仿生磷酸钙缓释涂层改性三维支架的制备及性能研究

目的运用仿生磷酸钙涂层技术将淫羊藿苷(icariin,ICA)负载到去蛋白牛骨无机材料(deproteinized bovine bone,DBB)表面,检测其成骨诱导性能。方法取2周龄C57雄鼠的腹股沟脂肪,采用酶消化培养法分离培养得到脂肪干细胞(adipose derived mesenchymal stem cells,ASCs)。显微镜下观察细胞形态,并对ASCs进行成骨和成脂诱导,通过茜素红染色和油红O染色检测其多向分化潜能。在DBB表面制备磷酸钙(calcium phosphate,Ca P)涂层,将ASCs接种在材料上,通过扫描电镜观察材料表面形貌和细胞的附着情况。制备负载ICA的Ca P涂层,将材料分为三组:DBB组(未经处理的DBB),Ca P组(Ca P涂层改性的DBB),ICA-CaP组(Ca P涂层内含有ICA的DBB)。通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性实验检测三组支架材料的成骨诱导性能。结果显微镜下观察培养细胞呈纤维细胞样梭形,呈簇或散在分布。成骨分化茜素红染色及成脂分化油红O染色结果都呈强阳性。扫描电镜观察结果显示DBB表面为不平坦的沟壑状形貌,Ca P涂层表面为相互交错的网格状结晶体,Ca P涂层促进ASCs在DBB表面的附着。ICA-CaP组的ALP活性显著高于DBB组和Ca P组(P <0. 05)。结论 ICA-CaP涂层改性的DBB具有成骨诱导性能。