三种模拟创伤性脑损伤体外细胞模型的损伤特征比较

目的系统比较拉伸模型、氧-糖剥夺(OGD)模型以及过氧化氢(H2O2)处理的氧化应激模型的细胞损伤特征,为TBI研究中细胞模型的选择提供参考。方法复苏冻存的HT-22细胞后,将HT-22细胞接种于六孔板中,分为实验组和对照组,实验组分别制备细胞拉伸损伤模型、OGD模型、氧化应激损伤模型,对照组正常培养,不做特殊处理。通过显微镜观察细胞形态的变化,CCK-8实验分析测试细胞活力;提取细胞蛋白,采用Western blot检测凋亡(Bcl-2、Bax)、坏死性凋亡(RIPK3、RIPK1)、铁死亡(ACSL4、GPX4、SLC7A11)等不同细胞死亡途径的标志物变化。结果与对照组相比,实验组的3种损伤模型均导致HT-22细胞出现不同程度的形态异常、增殖受限或脱落现象。CCK-8检测结果显示,不同模型处理后细胞存活率均较对照组明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测结果显示,3.0 PSI强度的拉伸处理后细胞中的GPX4、SLC7A11、Bax、RIPK3、RIPK1蛋白表达较对照组明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05);OGD处理12 h后,SLC7A11和Bax表达较对照组明显上调,差异均有统计学意义(P<0.05);800μmol/L的H_(2)O_(2)处理后,Bcl-2和RIPK1蛋白较对照组表达明显上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论拉伸损伤模型更能反映TBI后复杂的损伤特点,OGD与H2O2处理模型更适合用于研究特定的损伤通路。