马抗SARS-CoV免疫球蛋白对SARS-CoV GZ-01株中和作用的研究

观察马抗SARS-CoV免疫球蛋白对SARS-CoV GZ-01毒株的中和作用,为马抗SARS-CoV免疫球蛋白用于SARS的治疗提供科学的依据。采用CPE、MTT测定马抗SARS-CoV免疫球蛋白对SARS-CoV GZ-01株的中和作用。结果显示,马抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab’)2治疗性抗体对SARS-CoV GZ-01株具有很好的中和作用,三批马抗SARS-CoV免疫球蛋白的CPE和MTT中和效价分别达到1:6400、1:6400、1:12800,且两种方法测得结果一致。

布鲁菌毒力因子研究进展

布鲁菌是一种兼性细胞内寄生菌,能够严重地导致人畜共患布鲁菌病。本文就影响布鲁菌致病能力的毒力因子进行综述。

以人乳头瘤病毒16 L1为载体的流感通用疫苗初步研究

目的构建以人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）16 L1为载体的甲型流感病毒M2基因胞外区（M2e）通用疫苗杆粒，利用昆虫细胞杆状病毒表达系统，进行初步的蛋白表达。方法利用PCR技术将甲型流感病毒M2e基因序列与HPV16 L1相连。经酶切、酶联将融合基因插入pFastBac HTA载体，在DH10Bac细胞中进行同源重组，经测序鉴定后构建M2e-HPV16 L1杆粒，脂质体转染sf9昆虫细胞，收获并扩增含有M2e-HPV16 L1的杆状病毒，经扩增后获得高效价的重组杆状病毒，用SDS-PAGE、免疫荧光法和电镜检测目的蛋白的表达。结果构建了以HPV16 L1为载体的M2e通用疫苗杆粒，通过转染sf9昆虫细胞得到初步M2e-HPV16 L1融合蛋白表达。结论成功构建了HPV16 L1与甲型流感病毒M2e融合蛋白的病毒样颗粒，为流感通用疫苗的研制奠定了基础。

小鼠可溶性IL-5α受体在Bac-to-Bac系统中的表达及其鉴定

目的应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达小鼠可溶性IL-5α受体(Soluble IL-5 receptorα,sIL-5Rα)蛋白,并对其抗原性进行鉴定。方法应用Vector NTI AdvanceⅡ软件优化小鼠IL-5Rα基因胞外区密码子后合成序列,将sIL-5Rα克隆至pFastbacI中,构建重组穿梭质粒pFastbacI-sIL-5Rα,转化感受态大肠杆菌DH10BacTM,构建重组杆粒Bacmid-sIL-5Rα,转染sf9细胞,通过异源基因重组获得杆状病毒,采用Reed-Muench法检测扩增后病毒滴度;将P3、P4代病毒以0.05 MOI感染sf9细胞,SDS-PAGE鉴定sIL-5Rα蛋白的表达,表达产物应用阳离子交换层析法进行纯化,并对纯化的sIL-5Rα蛋白进行SDS-PAGE及Western blot鉴定。结果重组杆粒Bacmid-sIL-5Rα经PCR鉴定,证明构建正确;P3代重组杆状病毒的病毒滴度为1.7×107pfu/ml;表达及纯化的sIL-5Rα蛋白在相对分子质量约43 000处可见特异蛋白条带,感染的sf9细胞裂解上清可与兔抗小鼠IL-5Rα多克隆抗体发生特异性反应。结论Bac-to-Bac杆状病毒表达系统成功表达了小鼠可溶性IL-5Rα受体蛋白,为进一步研究其生物学功能及在哮喘模型动物中的治疗作用奠定了实验基础。