微波辐射对大鼠血脑屏障通透性影响

目的研究微波辐射对大鼠血脑屏障（BBB）结构与功能的影响。方法采用10.30和100mW/cm^2微波辐射Wistar大鼠,通过苏木素伊红（HE）染色观察BBB形态结构的变化;采用伊文思蓝（EB）染色和硝酸镧电镜示踪检测BBB通透性变化。结果10～100mW/cm^2微波辐射后大鼠大脑皮层与海马部分胶质细胞固缩深染;血管周间隙增宽。假辐射组EB局限于血管腔内;100mW/cm^2组辐射后3d,可见EB弥散至血管腔外。定量分析结果可见,10～100mW/cm^2微波辐射后3～14 d海马组织中EB含量均高于假辐射组,其中10和30mW/cm^2组在7 d内进行性增加,14 d恢复;100mW/cm^2组在14 d内进行性增加。假辐射组镧离子仅滞留在血管腔内;100mW/cm^2组辐射后1和7 d,镧颗粒分别见于血管周围的内皮下层及脑间质细胞间隙。结论微波辐射可致大鼠BBB结构与功能发生改变,BBB通透性增加。

镀铜织物屏蔽的防电磁脉冲辐射作用

目的利用在体动物模型观察镀铜织物物理金属网电磁屏蔽布(EM-4)对电磁脉冲(EMP)辐照后免疫组织的防护效果,并在离体Jurkat细胞损伤模型上探讨药物防治的可能性。方法选定Wistar大鼠和Jurkat细胞进行6×104V/mEMP辐照,复制动物模型和细胞模型,应用血生化分析、光镜、噻唑蓝(MTT)、流式细胞术检测研究EM-4屏蔽布和药物4,5,7三羟异黄酮(Cenistein)对EMP辐照后免疫组织和细胞的防护效果。结果(1)EM-4屏蔽布防护组大鼠外周血白细胞和淋巴细胞计数在照后恢复快于无防护组。(2)Genistein能部分阻断EMP辐射对Jurkat细胞增殖的抑制和S期细胞的减少。结论EM-4和蛋白酪氨激酶(PTK)抑制剂Genistein对6×104V/mEMP所致细胞免疫功能损伤、细胞增殖活力下降及离体细胞DNA合成受阻有一定防护效果。

MODS小鼠脾脏树突细胞PD-1、PD-L1的表达变化及其意义

目的观察多器官功能障碍综合征(MODS)小鼠脾脏树突细胞(DC)中负性共刺激分子(PD-1、PD-L1)和CD86、MHC-Ⅱ的表达情况,探讨DC在脓毒症末期免疫抑制中的作用和机制。方法130只C57BL/6小鼠随机分为6h、12h、24h、48h、5-7d、10-12d组和对照组,前6组实验小鼠采用腹腔注射酵母多糖法复制脓毒症-MODS模型(每组20只),对照组(10只)不做处理。观察各组脾脏的病理形态学改变,使用BDIMagTM树突细胞富集磁珠分离出脾脏DC,运用流式细胞仪检测脾脏DC中PD-1、PD-L1、MHC-Ⅱ分子(I-Ab)及CD86的表达变化规律及其与病程的关系。结果24h、48h组和10-12d组实验小鼠脾脏组织结构明显破坏。脾脏DC中PD-L1的表达在病程早期(6h)即明显升高(78.4%±34.5%,P<0.05),而后迅速下降,至24h时恢复至正常水平,5d后再度升高,持续至病程终末的MODS期(10-12d)达到高峰(81.7%±31.8%,P<0.01)。PD-1在脾脏DC中表达量较低,但具有与PD-L1相同的变化趋势。MHC-Ⅱ分子(I-Ab)与CD86在致伤早期(6h)明显升高,24h开始下降,至10-12d时下降至正常水平。结论病程早期脾脏以活化DC增生为主,而在MODS期主要为耐受性DC。耐受性DC中共刺激分子及MHC-Ⅱ分子表达下降,而负性共刺激分子表达明显上调,并可通过PD-L1和PD-1分子抑制T细胞的功能,发挥负向免疫调节作用,诱导免疫抑制形成和MODS的发生。

微波辐射后大鼠海马组织中水通道蛋白4的表达

目的探讨微波辐射后大鼠海马组织中水通道蛋白4（AQP4）的表达。方法采用0、10、30和100mW／cm^2微波辐射70只雄性Wistar大鼠，于辐射后6h及1、3、7、14d活杀大鼠取海马，采用免疫组化和Westernblot方法检测大鼠海马组织中AQP4蛋白表达的变化，原位杂交、反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）观察AQP4基因水平的改变。结果10、30、100mW／cm^2微波辐射后大鼠海马组织中AQP4表达异常，其蛋白水平于10、30mW／cm^2组呈先增加后恢复的过程，100mW／cm^2组则呈进行性增加改变，与假辐射组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。10mW／cm^2组于辐射后6h AQP4 mRNA即升高（0．51±0．02），与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；30、100mW／cm^2组均在7d时达最大值（分别为0．46±0．02、0．43±0．08），与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．01，P〈0．05）。结论微波辐射可导致大鼠海马组织中AQP4表达增加，此改变有可能参与了微波辐射致血脑屏障通透性升高的过程及脑水肿的发生。