医学媒介生物学纵论

1媒介生物的自然属性 媒介生物这词显现着生物功能及行为,充溢着生态学的内涵。因为媒介行为必然至少涉及三方,而且需要有相宜的时机和条件方可。按黑克儿（Haeckel）早在1869年所述＂生态学是研究生物有机体与其周围环境（包括生物环境和非生物环境）

云南西部地区家畜动物感染巴贝虫的分子流行病学调查

目的了解云南省西部地区家畜动物感染巴贝虫的状况,为制定防治措施提供依据。方法在云南省西部地区12个县(市)采集家畜动物抗凝血液1 073份(牛血274份、羊血395份、犬血354份,马血33份,驴血17份)。提取基因组DNA,运用PCR检测巴贝虫18SrRNA 1 600bp长片段,通过基因序列比对及系统进化分析进行巴贝虫定种。结果共检出巴贝虫阳性样本50份,分属5种巴贝虫,总阳性率4.66%。其中牛血中检出11份阳性(4.01%),4份为牛巴贝虫(B.bovis),7份为双芽巴贝虫(B.bigemina)。羊血中检出38份阳性(9.62%),37份为奥氏巴贝虫样寄生虫(B.odocoilei-like parasites),1份为狍巴贝虫样寄生虫(B.capreoli-like parasites);犬血中检出阳性1份(0.28%),为韦氏巴贝虫(B.vogelli)。马和驴未检出阳性。结论云南省西部部分县市的家畜动物存在多种巴贝虫感染,给当地畜牧业的发展和人类的健康造成一定的危害,需加强防范,当地人群感染情况值得进一步调查。

甲型流感病毒H1N1 HA蛋白在果蝇S2细胞中的表达及免疫原性研究

目的在果蝇S2细胞表达甲型流感H1N1HA并分析其免疫原性。方法根据GenBank发表的甲型流感病毒(H1N1)HA基因序列,经过密码子优化,全基因合成编码HA的基因,并于其N端引入特定的空间折叠序列,定向连接至表达载体pMT/Bip/V5-His A,构建重组表达载体pMT-HA。酶切鉴定正确后,用脂质体转染法与辅助质粒pCoHygro共转染果蝇S2细胞,潮霉素加压筛选稳定细胞系,在无血清培养基中以硫酸铜溶液诱导表达,SDS-PAGE电泳及Western blot鉴定,经镍柱纯化后免疫小鼠,ELISA检测其诱导的特异性抗体水平。结果获得了稳定表达HA的S2细胞株,目的蛋白以分泌形式表达于上清,并形成三聚体,可以被H1N1HA抗体识别;免疫小鼠后可诱导机体产生抗HA特异性抗体。结论获得了纯化的三聚体形式表达的HA蛋白,并具有较好的免疫原性,具有很好的疫苗应用前景。

我国东北三省蠓科昆虫的区系分布研究

目的调查研究我国东北三省蠓科昆虫的区系分布。方法采用人帐诱、诱虫灯诱、动物诱和网捕法采集蠓类并参考相关文献。结果在东北三省24市县采获蠓类465 840只,计3亚科13属128种,包括45新种,20个中国新记录;吸血蠓2属82种。辽宁省已知3亚科5属54种,分布在23市县;吉林省已知2亚科3属44种,分布在9市县;黑龙江省已知13属89种,分布在21市县。区系分布研究结果,东北区分布124种,其中大兴安岭亚区分布24种,长白山亚区分布107种,松辽平原亚区分布35种;蒙新区东部草原亚区分布13种。结论为我国东北三省蠓科昆虫的区系分布研究提供了科学依据。

禽流感病毒跨种属感染人的机制研究进展

禽流感病毒(avian influenza virus,简称AIV)不仅引起禽类感染和流行,而且可以打破种属屏障(spec ies barrier)、引起人或其他哺乳动物感染和传播。近年来对人呼吸道抗禽流感病毒感染的非特异屏障机制、禽流感病毒对人感染的机制研究不断取得新的进展。

C6/36细胞不同血清型登革病毒受体差异的研究

目的研究登革病毒4个血清型在C6/36细胞上的受体差异。方法用病毒与细胞受体结合的VOPBA方法进行鉴定。结果C6/36细胞的4个血清型登革病毒受体分子质量相同,约为35 ku。结论C6/36细胞上4个血清型登革病毒受体相同。

自然感染的宿主动物和病人体内汉城型汉坦病毒S片段末端序列多样性研究

在汉城型汉坦病毒（Seoulvirus，SEOV）长期感染的Vero—E6细胞过程中发现，病毒在持续感染过程中存在RNA3’末端序列缺失现象，可能对病毒的持续感染有重要作用。而自然感染的宿主动物或病人体内病毒RNA末端序列的变异情况并不清楚。本文从SEOV感染的病例血块以及SEOV检测阳性的褐家鼠肺组织中提取RNA，测定病毒s片段末端序列，并进行RNA二级结构模拟。结果发现，自然感染的宿主动物褐家鼠体内的SEOVS片段5’末端、3’末端及双末端均可出现序列缺失，而感染病例体内的病毒仅在一个克隆检测到3’末端序列缺失。与长期感染的Vero．E6细胞感染模型中仅存在较短的3’末端序列缺失现象不同，宿主动物的克隆既有较短的3’末端序列缺失，也有5’末端和双末端序列缺失，另外还有典型的大片段序列缺失。不同序列缺失类型的RNA序列二级结构模型存在显著差异。自然感染的宿主动物和病人体内的SEOVS片段序列末端存在序列缺失多样性，但前者的多样化程度更高。因此我们认为这些序列缺失可能受宿主因素影响，并与病毒对宿主的持续感染相关。

蚊虫群落与环境因素关系的地理信息系统分析

目的研究云南省南部地区的新移民村建设对蚊虫群落动态的影响。方法应用地理信息系统(GIS)分析云南省南部地区2个自然村中蚊虫群落与相关环境因子的关系。结果水稻田面积对于样点蚊虫群落最具有影响力,水稻田面积与蚊虫群落的种类数量、个体数、多样性、优势度均有统计学上的相关关系;居民点距离水稻田的距离也与居民点中蚊虫群落的均匀度呈正相关,而居民点距离河流距离与居民点中蚊虫群落的种类数量则呈负相关。结论在云南省南部地区进行的新村镇建设过程中,相关开发措施带来的环境因素的改变,会引起原来环境中的蚊虫群落的相应变化。

北京昌平鼠间汉坦病毒感染时间动态变化的调查

目的了解鼠类自然感染汉坦病毒(HV)时间动态变化。方法选取北京昌平南口镇某部驻地,从2002年8月至2004年5月采用夹夜法捕获鼠形动物,针对汉坦病毒M基因部分片段设计SEOV和HTNV型特异性引物,应用RT-PCR法检测宿主肺组织中携带HV-RNA及其型别情况;应用ELISA法和间接IFAT检测IgG抗体。利用SPSS软件分析宿主动物HV感染的时间动态特征。结果共捕获啮齿动物296只,平均感染率11%。整个调查周期总体宿主种群密度波动不大,局部小生境(养殖场)种群波动明显。优势宿主褐家鼠平均种群密度与其感染率变化之间具相关性(r=0.594,P=0.023),养殖场褐家鼠密度与HV感染率之间相关性极显著(r=0.746,P=0.008)。褐家鼠性比和阳性率变化之间不具统计学意义相关性(r=0.541,P=0.086)。成幼比和阳性率变化之间则具显著相关性(r=0.697,P=0.046)。结论北京昌平鼠间汉坦病毒感染长期持续存在,其感染率与种群密度随时间呈现动态变化,两者之间具有相关性,并因生境而异。优势宿主种群结构特征及其动态变化与HV感染也存在较为复杂的关系。

高效液相色谱法测定马来酸桂哌齐特的含量

目的采用高效液相色谱法测定马来酸桂哌齐特的含量。方法选用迪马-C18(250mm×4.60mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.05mol/ml磷酸氢二钠溶液(40:60)为流动相;检测波长为230nm。结果马来酸桂哌齐特在200～700μg/ml(r=0.9998)范围内线性关系良好,平均回收率为101.06%,RSD为0.48%(n=9)。结论本法可用于测定马来酸桂哌齐特的含量。

高效液相色谱法测定注射用福莫司汀有关物质和含量

目的建立注射用福莫司汀含量测定及有关物质检查的高效液相色谱测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱:Zorbax SB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相:甲醇-0.2%磷酸二氢铵(2∶1.5,V/V);流速:1 ml/min;紫外检测波长:230 nm。结果进样量在0.05～10.00μg范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998);福莫司汀平均回收率为99.72%,RSD为0.16%;所检测的有关物质含量约为0.5%。结论该法简便、快速,结果准确、可靠,重复性好,可用于注射用福莫司汀含量测定及有关物质检查。

中国麻虻属一新记录种（双翅目：虻科）

本文记述了我国麻虻属毛股麻虻组Haematopota pilosifemura group一新纪录一突缘麻虻Haematopota procyon Stone et Philip，1974。标本保存于军事医学科学院微生物流行病研究所医学昆虫标本馆。

中国蝇科棘蝇属四新种（双翅目：蝇总科）

报道采自中国蝇科Muscidae棘蝇属Phaonia Robineau—Desvoidy，1830中的4新种：内蒙棘蝇Phaonia neimongolica sp．nov．；隐叶棘蝇Phaoniacrypsocerca sp．nov．；新荡棘蝇Phaoniaxinierrans sp．NOV．；乌股棘蝇Phaoniaaterrimifemura sp．nov．模式标本存于军事医学科学院微生物流行病研究所医学昆虫标本馆。

新疆北湾地区药物处理蚊帐对蚊虫击倒效果研究

目的通过药物处理蚊帐对蚊虫进行击倒实验,在北湾地区室内环境中通过药物处理蚊帐对蚊虫快速击倒效果进行研究。方法研究中选用经BASF药物处理蚊帐、20次洗涤的BASF药物处理蚊帐、5ml有效成分10%的奋斗呐处理的普通蚊帐(WHO推荐),普通军用蚊帐作为对照,在野外环境中用吸蚊器采集当地优势蚊种刺扰伊蚊分别放入4种处理蚊帐中,观察4种处理蚊帐对当地蚊虫的首数击倒、半数击倒、全数击倒时间,最后比较分析4种处理蚊帐对当地主要蚊种的快速击倒效果。结果在对当地主要蚊种刺扰伊蚊的快速击倒效果上,经药物处理的BASF蚊帐>清洗20次药物处理的BASF蚊帐>WHO推荐的奋斗呐处理的蚊帐。3种处理蚊帐在7min以内都能形成对蚊虫的首数击倒,3种蚊帐在首次击倒时间上差异无统计学意义(F=2.375,P=0.174),在17min内形成半数击倒,BASF药物处理蚊帐与奋斗呐处理蚊帐在时间上差异有统计学意义(P=0.036);BASF2种处理蚊帐在27min内可以全部击倒蚊虫,奋斗呐处理的蚊帐则要54min才能全部击倒蚊虫,BASF2种处理蚊帐与奋斗呐处理蚊帐间差异均有统计学意义(P<0.001)。结论经过药物处理的蚊帐比不经任何处理的普通蚊帐对蚊虫击倒效果要好,适当选择药物处理蚊帐可以为北湾边防部队提供有效的保护。

HIV-1耐药性突变位点研究进展

HIV耐药性的产生是抗病毒治疗的瓶颈,而耐药性的发生主要是因为HIV基因组中部分密码子位点发生突变所致。随着HIV耐药性研究的逐步深入,导致HIV耐药的突变位点也逐渐明晰化,尤其是针对高效抗病毒治疗中经常使用的抑制剂的耐药突变位点的研究取得了明显进展。明确HIV耐药突变位点单独存在或与其他位点联合作用下对病毒抑制剂的影响,将使得抗病毒治疗更有针对性。

虫媒黄病毒复制子研究进展

复制子是在相应病毒基因组全长感染性克隆技术基础上,保留了病毒复制和翻译必需的全部顺式作用元件,其大部分结构蛋白基因缺失或由外源基因替代构建成的病毒亚基因组.黄病毒复制子转染细胞无细胞病变,在细胞内表达稳定,可筛选稳定表达复制子的细胞系,目前已广泛应用于病毒复制和翻译的分子机制、新型疫苗载体构建、抗病毒药物筛选等多个研究领域.本文综述了主要虫媒黄病毒复制子近年来的研究进展.

对in—houseHIV-1基因型耐药性检测方法的评价

目的评价in—houseHIV—1基因型耐药检测方法的敏感性与准确性。方法收集2004年4月至2008年10月全军艾滋病检测中心检测的来自河南、广西130份血浆标本。以美国FDA批准的HIV-1基因型耐药性检测系统（ViroSeq^TMv2．0）为参考方法，并与建立起的基因型耐药性检测方法（in—house）平行检测待检样本，比较二者在扩增效率、耐药突变位点检测以及耐药报告等方面的一致性。结果已知的14850个耐药突变位点中，2种方法可同时对99．3％（14752／14850）的耐药突变位点准确检出；在对不同突变位点的检测中，2种方法对蛋白酶抑制剂耐药突变位点、逆转录酶抑制剂耐药突变位点及两类抑制剂耐药突变位点检测一致率分别为99．7％、99．0％和99．3％（Kappa值分别为0．9099、0．9521和0．9488，P值均〈0．01）；2种方法出具的两类药物的耐药结果报告一致率94．6％（Kappa=0．6374，P〈0．01）。本研究共检测到34个ViroSeq“数据库（ViroSeq^TMsoftwarev2．7）未收录位点，其中2个突变位点对耐药的影响较大。结论in—house基因型耐药性检测方法与ViroSeq^TM基因型耐药性检测系统在耐药突变位点检测以及评价上具有高度一致性，是一种快速准确、性价比高的HIV-1基因型耐药检测方法，同时在耐药数据库方面具有一定优势。

京冀蠓类初步名表及毛蠓1新种(双翅目:蠓科)

〔目的〕发布京冀地区蠓类本底调查情况,为《环渤海湾输入性医学媒介(蠓类)调查研究》提供科学对照依据。〔方法〕根据实地调查和文献查询列出了京冀地区蠓类种群组成,并对2005年在秦皇岛北戴河捕获的1新种蠓类进行了描述。〔结果〕京冀地区蠓类初步名表,9属36种及毛蠓1新种。〔结论〕加强媒介昆虫的本底调查研究,是科学制定虫媒防治预案、疫情预测和有效控制及预警外来有害媒介的重要手段。

结核分枝杆菌ESX-1分泌蛋白对巨噬细胞调控作用

近年来结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculo-sis,MTB）多重耐药性（multi-drug resistance,MDR）的不断出现以及艾滋病人群对MTB易感性的增加,导致患结核病的人数迅速增加,死亡率也在不断上升,大有死灰复燃的趋势,这促使科研工作者加速了新疫苗研制和新药物的开发,而与之相关的就是对关的就是对结核分枝杆菌致病机理和发病机制的深人研究提出了非常紧迫的要求。