PCR方法鉴别肉骨粉中的动物成份种类

为防范疯牛病传入我国,有必要鉴别肉骨粉中动物成份的种类。针对牛、羊、猪和鸡四种动物的特异性核苷酸序列,分别选用和设计了四对特异性引物,用试剂盒提取四种动物的肉骨粉或者处理过的肉组织中的DNA,然后进行PCR扩增,所扩增的目的片断大小分别为271bp、199bp、196bp、148bp,运用PCR技术建立了鉴定这四种动物源性成分的方法。结果分别扩增出四种动物的特异性条带,证明该PCR方法具有很高的特异性和敏感性,而且成本低廉,简便易行,因此可以作为鉴别肉骨粉种类的常规方法。

肉鸡心脏热应激损伤和热休克蛋白mRNA转录水平的相关性

通过分光光度计、组织病理学和荧光定量反转录PCR检测技术,研究肉鸡心脏热应激损伤和热休克蛋白mRNA变化的相关性。试验结果显示,热应激过程中肌酸激酶和谷丙转氨酶的活性呈现波动性变化,肌酸激酶的变化更明显;心脏的组织病理学变化主要表现为心肌纤维变性和坏死;热应激过程中HSC70mRNA也呈现波动性变化,而HSP70mRNA水平呈现上升趋势。结果提示,HSC70mRNA与肌酸激酶活性变化呈现一定负相关,HSC70有可能作为心脏热应激损伤的标志物。

Real-time PCR和常规PCR方法快速鉴定肉骨粉中的牛源性成份

疯牛病是一种严重危害动物和人类健康的疾病 ,其病原朊病毒可以通过食物链进行传播 ,因此建立准确的检测牛源性成份的方法非常重要。我们采用常规PCR和Real_timePCR中的TaqMan技术建立了快速鉴定牛源性成份的方法 ,使用Chelex_10 0提取肉骨粉中的DNA ,过程简单可靠仅需要 2 0min左右。对不同含量的牛肉骨粉进行检测 ,常规PCR能够检测到的最低含量是 0 0 0 1% ,而Real_timePCR对相同的样品进行检测所得到的灵敏度更高 ,最高可达到 0 0 0 0 1% ,两种PCR方法的鉴定过程都非常简单快速 ,各需要 2h左右。

H4亚型禽流感毒株的生物学特性

根据致病性不同,禽流感病毒(AIV)可以分为高致病性和低致病性.不同亚型AIV的致病性、细胞内定殖能力以及对T淋巴细胞的影响等特性可能有所不同.……

利用流式细胞术检测H4亚型禽流感病毒感染细胞

以不同稀释度的H4亚型禽流感病毒(AIV)感染MDCK细胞,分别在添加与不添加TPCK-胰酶的培养基中培养36 h后收集细胞。经固定后,加入抗H4亚型AIV的单抗2C11,继续加入荧光标记的抗鼠Ig抗体,用流式细胞仪(FCM)分析不同条件下病毒感染的细胞,并用血凝(HA)试验检测细胞培养上清中病毒的HA效价。FCM结果表明:不论加TPCK-胰酶与否,均能引起病毒的感染,且随着感染剂量的增加,含有病毒细胞的比率增加。相比而言,加胰酶后,低剂量感染便可引起病毒在MDCK细胞内大量增殖,并能检测到细胞上清中的病毒。FCM与HA试验相比,FCM试验更敏感,更能反应病毒在感染早期的增殖情况。