应激对大鼠心肌细胞线粒体膜生物学特性和功能的影响 ,探讨应激性心肌损伤的线粒体膜机制。方法建立应激动物模型 ,分别束缚不同时间后处死所有大鼠 ,检测线粒体PTP开放程度、膜流动性的改变、膜脂质过氧化水平及线粒体呼吸功能变化。结果束缚应激导致线粒体膜PTP开放、膜流动性降低、膜脂质过氧化物生成增多及线粒体呼吸功能损害 ,且随着束缚时间增加 ,以上各项指标改变加剧。 展开更多
关键词 束缚应激 损伤 线粒体膜 心肌
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束缚应激对大鼠心肌细胞凋亡的影响及中药颐心宁的干预作用 被引量:6
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作者 肖延龄 钱令嘉 赵云 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期117-120,共4页
目的 :探讨束缚应激对大鼠心肌细胞凋亡的影响及中药颐心宁抗应激性心肌损伤的作用。方法 :采用琼脂糖凝胶电泳和TUNEL检测心肌细胞凋亡。结果 :①束缚 1、2、4周时 ,应激组DNAladder心肌细胞凋亡结果阴性 ,原位细胞凋亡明显增多 ,统计... 目的 :探讨束缚应激对大鼠心肌细胞凋亡的影响及中药颐心宁抗应激性心肌损伤的作用。方法 :采用琼脂糖凝胶电泳和TUNEL检测心肌细胞凋亡。结果 :①束缚 1、2、4周时 ,应激组DNAladder心肌细胞凋亡结果阴性 ,原位细胞凋亡明显增多 ,统计学有非常显著差异 (P <0 .0 1) ;②颐心宁干预组DNAladder结果阴性 ,而原位细胞凋亡检测结果则较单纯应激大鼠显著减轻 (P <0 .0 5 ) ;③蒸馏水干预组与单纯应激大鼠比较则无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 :束缚应激可诱导大鼠心肌细胞发生凋亡 ,中药颐心宁可抑制心肌细胞凋亡 ,具有抗应激性心肌损伤的作用。 展开更多
关键词 束缚应激 大鼠 心肌细胞 凋亡 中药 颐心宁 病理损伤
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应激对大鼠心室肌细胞L-型钙离子通道的影响 被引量:4
3
作者 徐俊 马强 +1 位作者 段海峰 钱令嘉 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期216-220,共5页
目的 :研究应激对心室肌细胞L 型钙离子通道电流及激活、失活门控动力学特性的影响。方法 :制备离体心室肌细胞并用去甲肾上腺素 (NE)诱导建立应激心肌细胞模型 ,应用流式细胞术 (FCM )和Fura 2荧光分光光度法测定应激心室肌细胞的凋亡... 目的 :研究应激对心室肌细胞L 型钙离子通道电流及激活、失活门控动力学特性的影响。方法 :制备离体心室肌细胞并用去甲肾上腺素 (NE)诱导建立应激心肌细胞模型 ,应用流式细胞术 (FCM )和Fura 2荧光分光光度法测定应激心室肌细胞的凋亡率和心肌细胞内游离钙浓度变化。利用膜片钳全细胞钳制记录法记录应激心室肌细胞L 型钙离子通道电流I V曲线图及稳态激活、失活曲线图。结果 :FCM检测发现 1 0 - 4mol/L的NE模拟应激可导致心室肌细胞凋亡率明显上升 ,对照组 :0 .36 % ,应激组 :2 .1 7% (P <0 .0 1 )。 1 0 - 4mol/L的NE干预使Ica L峰电流幅值显著性上升 ,激活曲线分析发现应激后曲线明显左移 ,半数最大激活膜电位 (V1 /2 )为 (- 1 4 .59± 0 .2 4 )mV ,较之于对照组 :(- 0 .69± 0 .36)mV ,差异显著 ,而稳态失活曲线特性未发生有意义的改变。实验组心肌细胞内游离钙浓度较对照组升高 1 6 .7%。结论 :应激可导致L 型钙离子通道电流增加 ,通道更易于激活 ,通道的这种异常活动可能导致钙超载 ,从而引起心肌细胞凋亡 。 展开更多
关键词 应激 大鼠 心室肌细胞 L—型钙离子通道 膜片钳 钙超载 细胞凋亡 神经内分泌
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预热诱导心肌细胞表达Hsp70对Fas通路活化后细胞凋亡变化的研究 被引量:5
4
作者 王万银 弓景波 +1 位作者 吴淑庆 钱令嘉 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期309-310,314,共3页
目的:研究Hsp70对Fas通路活化后细胞凋亡的作用及其可能机制。方法:水浴预热诱导培养新生大鼠心肌细胞Hsp70表达,Fas抗体活化Fas通路,Westernblot测定Hsp70的表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率,特异性底物测定caspase-8及caspase-3的活力... 目的:研究Hsp70对Fas通路活化后细胞凋亡的作用及其可能机制。方法:水浴预热诱导培养新生大鼠心肌细胞Hsp70表达,Fas抗体活化Fas通路,Westernblot测定Hsp70的表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率,特异性底物测定caspase-8及caspase-3的活力。结果:预热可以使心肌细胞Hsp70表达升高,Fas抗体降低细胞凋亡率,高表达Hsp70可以降低Fas通路活化后心肌细胞凋亡率,同时相应使caspase-8及caspase-3活力升高的幅度降低。结论:Hsp70可能通过抑制caspase-8及caspase-3的活力而降低Fas通路活化后培养新生大鼠心肌细胞凋亡的发生。 展开更多
关键词 热应激 HSP70 FAS 细胞凋亡
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人热休克因子1对抗增殖蛋白基因启动子转录调控的研究 被引量:2
5
作者 刘晓华 郭东升 +4 位作者 王新兴 张志清 战锐 王晓明 钱令嘉 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期349-352,共4页
目的:研究人热休克因子1(hHSF1)对抗增殖蛋白(prohibitin)启动子转录活性的影响。方法:采用PCR方法扩增hHSF1全长编码序列,构建pcDNA3.1(+)-hHSF1真核表达载体,将pcDNA3.1(+)-hHSF1和人prohibitin基因启动子表达载体pGL3-prohibitin共... 目的:研究人热休克因子1(hHSF1)对抗增殖蛋白(prohibitin)启动子转录活性的影响。方法:采用PCR方法扩增hHSF1全长编码序列,构建pcDNA3.1(+)-hHSF1真核表达载体,将pcDNA3.1(+)-hHSF1和人prohibitin基因启动子表达载体pGL3-prohibitin共同转染HEK293细胞,采用双荧光素酶报告基因检测系统,检测双荧光素酶活性,分析hHSF1对抗增殖蛋白基因启动子的转录调控作用。结果:成功构建pcDNA3.1(+)-hHSF1真核表达载体,荧光素酶活性测定发现hHSF1明显上调pGL3-prohibitin转录。结论:hHSF1对prohibitin具有转录调控作用。 展开更多
关键词 PROHIBITIN hHSF1 转录调控 双荧光素酶报告基因检测系统
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提高生物技术制药教学效果初探 被引量:7
6
作者 曹筑荣 杲修杰 +1 位作者 吴守振 贺丽清 《长江大学学报(自科版)(中旬)》 CAS 2009年第4期110-112,共3页
对生物技术制药在课程内容和教学方法上的初步探索进行了总结,认为应结合生物技术制药的学科特点,在教学过程中突出药学特色;应不断更新教学内容,让学生经常接触到学科的前沿知识;应开展启发式教学,引导学生进行科学思维;应充分利用现... 对生物技术制药在课程内容和教学方法上的初步探索进行了总结,认为应结合生物技术制药的学科特点,在教学过程中突出药学特色;应不断更新教学内容,让学生经常接触到学科的前沿知识;应开展启发式教学,引导学生进行科学思维;应充分利用现代化信息技术和教学工具,调动学生学习的积极性。 展开更多
关键词 生物技术 制药 教学
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Prohibitin——肿瘤与代谢性疾病治疗的新靶标 被引量:5
7
作者 郭东升 钱令嘉 袁聚祥 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2007年第5期401-405,共5页
Prohibitin(PHB)是一种高度保守、分布广泛的蛋白质。PHB不仅是一类新型的分子伴侣蛋白,而且参与调节细胞周期、维持线粒体结构和功能,具有抗细胞凋亡、衰老和增殖的作用。PHB的多种功能和不同定位,以及在多种疾病中存在表达差异的现象... Prohibitin(PHB)是一种高度保守、分布广泛的蛋白质。PHB不仅是一类新型的分子伴侣蛋白,而且参与调节细胞周期、维持线粒体结构和功能,具有抗细胞凋亡、衰老和增殖的作用。PHB的多种功能和不同定位,以及在多种疾病中存在表达差异的现象提示,PHB可能参与疾病的发生与发展过程。因此,PHB在多种疾病如:肿瘤、糖尿病和肥胖等的治疗方面将会成为有用的药物靶标。 展开更多
关键词 PROHIBITIN 肿瘤 代谢性疾病 治疗
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Prohibitin特异性MiRRNAi表达载体构建及其干扰效果测定 被引量:1
8
作者 郭东升 王新兴 +3 位作者 刘晓华 战锐 袁聚祥 钱令嘉 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期139-144,共6页
目的:构建携带prohibitin(PHB-1)基因的MiR RNAi真核表达载体pcDNA^(TM)6.2-GW/EmGFP-MiR,并观察其转染HEK293细胞株前后PHB-1的表达变化。方法:根据GenBank中prohibitin的序列,设计特异的两条互补的单链寡核苷酸退火后形成双链,克隆至p... 目的:构建携带prohibitin(PHB-1)基因的MiR RNAi真核表达载体pcDNA^(TM)6.2-GW/EmGFP-MiR,并观察其转染HEK293细胞株前后PHB-1的表达变化。方法:根据GenBank中prohibitin的序列,设计特异的两条互补的单链寡核苷酸退火后形成双链,克隆至pcDNA^(TM)6.2-GW/EmGFP-MiR质粒缺口末端,连接在质粒上生成含MiR RNAi pcDNA^(TM) 6.2-GW/EmGFP-MiR-PHB载体,测序鉴定后,用脂质体将重组子转染至HEK293细胞中,用Western blotting检测干扰后HEK293细胞内PHB-1表达的变化。结果:将目的序列成功连接到载体上,并经测序分析证实载体构建成功。Western blotting检测结果证实构建的PHB-1 MiR RNA表达重组体可显著抑制HEK293细胞内PHB-1的表达。结论:成功构建了携带PHB-1基因的MiR RNAi真核表达载体。 展开更多
关键词 PROHIBITIN HEK293细胞 RNA干扰
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核转录因子TR3小干扰RNA载体的构建及其效果鉴定
9
作者 王新兴 郭东升 +2 位作者 冯红 战锐 钱令嘉 《生物技术通讯》 CAS 2008年第2期188-190,共3页
目的:构建核孤儿受体TR3的小干扰RNA(siRNA)真核表达载体,并进行沉默效果测定。方法:根据TR3 mRNA序列和载体psiSTRIKE的粘性末端,设计合成TR3的干扰RNA序列,退火后克隆至psiSTRIKE,经测序鉴定后用阳离子脂质体将重组子和TR3高表达载体T... 目的:构建核孤儿受体TR3的小干扰RNA(siRNA)真核表达载体,并进行沉默效果测定。方法:根据TR3 mRNA序列和载体psiSTRIKE的粘性末端,设计合成TR3的干扰RNA序列,退火后克隆至psiSTRIKE,经测序鉴定后用阳离子脂质体将重组子和TR3高表达载体TR3-pcDNA共转染至HEK293细胞中,以Western blotting检测干扰后HEK293细胞内TR3表达的变化。结果:Western blotting检测结果证实构建的TR3 siRNA表达重组载体可显著抑制HEK293细胞内TR3的高表达。结论:构建了核孤儿受体TR3 siRNA真核表达载体。 展开更多
关键词 核因子TR3 小干扰RNA HEK293细胞
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β-淀粉样蛋白、核因子-κB与阿尔茨海默病 被引量:3
10
作者 任会荣 《国外医学(老年医学分册)》 2001年第5期223-226,共4页
β-淀粉样蛋白沉积是阿尔茨海默病核心的病理改变,对β-淀粉样蛋白的毒性作用机制,虽已进行了大量研究,尚不明了。核因子κB是一种在神经系统广泛表达的转录因子,近年发现它可与阿尔茨海默病相互作用而参与阿尔茨海默病的发病;核因子-κ... β-淀粉样蛋白沉积是阿尔茨海默病核心的病理改变,对β-淀粉样蛋白的毒性作用机制,虽已进行了大量研究,尚不明了。核因子κB是一种在神经系统广泛表达的转录因子,近年发现它可与阿尔茨海默病相互作用而参与阿尔茨海默病的发病;核因子-κB的激活既可介导阿尔茨海默病致炎症介质产生、自由基生成增多、诱发细胞凋亡等病理损伤作用,又是β-淀粉样蛋白发挥正常生理功能所需,具有一定的神经保护作用。对核因子-κB如何介导阿尔茨海默病作用的信号转导机制的深入研究,将为阿尔茨海默病的病因学、治疗学提供新进展。 展开更多
关键词 Β-淀粉样蛋白 核因子-ΚB 阿尔茨海默病
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