Magnetospirillum gryphiswaldense MSR-1磁小体缺失突变株NM4Tn5侧翼序列的克隆及功能分析

利用mini-Tn5lacZ2对格瑞菲斯瓦尔德磁螺菌(Magnetospirillumgryphiswaldense)MSR-1进行转座插入突变,获得磁小体缺失突变株NM4.通过锚定PCR(anchoredPCR)从NM4中克隆出Tn5插入位点的侧翼序列,获得长5045bp的DNA片段,其中含有6个ORFs,Tn5插入在ORF4中.功能互补实验证明该片段与磁小体的合成有关.对ORF4编码的蛋白进行同源比较和功能分析,发现ORF4编码的蛋白与CaulobactercrescentusCB15的长为200AA的趋化蛋白CheYIII的同源性为25%(30/116),且ORF4编码的蛋白也具有与CheYIII相同的接收磷酸基团的REC结构域,可进行信号传递,因此推测ORF4编码的蛋白可能参与磁小体合成过程中的某种(低氧分压或铁离子浓度)信号的转导.