城市群城市农业共生关系分析与协同发展对策——以京津冀城市群为例

随着京津冀协同发展上升为国家战略,如何实现其区域内城市农业多中心互动,成为其综合竞争力提升和协同效应发挥的重要推动因子.借鉴共生理论,从能级、对外关联和外向功能3个视角进行分析,确定了京津冀城市群城市农业多中心共生关系.结果表明:河北省11地市在农业能级、农业对外关联、农业外向功能强度等方面表现出优势,而京、津两市则表现为劣势;京津冀城市群城市农业总能级排名方面,保定、石家庄、邯郸、沧州、邢台分列第1~5位,天津列第8,而北京列末位;城市农业对外关联方面,邯郸、邢台、石家庄分居第1~3位,天津、北京分列第6、第7位;外向功能强度方面,河北省11地市全部表现为外向功能,其中承德、张家口、秦皇岛分列第1~3位,而天津、北京则均小于1,表现为内向功能;综合考虑各市行政地位、整体实力和区位,建议把北京、天津和石家庄列为一级农业中心城市,把邯郸、邢台、衡水、保定列为二级农业中心城市.最后,从制定京津冀城市农群业发展规划、构建共生体制、实现包容性共生发展、形成创新型集群等方面提出协同发展对策.

罗汉果提取物诱导肺癌细胞A549凋亡的研究

目的探讨罗汉果醇诱导肺癌细胞凋亡的作用及可能的分子机制。方法通过分离、纯化得到罗汉果醇单体,以肺癌细胞A549为对象,采用MTT法检测罗汉果醇对肺癌细胞的抑制作用;利用荧光染色、流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期;以蛋白印迹法检测罗汉果醇对p21、Bcl-2蛋白表达的影响。结果罗汉果醇能抑制肺癌细胞的增殖,具有促进细胞凋亡、阻滞细胞周期的作用;蛋白印迹检测表明,罗汉果醇可以促进p21表达升高,Bcl-2表达下降。结论罗汉果醇通过调节p21、Bcl-2的表达来诱导细胞凋亡和周期阻滞,从而促进肺癌细胞A549的凋亡。

草莓根腐病拮抗细菌的分离筛选与鉴定

为筛选和鉴定草莓根际土壤中对草莓根腐病菌(Colletotrichum gloeosporioides)有拮抗作用的细菌,采用平板对峙培养法,对从北京市昌平区小汤山草莓种植基地土样中分离到的306株菌株进行初筛,复筛后获得了1株拮抗效果好且具有较好稳定性的菌株GF-98,其抑菌带宽度为9.3 mm。此外,菌株GF-98的抑菌谱较广,对草莓根腐尖孢镰刀病菌、草莓灰霉病菌、草莓根腐石楠拟盘多毛孢病菌等9种植物病原真菌均有较好的抑菌效果。在显微镜下观察发现,菌株GF-98的代谢产物对草莓根腐病菌有致畸作用,包括菌丝缩短、粗细不均、分枝增多扭曲、细胞原生质浓缩等现象。16S rDNA基因分析以及生理生化鉴定等方法表明,菌株GF-98为多粘类芽孢杆菌(Peanibacillus ploymyxa)。

瑞香狼毒中3种杀螨活性成分的致死规律

采用机率值分析方法处理生物测定数据已有半个世纪的历史,但机率分析存在时间效应与浓度效应相互排斥的缺陷,因此将逐步被TDM模型分析法取代。本研究通过TDM模型和3种S型生长模拟模型,对瑞香狼毒中角鲨烯、β-谷甾醇和东莨菪内酯对朱砂叶螨的触杀活性进行研究。结果表明:不同物质的杀螨率对浓度变化的敏感程度为:东莨菪内酯>β-谷甾醇>角鲨烯。不同活性物质达到快速死亡期的时间分别为:β-谷甾醇第12h,角鲨烯第6h,东莨菪内酯第2h;由TDM模型估计的理论死亡高峰期与试验观察相吻合;由TDM模型估计的不同活性物质LC50值分别为:角鲨烯13.101mg/mL,β-谷甾醇9.288mg/mL,东莨菪内酯1.318mg/mL,分别为机率值法计算所得LC50值的1.321、1.110、1.040倍。本研究中,东莨菪内酯(1.5mg/mL)致死中时LT50值最小,为2.237h,角鲨烯(16mg/mL)LT50值最大,为7.395h。各活性物质在最高试验设计浓度下,采用Gompertz和Logistic模型均能较好地拟合朱砂叶螨死亡时间的分布。其中,Logistic模型的拟合效果最好。对Logistic模型参数分析可知,试验中3种物质对朱砂叶螨均具有较好地防治效果;3种杀螨物质中,东莨菪内酯起效时间最快,作用周期较短;β-谷甾醇起效时间最慢,作用周期最长。

板栗雄花序萃取物抗氧化及抑菌效果

【目的】研究板栗雄花序不同萃取物的抗氧化及抑菌效果,为其进一步开发与利用提供基础。【方法】用不同极性溶剂对板栗雄花序乙醇浸膏进行萃取分离,得到石油醚萃取物、二氯甲烷萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物4个部分;并采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH·）自由基清除和硫代巴比妥酸法测定醇提物及不同萃取物的抗氧化能力,以滤纸片琼脂扩散法和共培养测定抗菌活性。利用高效液相色谱法（HPLC）和核磁共振波谱法（NMR）鉴定出板栗雄花序中的鞣花酸（EA）,并对其进行初步定量与结构分析。【结果】1）通过系统提取法得到板栗雄花序醇提物提取率为16.6%,其他4种萃取物提取率在2.6%-26.2%,其中乙酸乙酯萃取物提取率最高。2）板栗雄花序醇提物及不同萃取物对DPPH·自由基、卵黄脂质过氧化物都有一定的清除能力,其中乙酸乙酯萃取浓度为0.01 mg·m L^-1时,对DPPH·清除率达到94.4%,对卵黄脂质过氧化物的清除率为95.69%,与同浓度的抗坏血酸（Vc）和2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚（BHT）清除率相当。3）板栗雄花序醇提物对12种细菌都有一定程度的抑制效果,在不同萃取物中乙酸乙酯萃取物抑菌效果最好,对大肠杆菌的最低抑菌浓度为0.98 mg·m L^-1,最低杀菌浓度为1.96 mg·m L^-1。板栗雄花序样品中有游离鞣花酸,含量为2.267 mg·g^-1。【结论】板栗雄花序中含有较多抗氧化和抑菌的活性物质,其醇提物及不同极性萃取物的抗氧化能力存在较大差异,乙酸乙酯萃取物抗氧化活性较高,对清除DPPH·自由基和脂质过氧化物都有较好的效果。各个萃取物对G＋菌和G-菌都有一定作用,其中乙酸乙酯萃取相的抑菌活性最好。

树莓黄酮提取工艺的响应面法和正交法比较

以树莓干果为研究材料,总黄酮提取率为评价指标。先分析了超声时间、浸提温度和乙醇浓度各单因素对树莓总黄酮提取率的影响,再通过响应面法和正交法比较最佳提取工艺和产率,结果显示,响应面法最佳工艺为超声时间42.30 min,浸提温度80℃,乙醇浓度51.83%(约52%),理论预测值3.83%,实际验证值3.88%,并且超声时间和乙醇浓度存在交互作用;SPSS正交法的最佳工艺为超声时间40 min,浸提温度70℃,乙醇浓度50%,实际验证值是3.78%。虽然2种方法得出相似的最佳工艺,但响应面法能提供更多更精确的信息,最终产率也略高,值得推广。

分散液相微萃取测定苹果中灭线磷马拉硫磷和毒死蜱残留

采用液液分散微萃取与气相色谱-火焰光度检测器联用技术,提出了可用于苹果中有机磷农药残留检测的一种快速、灵敏的新方法,并通过试验对提取条件进行了优化。结果表明,该方法成功地应用到苹果样本的检测。在优化的条件下最低检出限从1.32-3.58μg.mL^-1,相对标准偏差为11.06%-15.39%,分析标准曲线采用五点法（浓度从0.5-20μg.mL^-1）来绘制,线性的变化从0.977 3-0.997 6。为了评价样本的基质效应,用有机磷农药从3个不同浓度水平对样本进行添加,回收率从64.0%-89.0%,并且没有发现基质效应。液液分散微萃取不仅操作简便而且有机溶剂使用量极少,是一种顺应时代要求的环境友好型萃取方法。

牵牛子杀螨活性物质鉴定及其作用机制初探

朱砂叶螨（Tetranychus cinnabarinus）具有个体小、繁殖快、代数多、适应性强、为害重等特点,是世界公认的最难防治的有害生物群落（Hazan et al.,1974;何林等,2004）,可危害百余种农作物和果树,并对其产量和品质造成严重的影响（Ho et al.,1997）。长期以来,大量重复使用非专一性化学杀螨剂,使许多螨类已产生抗药性（唐除痴等,1998）,并且对杀螨剂出现了交互抗性（王旭等,1997）。

树莓干果总黄酮纯化前后活性比较

用超声辅助醇法提取的树莓干果总黄酮,再经XDA-6大孔树脂纯化,比较纯化前后药粉中黄酮含量、抗氧化活性、抑菌活性以及菌丝生长抑制率的变化。结果显示:在50%乙醇溶解条件下,纯化后黄酮含量比纯化前提高了91.10%;在纯化前后药液浓度均为0.25 mg/m L时,DPPH抗氧化活性提高最多,达到13.35%;大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度从纯化前的药液浓度8 mg/m L(相当于黄酮浓度1.6 mg/m L)下降为药液浓度2 mg/m L(相当于黄酮浓度0.8 mg/m L);纯化前后黄酮对小麦赤霉菌和棉花枯萎菌的菌丝抑制率表现为低浓度下提高多,高浓度下提高少的趋势,药液浓度为8 mg/m L时,对棉花枯萎菌抑菌率提高幅度最小为0.6%,而药液浓度为1 mg/m L时,对小麦赤霉菌抑菌率提高幅度最大为44.02%,说明大孔树脂纯化后黄酮的各项指标有所改善。

枣园节肢动物天敌群落时空结构和优势度分析

近年来，随着人们对生态环境和生物多样性的广泛关注以及害虫防治技术的深入研究，有害节肢动物的天敌防治再次纳入人们的视野。国内外诸多学者在总结引入天敌控制有害节肢动物经验后，认为本地寄生性和捕食性天敌对当地有害节肢动物的综合治理起着很大的作用（张明伟等，2003）。在枣园害虫的综合治理中，重视枣园生态系统中节肢动物天敌群落的保护是一项积极的措施，值得深入探讨和研究。

农杆菌介导虎杖芪合酶基因遗传转化壶瓶枣的研究

【目的】白藜芦醇作为植物次生代谢产物不但能提高果树抗真菌能力,还能改善果品质量。遗传转化芪合酶基因能够增强植物的抗真菌能力,虎杖芪合酶基因具有较高的催化合成白藜芦醇的效率,研究虎杖芪合酶基因遗传转化壶瓶枣,以期获得具有抗真菌能力且改善枣果实品质的遗传转化新材料。【方法】通过组织培养再生体系与目的基因转化技术,优化获得茎诱导丛生芽,构建植物表达载体,优化遗传转化体系,采用农杆菌介导法将虎杖白藜芦醇生物合成关键酶基因Pc PKS5遗传转化壶瓶枣。【结果】优化壶瓶枣茎段诱导得到高分化率的丛生芽遗传转化体系,再生增植率为11.0,为壶瓶枣成功实现遗传转化奠定了基础。将壶瓶枣0.8-1.0 cm含茎尖和茎段的外植体材料置于农杆菌浓度OD600=0.6时侵染菌液中浸泡15.0 min,然后置于培养基上避光共培养3天;随后转入含Cb 300 mg·L^-1,AS 60 mg·L^-1的丛生芽诱导分化培养基中培养5-6周。将分化丛生芽转接至含4.0 mg·L^-1Basta的培养基中,获遗传转化植株173株;经Basta筛选,GUS显色、gDNA PCR、RT-PCR等检测证实,成功获得3个阳性转基因株系,荧光实时定量检测表明株系2表达效率较高。经植物化学成分分析,转化植株中目的基因得以表达,生成了目标产物白藜芦醇,其含量为0.45μg·g^-1（鲜质量）。【结论】本研究成功实现虎杖芪合酶基因遗传转化壶瓶枣,获得壶瓶枣遗传转化新材料。且Pc PKS5在枣树中异源表达,转基因材料中能够代谢合成白藜芦醇,有望提高转Pc PKS5基因壶瓶枣抗枣树病原真菌病能力。白藜芦醇是否在壶瓶枣遗传转化材料果实中积累,及转基因植株果实品质的影响仍需深入研究。

桃果实硬核后期中果皮与内果皮中蛋白质组表达的双向电泳分析

为了探究桃果实发育过程后期中、内果皮不同的代谢进程,以＂大久保＂桃（Prunus persica L.cv.Okubao）盛花后56天的果实为试材,TCA/丙酮沉淀法提取蛋白质,采用固相pH梯度（immobilized pHgradients,IPG）双向电泳系统分离蛋白质,凝胶银染显色后用图像分析软件比较分析差异表达的蛋白点,初步了解中果皮和内果皮蛋白质组表达的差异点。采用pH5~8IPG胶条进行等电聚焦得到的双向电泳图谱在中果皮与内果皮中检测到蛋白质点的数量分别为（1273±101）和（1292±115）个,所有匹配的蛋白点中有65个在中果皮与内果皮的图谱中均存在,其中30个为内果皮相对于中果皮2倍（P〈0.05）上调的点,35个为内果皮相对于中果皮2倍（P〈0.05）下调的点。有10个蛋白点仅在中果皮表达,18个蛋白点只在内果皮表达而中果皮未显示。表明桃果实发育硬核期中果皮与内果皮的蛋白质组存在一定差异,这些差异可能会为进一步解释中果皮与内果皮在代谢的方向上不同而提供理论依据。

亚油酸甲酯对朱砂叶螨的生物活性研究

研究亚油酸甲酯对朱砂叶螨的生物活性。采用玻片浸渍法和叶片残毒法测定生物活性。亚油酸甲酯具有较强的触杀、产卵抑制和驱避作用,浓度为5mg/mL时,对朱砂叶螨的雌成螨和卵24h后的校正死亡率分别达到82.82%和78.54%,LC50分别为1.4434mg/mL和2.0283mg/mL;对雌成螨24h后的产卵抑制率和驱避率分别达到78.46%和95.61%。此试验为亚油酸甲酯作为杀螨活性物质的作用机理的探索提供了一定的理论基础。

辣蓼不同种间植物次生代谢产物种类及差异

辣蓼是一种广泛分布于我国的传统中草药,通常指水辣蓼(Polygonum hydropiper)和旱辣蓼(Polygonumflaccidum)的干燥全草,具有健脾化湿、除湿化滞、止痢止痛、解毒化瘀等功效。近几年两种辣蓼植物提取物在兽药、植物源农药方面进行了较为深入研究,结果表明,水辣蓼和旱辣蓼的作用机制、功效及应用方向存在明显差别。本文对上述两种植物的次生代谢产物种类及其差异进行了综述和对比分析,为辣蓼植物活性成分功能研究与深化利用提供依据。

瑞香狼毒超临界CO_2萃取物的杀螨毒力及机理初探

为了测定瑞香狼毒超临界CO2萃取物对朱砂叶螨的触杀毒力,并了解其作用机理,笔者采用玻片浸渍法测定瑞香狼毒超临界CO2萃取物(SCE)对朱砂叶螨的触杀毒力,观察其对朱砂叶螨的致毒症状;结果表明:SCE对朱砂叶螨24h的触杀LC50值为2.411mg/mL;中毒试螨表现出类似神经毒剂的致毒症状,如兴奋、痉挛等。随后测定了SCE对朱砂叶螨神经系统靶标酶(乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶)活性的影响。结果表明,SCE能够显著抑制试螨乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性;据此推测,SCE对朱砂叶螨可能具有神经毒性。

苯醚甲环唑降解菌BMJHZ-01的分离鉴定及降解影响因素

从江苏某农药厂污水区污泥中分离筛选出一株对苯醚甲环唑降解能力较强的细菌BM JHZ-01,对其进行形态学观察、生理生化鉴定、16S r DNA序列同源性比对及系统发育树分析,初步确定其为硝基还原假单胞菌Pseudomonas nitroreducens。通过研究该菌株降解苯醚甲环唑的影响因素,得出其最适宜降解条件为:培养箱转速200 r/min,培养温度30℃,初始p H值为7.0。在此培养条件下,采用高效液相色谱法检测,发现菌株BMJHZ-01在5 d内对180 mg/L苯醚甲环唑的降解率可达90%以上。BMJHZ-01可以以最高质量浓度为180 mg/L的苯醚甲环唑为惟一碳源进行生长繁殖并将其降解,对不良环境的高度适应性使其在环境治理中具有明显优势。

瑞香狼毒提取物对3种病原菌的离体抑菌活性

采用甲醇、氯仿、石油醚、二氯甲烷4种不同溶剂提取瑞香狼毒中的活性物质。利用生长速率法测定提取物对小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)、黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporium)、苹果斑点落叶病菌(Alternaria mail)3种病原菌的离体抑菌活性。结果表明:96h后,瑞香狼毒甲醇提取物对3种病原菌具有较强的抑菌作用,抑菌率均高于68%,对3种病菌的抑制中浓度(EC50)分别为1.31、1.64、0.54mg/mL。

瑞香狼毒粗提物对朱砂叶螨的生物活性

测定了瑞香狼毒的石油醚、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、乙醇、甲醇6种粗提物对朱砂叶螨(Tetranychus cinnabarinus)的触杀活性。6种粗提物对成螨触杀的LC50分别为3.2066、4.2477mg、5.5588、3.9356、5.9913、6.1026mg/mL;石油醚粗提物的触杀效果最好,但对卵的作用效果最差,校正死亡率仅为32.30%;二氯甲烷、乙酸乙酯、乙醇、甲醇提取物的校正死亡率分别为72.90%、86.89%、69.72%、61.53%;氯仿提取物较高,达到了89.19%(P<0.05)。

含有α-胰凝乳蛋白酶作用位点的Cry3A突变体的构建、表达、纯化以及杀虫活性分析

【目的】构建含有α-胰凝乳蛋白酶作用位点的Cry3A的突变体Cry3Am,以期提高Cry3A的活化效率,增强杀虫活性。【方法】利用重叠PCR技术,构建Cry3A杀虫蛋白的突变体Cry3Am,使之在原核细胞中表达纯化突变体蛋白;将Cry3Am与饲料混合后饲喂黄粉虫,用以评价Cry3Am的杀虫活性。【结果】成功地在Cry3A杀虫蛋白结构域I的α3和α4之间加上1个α-胰凝乳蛋白酶的作用位点,并提取Cry3Am到杀虫蛋白。体外酶切试验结果表明,Cry3Am很容易地被降解为55 kD的杀虫蛋白。生测分析结果表明,Cry3Am对黄粉虫的毒力是Cry3A的2倍以上。【结论】向Cry3A中插入α-胰凝乳蛋白酶作用位点可以使突变体Cry3Am很容易地被α-胰凝乳蛋白酶降解成55 kD的片段,并能提高Cry3A的杀虫活性。

枣园节肢动物群落时间格局研究

将枣园节肢动物群落视为一个整体,根据群落内物种的组成和数量,采用各种群落参数和不同群落分析法对太谷地区枣园节肢动物群落的时间格局进行了研究,结果表明:枣园节肢动物群落在时间过程变化中,影响群落时间格局的主导因子及时间格局分化较为明显,根据研究结果将枣园节肢动物群落在时间过程中的变化划分为发展期、过度期、鼎盛期、衰减期4个阶段,并结合气候、物候变化,讨论了各阶段群落的发生特点和主要害虫的治理对策。