成人急性呼吸道感染常见病毒病原学研究

目的研究2013年1～3月在军事医学科学院附属医院呼吸科收治的成人急性呼吸道感染患者的病毒病原学流行特征。方法在该院门诊或住院的患者中，符合发热伴呼吸道症候群的患者103例，采集患者的鼻咽拭子，应用荧光定量PCR方法检测流感病毒、副流感病毒、鼻病毒、呼吸道合胞病毒、冠状病毒、人博卡病毒、人偏肺病毒、腺病毒等8种常见呼吸道病毒及其亚型。结果与结论在监测的103例鼻咽拭子中，49例病毒阳性，检出率为47．6％。其中，甲型流感病毒检出率最高，为33％，其次为鼻病毒和乙型流感病毒。在甲型流感病毒中，H1N1型的检出率远远高于H3N2型。60岁以上患者肺炎发生率明显高于60岁以下患者。随着年龄的增长，肺炎发生率明显升高，应引起临床重视。

含舒巴坦制剂联合碳青霉烯类药物治疗泛耐药鲍曼不动杆菌感染疗效观察

目的观察含舒巴坦制剂联合碳青霉烯类药物治疗泛耐药鲍曼不动杆菌感染的临床疗效。方法纳入资料完整的泛耐药鲍曼不动杆菌感染患者42例,应用舒普深+碳青霉烯类药物联合治疗者22例,单用舒普深治疗者20例,观察患者临床疗效、细菌清除率和不良反应。结果联合用药组临床有效率和细菌清除率分别为72.7%和78.1%,明显高于单药组40%和46.4%,差异均具有统计学意义(P<0.05),未见明显不良反应。结论应用含舒巴坦制剂联合碳青霉烯类药物治疗泛耐药鲍曼不动杆菌引起的感染可提高临床疗效和细菌清除率,可适用于该类感染的治疗。

成人呼吸道感染患者病毒病原学分布特征

目的研究门诊发热伴呼吸道症候群患者呼吸道病毒病原学分布,提高呼吸道感染病原的快速诊断能力。方法收集2015年9月至2016年8月军事医学科学院附属医院门诊277例呼吸道感染患者的咽拭子标本,采用荧光定量PCR方法对流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、冠状病毒、偏肺病毒、腺病毒、博卡病毒和鼻病毒8种呼吸道病毒及其亚型进行核酸检测。结果在277份标本中,138份病毒阳性,检出率为49.82%;在阳性标本中,流感病毒检出率最高,以甲型流感病毒为主,其次为乙型流感病毒,鼻病毒和副流感病毒Ⅲ型位居第3;4份标本检出两种呼吸道病毒混合感染,以乙型流感病毒混合感染为主;不同性别的呼吸道病毒检出率无差异(P>0.05);与夏秋季比较,冬春季病毒检出率有统计学意义(P<0.05)。流感病毒是冬春季门诊发热伴呼吸道症候群的主要病原体,其他依次为副流感病毒、鼻病毒、冠状病毒、腺病毒和偏肺病毒。荧光定量PCR可快速明确此类患者的病毒病原学诊断。

检测5种呼吸道病毒的PCR-array方法评价

目的建立同时检测甲型流感病毒（INF-A）、乙型流感病毒（INF-B）、呼吸道合胞病毒A型（RSV-A）、呼吸道合胞病毒B型（RSV-B）、鼻病毒（HRV）5种常见呼吸道病毒的PCR-array方法,为快速检测呼吸道感染提供准确、有效的技术手段。方法构建阳性标准品评价PCR-array方法的扩增效率和最低检出限（LOD）,应用189份鼻咽拭子样本,与金标准比较,评价PCR-array方法的灵敏度和特异度。结果 PCR-array方法有较高的特异度,LOD可以达到10 copy/μl。PCR-array方法灵敏度为94.2%,特异度为96.0%,Kappa值为0.705-1.000。结论 PCR-array方法能够在2 h内同时检测INF-A、INF-B、RSV-A、RSV-B、HRV,且具有较高的灵敏度和特异度。

猪链球菌溶血素(SLY)引起血小板聚集活性分析

目的研究重组表达的2型猪链球菌溶血素(SLY)与血小板的相互作用,为临床猪链球菌感染的救治提供理论基础。方法镍柱亲和层析法纯化重组SLY蛋白,光密度法检测其溶血活性,再通过血小板聚集仪和扫描电子显微镜观察SLY蛋白与血小板的相互作用,并研究抗血小板药物阿司匹林对SLY引起的血小板聚集的影响,通过比较野生株05ZYH33和sly基因突变株Δsly对小鼠体内血小板体积和数量的影响,推测SLY蛋白对体内血小板的影响。结果与结论重组SLY蛋白溶血活性为2000 HU,1μg/ml SLY蛋白可引起血小板高度聚集,5 mmol/L阿司匹林可显著抑制聚集,SLY蛋白可引起小鼠体内单个血小板体积增大和血小板数量减少。

嗜麦芽寡养单胞菌双组分调控基因功能的初步研究

目的研究嗜麦芽寡养单胞菌(SMA)双组分调控基因在亚胺培南诱导前后表达量的变化,为探讨双组分基因的功能提供依据。方法用64μg/ml的亚胺培南诱导SMA,实时定量PCR方法检测双组分调控基因表达量的变化。结果与结论双组分基因Smlt 1784-1785、Smlt 2199-2200、Smlt 4208-4209、Smlt 4295-4296在诱导30 min后表达上调,Smlt 0277-0278、Smlt 2233-2234在2 h后表达上调,而Smlt 3765-3766在30 min和2 h后表达均上调。生物信息学分析发现这些基因中包含EAL、REC、GGDEF和OmpR等保守的结构域,可能参与该菌耐药形成过程中的信号转导。SMA表达上调的双组分调控基因可能参与细菌耐药。

嗜麦芽窄食单胞菌全菌灭活苗在小鼠体内的免疫保护作用

目的评价嗜麦芽窄食单胞菌全菌灭活苗在小鼠体内的免疫保护性。方法利用甲醛制备嗜麦芽窄食单胞菌全菌灭活苗并免疫小鼠,检测其抗体效价达到要求后,通过体外健康人血调理杀伤实验以及体内攻毒实验评价全菌灭活苗的保护作用。结果在第二次加强免疫后,免疫组血清中特异性Ig G滴度显著增加,其抗血清在体外具有明显的调理杀伤能力;在体内的攻毒实验中也具有显著的保护作用。结论灭活的嗜麦芽窄食单胞菌全菌灭活苗可刺激诱导动物产生体液免疫应答,使小鼠产生有效的免疫保护作用,为进一步探讨嗜麦芽窄食单胞菌全菌灭活疫苗奠定了良好的实验基础。

链霉素对结核分枝杆菌sRNA表达影响的研究

目的研究链霉素对结核分枝杆菌非编码sRNA表达量的影响,探讨sRNA是否参与细菌与药物的相互作用。方法基于结核分枝杆菌标准菌株H37Rv的高通量测序结果,选出表达量估计值较高的4个sRNA作为研究对象,根据链霉素的最小抑菌浓度(MIC)对标准菌株H37Rv进行不同浓度和不同时间的链霉素诱导,提取各组菌液的总RNA,通过实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测4种sRNA在各组中的表达量,比较不同抑菌浓度和不同时间的链霉素作用下sRNA的表达量差异。结果当链霉素浓度在1/2MIC时对结核分枝杆菌的生长产生明显抑制作用;在4种sRNA中,MTS2823表达量最高,F6表达量相对较低;MTS1338在4MIC浓度的链霉素处理18 h即出现表达上调;在4MIC浓度链霉素作用6 d后,MTS1338和mcr11表达量分别出现(4.80±1.14)倍和(2.91±0.86)倍上调,而MTS2823表达下调。在各组药物处理组中F6表达量的变化均不明显。结论链霉素对结核分枝杆菌sRNA的表达可产生促进或抑制作用,提示sRNA可对某些基因进行转录后调控,促进或拮抗链霉素对结核分枝杆菌的作用。