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题名离子交换层析分离纯化人结合珠蛋白的研究
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作者
闫晶晶
赵雄
马玉媛
马小伟
吕茂民
章金刚
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机构
广西医科大学
军事医学科学院壁战输血研究所血液安全保障技术研究北京市重点实验室
华兰生物工程股份有限公司
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出处
《军事医学》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第7期569-572,592,共5页
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基金
国家863计划资助项目(2012AA021902)
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文摘
目的探索应用离子交换层析从Cohn组分Ⅳ分离纯化人结合珠蛋白(haptoglobin,Hp)的方法,并对纯化产物进行初步鉴定及活性分析。方法 Cohn组分Ⅳ溶解液稀释后经利凡诺络合,收集上清并用50%硫酸铵进行沉淀,沉淀重溶后用Q Sepharose Fast Flow层析分离纯化得到目的蛋白。然后利用SDS-PAGE及免疫印迹对目的蛋白进行鉴定,并利用Native-PAGE方法测定纯化产物的活性。结果 Cohn组分Ⅳ经过利凡诺络合及盐析处理后能有效去除部分杂蛋白,并使目的蛋白富集。利用离子交换层析方法从Cohn组分Ⅳ中纯化得到的主要产物为Hp2-2,SDS-PAGE显示Hp纯度较好,免疫印迹分析进一步证明,利用该法成功分离得到目的蛋白Hp,且利用NativePAGE方法测得目的蛋白活性为2.8 U/ml。结论利用该法从Cohn组分Ⅳ中成功分离得到人Hp,方法简单,易于放大生产,具有较好应用前景。
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关键词
结合珠蛋白
Cohn组分Ⅳ
纯化
鉴定
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Keywords
haptoglobin Cohn fraction Ⅳ purification identification
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分类号
O658.1
[理学—分析化学]
R945
[医药卫生—微生物与生化药学]
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