基于实验室能力验证需求国标法检测鸡肉和鸡蛋中氟喹诺酮类药物残留量的优化

基于实验室能力验证检测工作的特点,对农业部1025号公告-14-2008和农业部781号公告-6-2006两个国标法的液相色谱检测方法进行优化,结合加热沉淀法,快速测定鸡肉、鸡蛋样品中氟喹诺酮类药物的残留量,为依照国标法检测步骤完成能力验证实验的结果提供质量验证参比。鸡肉或鸡蛋考核样品按国标方法提取获得备用液(其中鸡蛋备用液定容至6 mL),精密移取待固相萃取(SPE)净化的备用液1 mL,加入乙腈0.2 mL,涡旋,55℃水浴加热20 min快速沉淀蛋白质,离心后取上清液进高效液相色谱仪快速测定样品中的药物残留量。快速加热沉淀法应用于鸡肉、鸡蛋样品时,添加回收率分别为81.08%~103.09%和77.60%~102.94%。剩余备用液依照国标法继续净化,并对净化操作稍作优化:鸡蛋备用液只取3 mL进行SPE净化;鸡肉备用液先冷冻,解冻后高速离心,移取上清液进行SPE净化。优化方案操作简单,能快速测得样品中氟喹诺酮类药物的浓度,提高了回收率和重复性,既可为能力验证提供结果质量验证的参考,亦可用于日常的批量快速检测。

液相色谱-串联质谱法测定猪肝中喹乙醇残留标示物3-甲基喹噁啉-2-羧酸

目的建立液相色谱-串联质谱法测定猪肝中喹乙醇残留标示物3-甲基喹噁啉-2-羧酸(3-methylquinoxaline-2-carboxylic acid,MQCA)含量的分析方法。方法猪肝匀浆中的喹乙醇标示物3-甲基喹噁啉-2-羧酸经乙腈提取,MAX固相萃取柱净化,2%的甲酸乙酸乙酯溶液洗脱收集,浓缩定容。分析样品采用C18色谱柱分离,以乙腈、0.1%甲酸溶液为流动相,多反应离子监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式测定,内标法定量。结果喹乙醇残留标示物3-甲基喹噁啉-2-羧酸在0.5~100μg/L浓度范围内线性良好,相关系数r大于0.99;该方法的检出限和定量限均为0.5μg/kg;喹乙醇残留标示物3-甲基喹噁啉-2-羧酸在0.5、5.0、20μg/kg添加水平的回收率为97.7%~101.4%,相对标准偏差小于3.54%。结论该方法简单快速、准确、灵敏,适用于猪肝中喹乙醇残留标示物3-甲基喹噁啉-2-羧酸的快速检测。

五种喹噁啉-1,4-脱二氧化合物的合成

喹噁啉-1,4-二氧类化合物(QdNOs)具有抗菌和促动物生长的作用,其在动物体内代谢可产生喹噁啉-1,4-脱二氧化合物。为深入了解喹噁啉-1,4-脱二氧化合物在动物体内的残留、代谢及毒理,对五种喹噁啉-1,4-二氧化合物的脱二氧代谢产物进行了半合成研究,以提供受试物标准品。文章探讨了反应溶剂、不同碱体系,反应物物质的量等对产物收率的影响,结果显示,最优条件下,五种脱二氧代谢产物的收率在72.5%~86.1%之间。五种产物的结构利用核磁共振氢谱和质谱进行了分析和表征。

中药成分辛弗林对胶体金免疫层析法检测β-受体激动剂的影响

旨在探究陈皮、青皮、木瓜、厚朴、红景天等5种中药材提取液以及饲喂了陈皮和青皮的猪尿液胶体金免疫层析法检测结果呈阳性的原因。建立测定猪尿及中药提取物中辛弗林的LC-MS/MS检测方法,测定陈皮、青皮的提取物和饲喂陈皮、青皮后猪尿中的辛弗林浓度。用小鼠肝微粒体孵育CGIA检测呈阳性的陈皮、青皮、木瓜和厚朴4味中药提取物。饲喂陈皮和青皮后的猪尿液检出辛弗林,浓度分别为1.36和1.65μg·mL^(-1);在陈皮和青皮的提取复溶液中检出辛弗林,浓度分别为132.6和312.7μg·mL^(-1)。厚朴和木瓜两种中药提取物经过肝微粒体孵育后,在2~5 h逐渐由CGIA检测阳性转为阴性,陈皮和青皮孵育后,0~6 h的结果均为CGIA检测阳性;阴性中药组CGIA检测均呈阴性,而添加辛弗林的阳性对照组0~6 h CGIA检测均呈阳性。猪较大剂量使用陈皮和青皮会引起猪尿β-受体激动剂CGIA检测出现假阳性,该假阳性现象跟中药成分辛弗林有关,体外试验中辛弗林不易被小鼠肝微粒体代谢。

细菌内毒素分析检测研究进展

细菌内毒素是造成临床脓毒血症及多器官衰竭的关键毒力因子。微量的内毒素就可以导致生物体发热,产生炎症、组织损伤,甚至死亡。因此,高灵敏度和准确度的内毒素分析检测技术,在食品、环境、医药、畜禽养殖及内毒素研究领域具有重要意义。本文介绍了细菌内毒素的结构和主要性质,总结了内毒素的生物学检测方法,综述了基于色谱-质谱联用等技术在内毒素检测中的研究进展,最后对内毒素分析发展趋势和应用进行了展望。

牛奶中多西环素残留消除及最大残留限量

为制定牛奶中多西环素最大残留限量标准,首先开展盐酸多西环素子宫注入剂在牛奶中的残留消除试验,盐酸多西环素子宫注入剂经子宫给药1次,给药前及停药后6,12,24,48,72,96,120,144和168 h共10个时间点采集牛奶,采用液相色谱-串联质谱测定多西环素残留量。然后在查阅国际食品法典委员会、欧洲药品管理局和我国制定动物性食品中多西环素最大残留限量研究报道基础上,制定牛奶中多西环素最大残留限量标准。结果表明,停药后168 h,牛奶中多西环素的残留量均低于10μg/kg。多西环素每日允许摄入量为0~3μg/kg,建议参照欧盟动物性食品中多西环素最大残留限量制定方法,将每日允许摄入量按比例分配到全部组织+奶,推荐牛奶中多西环素的最大残留限量为10μg/kg,盐酸多西环素子宫注入剂在牛奶中弃奶期为9 d。