联合作用剂量反应关系评价研究──广义三阶多项式回归模型

联合作用剂量反应关系评价研究──广义三阶多项式回归模型北京医科大学生物数学与生物统计教研室张侠军事医学科学院放射医学研究所四室周晓北京医科大学劳动卫生教研室刘世杰，江泉观生产环境中往往是多种化学物质共存，研究化学物质的联合作用一直是药理学和毒理学工作...

DNA修复与人类疾病研究进展

DNA修复是一系列与恢复正常DNA序列结构和维持遗传信息相对稳定有关的细胞反应 ,细胞为了存活而容忍某种类型的DNA损伤或不正常的碱基序列也包括在该定义范围内。DNA修复基因在进化上高度保守[1] 且与许多疾病有关 ,但DNA修复缺陷相关的疾病非常复杂 ,对于DNA修复和这些疾病关系的研究 ,还没见系统的报道 。

LKB1基因功能及与肿瘤关系研究进展

LKB1基因是一抑癌基因,其编码产物为一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。LKB1的功能主要是使细胞周期阻滞在G_1期、促进细胞凋亡和调节胚胎血管形成等。LKB1基因的胚系突变是Peutz-Jeghers综合征的主要致病因素。在散发肿瘤中也发现有LKB1基因突变,其中以肺腺癌和子宫颈粘液微偏癌突变率较高,分别达30％和55％左右。

钙在血卟啉单甲醚-光动力学疗法处理后HeLa细胞中的变化及作用

目的了解钙离子在血卟啉单甲醚-光动力学疗法(HMME-PDT)处理后HeLa细胞中的变化和作用。方法Fura-2/AM孵育荧光分光光度计检测细胞质游离钙浓度犤Ca2+犦i的变化,MTT法分析PDT及钙离子对HeLa细胞存活率的影响,Western印迹法分析HMME-PDT后HeLa细胞的肌浆/内质网钙泵(SERCA2)蛋白的降解情况。结果HMME-PDT处理后即刻HeLa细胞内犤Ca2+犦i就开始增高,且与PDT剂量成正相关用,BAPTA/AM拮抗犤Ca2+犦i的升高可增加HeLa细胞的存活率。同时HMME-PDT可引起SERCA2蛋白的降解。结论HMME-PDT处理后HeLa细胞内犤Ca2+犦i可迅速增高,犤Ca2+犦i升高可能与SERCA2蛋白的降解相关,并可促进HeLa细胞的死亡。

地塞米松对海水淹溺性肺水肿兔缺氧及肺水肿的改善

目的:观察地塞米松对海水淹溺性肺水肿兔的动脉血氧分压(PaO2)及肺水肿的影响。方法:24只兔随机分成对照组和地塞米松治疗组,每组各12只。制备海水淹溺性肺水肿机械通气模型后,地塞米松治疗组在海水灌注20 min后经颈动脉注射地塞米松(1 mg/kg),对照组则注入2 ml生理盐水。观察海水灌注前即刻、海水灌注后20 min和180 min的PaO2、PaCO2、胸肺静态顺应性(CT)、动态顺应性(CD),并检测血管外肺水含量指数(EVLWI)及伊文思兰漏出指数(ELI)。结果:两组海水灌注前即刻和海水灌注后20 min的PaO2、PaCO2、CT及CD均无统计学差异,但海水灌注后180 min地塞米松治疗组的PaO2、CT及CD均显著高于对照组,而PaCO2显著低于对照组(P<0.05)。地塞米松治疗组的EVLWI和ELI均低于对照组(P<0.05)。结论:地塞米松可改善海水淹溺性肺水肿兔的缺氧及减轻肺水肿。

辐射诱发细胞恶性转化时Smad7基因表达对细胞生长抑制效应的调节(英文)

背景:细胞逃避转化生长因子-β(TGF-β)诱导的对细胞生长、增殖的抑制是许多肿瘤发生的一个重要机制。Smad7是TGF-β信号转导通路的抑制型Smads,它可阻断TGF-β信号在胞浆内的传导,其紊乱是TGF-β信号转导通路紊乱的机制之一。目的:研究在辐射诱发细胞发生恶性转化过程中,Smad7过表达是否可通过抑制TGF-β信号转导通路来拮抗TGF-β对细胞的生长抑制效应。设计:自身对照前瞻性研究。地点和对象:研究在军事医学科学院放射医学研究所完成。实验对象为永生化人支气管上皮细胞BEP2D及辐射诱发恶性转化的人支气管上皮细胞BERP35T2。干预:以外源性TGF-β1作为刺激因子,用Northernblot检测永生化BEP2D及辐射诱发恶性转化的BERP35T2细胞中Smad7基因的表达水平;用Smad7真核表达载体PCISmad7.neo稳定转染永生化及恶性化的人支气管上皮细胞系,筛选G418抗性克隆,用Westernblot加以验证。用MTT法检测Smad7基因转染前后TGF-β对永生化及恶性化细胞的生长抑制效应。主要观察指标:Smad7转染前后BEP2D及BERP35T2细胞Smad7表达水平及TGF-β1作用于Smad7转染前后细胞的增殖能力变化。结果:辐射诱发恶性转化的BERP35T2细胞中Smad7表达水平高于永生化BEP2D细胞,相同浓度的TGF-β1对BERP35T2细胞的生长抑制效应较BEP2D细胞弱;

在支气管上皮细胞恶性转化过程中Smad7表达变化对TGF-βR、SMADs及STRAP蛋白的影响

目的研究永生化人支气管上皮细胞BEP2D恶性转化过程中,作为Sm ad蛋白家族的抑制分子,Sm ad7对TGF-βR、R Sm ads及STRAP蛋白的表达影响。方法培养BEP2D、BERP35T2细胞及稳定表达Sm ad7蛋白的细胞BS7(来源于BEP2D)、RS7(来源于BERP35T2),提取细胞蛋白,用W estern b lot方法比较稳定转染Sm ad7基因前后的BEP2D和BERP35T2细胞中TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡ、Sm ad2/3、Sm ad4及STRAP蛋白表达差异。结果稳定转染Sm ad7基因后细胞中TGF-βRⅡ表达降低,Sm ad2和STRAP蛋白表达增高,Sm ad3、Sm ad4蛋白表达无变化。结论Sm ad7高表达导致TGF-β信号通路发生改变,其中TGF-βRⅡ表达降低,STRAP表达增高可能是诱使细胞发生恶性转化的机制之一。

PTEN与恶性肿瘤的关系

近年发现的抑癌基因PTEN的结构中存在着2个主要的结构功能域,即N-端功能区和-C端结构域。其具有双特异性脂酶性质,在多种进展期肿瘤组织中存在着不同程度的突变与丢失。PTEN通过复杂的信号转导网络(如PI3K/AKT信号通路、FAK和MAPK信号通路、P53/PTEN/Mdm2信号网络等)来抑制细胞周期、干预细胞凋亡、抑制肿瘤的侵袭和转移、抑制肿瘤血管形成等。PTEN的突变与丢失可导致其抑癌功能减弱甚至丧失,与肿瘤的发生发展密切相关。

LKB1蛋白在肺腺癌组织中的表达及临床意义

目的:了解LKB1蛋白在肺腺癌组织中表达的临床意义。方法:应用免疫组化法检测62例肺腺癌组织中LKB1蛋白表达情况。结果:LKB1蛋白在肺腺癌细胞及正常肺支气管上皮均有表达,弥漫性分布于细胞质,细胞核亦有表达。肺腺癌组织中LKB1蛋白表达的阴性率为38.7%(24/62)。LKB1的表达与肺腺癌TNM分期中的淋巴结转移(N)及临床分期有显著的相关性,χ2=10.620,P=0.014;χ2=18.635,P=0.000。LKB1蛋白阴性组预后较差,中位生存期为15个月,而LKB1阳性组的中位生存时间为29个月,两者比较差异有统计学意义,χ2=15.350,P=0.000。结论:LKB1蛋白表达下降与肺腺癌发生淋巴结转移相关,是肺腺癌预后不良的风险因素之一。

Smad7基因的克隆、表达及对c-myc基因的调控

Smad7是TGF-β家族信号转导通路的抑制分子,可反馈调节TGF-β/Smads信号转导通路,从功能推测,Smad7表达紊乱,可影响细胞对TGF-β的应答,从而促进细胞的恶性化进展,为了深入探讨Smad7基因功能,通过设计引物,用Touchdown巢式-PCR法从人胎脑文库中扩增Smad7基因编码区全长,回收产物,克隆并构建真核表达载体,同融合有报告基因的c-myc顺式增强子元件共转染BEP2D细胞,结果表明:TGF-β可抑制c-myc报告基因的活性,Smad7基因可正调控c-myc报告基因的表达,并拮抗TGF-β对该基因的抑制作用.由此得出结论:Smad7基因通过拮抗TGF-β来调控c-myc基因.

Smad7基因过表达的促增殖作用机制探讨

目的 研究Smad7过表达使人支气管上皮细胞系增殖能力增强的机制。方法 用Smad7真核表达载体PCISmad7.neo同携带有报告基因碱性磷酸酶的c myc顺式增强子元件pMyc SEAP共转染 ,检测Smad7基因对增殖信号通路的影响。用RT PCR方法 ,检测稳定转染Smad7基因前后永生化及恶性化的人支气管上皮细胞系BEP2D和BERP35T2细胞内c myc、p15、p2 1表达水平的变化 ,调查Smad7基因对TGF β介导的抗增殖基因反应的调控。 结果 报告基因检测结果表明 ,Smad7基因可使参与增殖信号通路的c myc顺式增强子元件活性增强。RT PCR结果表明 ,在稳定转染Smad7基因的细胞中 ,c myc表达上调 ,p15表达降低 ,对TGF β刺激的应答丧失 ,p2 1表达降低。 结论Smad7基因可通过调控TGF β介导的抗增殖基因应答来影响细胞的生长。