脂肪干细胞来源外泌体通过miR-21a-5p/PTEN途径促进牙周膜干细胞成骨分化

目的 研究脂肪干细胞(ADSCs)来源外泌体通过miR-21a-5p/第10号染色体缺失性磷酸酶-张力蛋白同源物基因(PTEN)途径促进牙周膜干细胞(PDLSCs)成骨分化的效应。方法 培养ADSCs、分离外泌体并用磷酸盐缓冲液溶解备用。培养PDLSCs、进行成骨诱导分化并分组,外泌体组加入15μg/ml外泌体、对照组加入等体积磷酸盐缓冲液,NC组加入等体积磷酸盐缓冲液并转染NC序列,NC+外泌体组加入15μg/ml外泌体并转染NC序列,miR-21-5p敲低+外泌体组加入15μg/ml外泌体并转染miR-21-5p抑制物;诱导后21 d时进行茜素红染色并检测A540水平,诱导后7 d时检测miR-21a-5p、PTEN、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)、Ⅰ型胶原(CoL-Ⅰ)的表达水平。培养PDLSCs并分为转染NC序列的NC组、转染miR-21a-5p模拟物的miR-21a-5p组,采用双荧光素酶报告基因验证miR-21a-5p靶向PTEN。结果 外泌体组PDLSCs的A540水平及miR-21a-5p、ALP、OCN、CoL-Ⅰ的表达水平均高于对照组,PTEN的表达水平低于对照组(P<0.05);miR-21a-5p组PDLSCs中PTEN的表达水平及野生型双荧光素酶报告基因的荧光值均低于NC组(P<0.05);miR-21-5p敲低+外泌体组PDLSCs的A540水平及miR-21a-5p、ALP、OCN、CoL-Ⅰ的表达水平均低于NC+外泌体组,PTEN的表达水平高于NC+外泌体组(P<0.05)。结论 ADSCs来源外泌体通过调控miR-21a-5p/PTEN途径促进PDLSCs成骨分化。