S-HPM辐射对大鼠睾丸TLR表达的影响

目的探讨S波段高功率微波(S band high power microwave,S-HPM)辐射对大鼠睾丸Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)表达的影响。方法 60只雄性Wistar大鼠经0 m W/cm2、30 m W/cm2和100 m W/cm2的S-HPM辐射20 min,通过TUNEL方法检测辐射后6 h、3 d、7 d和14d睾丸生精细胞的凋亡。采用Real-time PCR和Western blotting检测辐射后睾丸组织TLR2、TLR3、TLR4和TLR5的mRNA和蛋白水平的表达变化。结果经30 m W/cm2和100 m W/cm2的S-HPM辐射后,生精细胞凋亡率随时间延长而增加,100 m W/cm2组重于30 m W/cm2组(P<0.05);S-HPM辐射后6 h、3 d和7 d可见TLR2-5 mRNA表达不同程度的增加(P<0.05,P<0.01);辐射后7 d可见TLR2-5蛋白表达的增加,100 m W/cm2与30 m W/cm2组相比无显著差异。结论 S-HPM辐射可致睾丸生精组织凋亡,TLR2-5的表达上调,参与了微波辐射致生精细胞凋亡的病理生理过程。

TGF-β1在肝再生调控中的作用研究

目的探讨70％肝部分切除后TGF-β1在肝再生调控中的作用。方法MTT方法检测TGF-β1对原代肝细胞的作用；建立70％肝部分切除（PH）模型，收集切除后2d的血清，用MTT方法检测其对IG12细胞的促增殖作用，并用免疫细胞化学方法观察其对IG12细胞TGF-β1表达的影响；用免疫组织化学和Western blot检测再生肝组织中TGF-β1的表达。结果TGF-β1能抑制原代肝细胞增殖；PH后大鼠血清不仅对IG12细胞有明显的促增殖作用，还能提高IG12细胞TGF-β1的表达；免疫组化结果显示大鼠PH后肝细胞TGF-β1表达逐渐下降，至第3天呈阴性结果，而后升高，直至再生结束时稳定在正常肝脏表达水平，Western blot显示PH后再生早期TGF-β1表达暂时升高，12h达到高峰，第1天开始下降，第3天降至最低点，5d开始逐渐升高，至第7天恢复到正常水平。结论TGF-β1明显抑制肝细胞增殖，在PH后肝再生过程中，肝组织中TGF-β1表达明显下降，有助于肝再生的完成。

定量比较不同抗原修复条件对免疫组化阳性表达的影响

目的探讨抗原修复时抗原修复液pH值、修复温度和修复时间对免疫组化检测结果的影响。方法取扩张性心肌病人的心肌标本,经10%中性缓冲甲醛固定液固定,采用免疫组化二步法对心肌组织中结蛋白的表达进行染色。实验中对同一蜡块进行连续切片,微波修复时分别使用枸橼酸缓冲液、PBS、EDTA 3种不同pH的缓冲液进行抗原修复:枸橼酸缓冲液(pH 6.0)、PBS(pH 7.0)和EDTA(pH 9.0);每一种抗原修复液又分别采用100℃、97℃、80℃、70℃4个不同的修复温度;应用图像分析仪对比不同条件下心肌组织中结蛋白的表达情况。结果在EDTA缓冲液中修复100℃持续15 m in,阳性信号得到充分表达,抗原表达由强到弱依次为EDTA组、枸橼酸缓冲液组、PBS组。结论进行免疫组化检测时采用高pH值的EDTA进行抗原修复效果较理想。

实体瘤的EPR效应及治疗策略

大多数实体瘤具有特殊的病理生理学特征,如血管高密度、结构完整性差,淋巴回流障碍,局部血管通透性介质浓度高等。大分子物质和脂质在肿瘤组织透过性增强及滞留效应称作EPR效应,此现象存在于多数实体瘤中。EPR效应促进了大分子类物质在肿瘤组织的选择性分布,可以增加药效并减少系统副作用。本文详述了EPR效应的基本理论,增强EPR效应、促进大分子药物肿瘤被动靶向性的方法,同时讨论了大分子药物的实体瘤化疗策略和影响因素。

高功率微波辐射对大鼠海马神经元突触超微结构及氨基酸类神经递质含量的影响

目的观察高功率微波(HPM)辐射后大鼠海马神经元突触超微结构及氨基酸类神经递质含量的变化。方法采用5、10、30及100 mW/cm^2 HPM辐照60只Wistar雄性大鼠,于照后6 h、1 d和7 d处死各组动物并取海马组织,应用电镜及图像分析定量观察海马神经元突触超微结构,采用高效液相色谱法检测海马组织中谷氨酸(Glu)、天门冬氨酸(Asp)、γ-氨基丁酸(GABA)和甘氨酸(Cly)4种氨基酸类神经递质的含量。结果5～100 mW/cm^2 HPM辐射后,大鼠海马神经元线粒体肿胀,粗面内质网扩张,染色质浓缩、边集；突触内囊泡堆积或排空,突触间隙增宽,突触后致密物(postsynaptic den- sity,PSD)增厚,活性区延长；大鼠海马于辐射后6 h,Glu、Asp、和Gly含量减少,且以Glu和Gly含量减少为主；10 mW/cm^2组在照后7 d内Glu含量均明显降低；Gly含量在照后6 h明显降低,1 d时基本恢复。结论HPM辐射可引起大鼠海马神经元突触超微结构的改变,并可影响海马氨基酸类神经递质的含量。