六经头痛片治疗脑缺血作用机制的网络药理学和分子对接研究

目的利用网络药理学方法预测六经头痛片治疗脑缺血的核心成分和靶点,并通过分子对接初步验证。方法在TCMSP、CRD、HERB数据库查询六经头痛片9味组成药物的化学成分,在PubChem和Swiss ADME平台获取化学成分SMILES结构并进行标准化,利用化合物SMILES结构在SEA数据库进行靶点预测;在OMIM、Drugbank、CTD数据库获得脑缺血疾病靶点,利用Venny 2.0获得药物和疾病的共同靶点,把共同靶点放入STRING 11.5数据库进行PPI分析,利用Cytoscape 3.7.2绘制PPI网络以及六经头痛片治疗脑缺血“药物-化学成分-靶点-通路”网络图;利用AutoDock 1.5.6软件进行分子对接。结果共得到六经头痛片63个有效化学成分和200个作用靶点,药物和疾病共同靶点27个,筛选得到核心化学成分β-石竹烯(Beta-Caryophyllene,BCP)、6-去氢姜二酮(6-Dehydrogingerdione,6-DG)、薄荷酮(Menthone)、落叶松脂醇(Lariciresinol),以及关键靶点白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、转录因子AP-1(Transcription factor AP-1,JUN)、半胱天冬酶3(Caspases3,CASP3)。结论六经头痛片中的β-石竹烯、6-去氢姜辣二酮、薄荷酮、落叶松脂醇可能通过作用于IL-6、TNF-α、JUN、CASP3从而发挥治疗脑缺血疾病的疗效。

基于HIF-1α/VEGF信号通路探讨大黄䗪虫丸抑制KM小鼠肿瘤血管的机制研究

目的 研究大黄䗪虫丸对昆明(KM)小鼠移植瘤的抑瘤率、体积、质量、缺氧诱导因子(Hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)、血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor, VEGF)、肿瘤血管密度(Microvascular density, MVD)的影响,探讨大黄䗪虫丸是否是通过HIF-1α/VEGF信号通路达到抑制肿瘤血管生成进而控制肿瘤生长的作用。方法 将H22人肝癌细胞注射到KM小鼠进行小鼠皮下移植瘤造模,造模成功后按照随机数字表法分为空白组、模型组、大黄䗪虫丸低剂量组、大黄䗪虫丸中剂量组、大黄䗪虫丸高剂量组和索拉非尼组,每组各15只,实验干预1次/d,连续干预2周。大黄䗪虫丸低剂量组、中剂量组、高剂量组和索拉非尼组均给予相应药物灌胃,模型组给予生理盐水灌胃。实验干预结束后取瘤体,对各组瘤体长、短径进行测量,计算瘤体的抑瘤率、体积及体质量并记录;采用苏木精-伊红染色法检测各组肿瘤组织形态学的病理变化;实时荧光定量聚合酶链反应法检测HIF-1α和VEGF mRNA转录水平;蛋白印记法检测HIF-1α和VEGF蛋白表达水平;采用免疫组织化法检测肿瘤组织检测反映MVD的表达。结果 体积抑瘤率比较,大黄䗪虫丸低、中、高剂量组的抑瘤率分别为17.11%、21.73%和37.09%,索拉非尼组的抑瘤率为46.75%;HE染色结果显示:与模型组比较,大黄䗪虫丸高剂量组可使肿瘤组织出现大面积的坏死区域;PCR和WB结果显示:与模型组比较,大黄䗪虫丸各治疗组均可不同程度的显著降低肿瘤组织HIF-1α、VEGF mRNA蛋白水平表达(P<0.05,P<0.01);CD31-MVD结果显示:与模型组比较,大黄䗪虫丸高剂量组MVD明显减少(P<0.05)。结论 大黄䗪虫丸可能是通过HIF-1α/VEGF信号通路达到抑制肿瘤血管生成进而控制肿瘤的生长。

地黄饮子调节海马神经突触可塑性作用机制研究

目的:观察地黄饮子改善阿尔茨海默病(AD)模型小鼠学习记忆能力及对海马突触可塑性的影响,探讨AD治疗机制。方法:选用50只6月龄SAMP8小鼠构建AD动物模型,采用RANDBETWEEN随机函数将其分为模型组、盐酸美金刚组及地黄饮子低、中、高剂量组各10只,选用同龄SAMR1小鼠10只作为正常组。地黄饮子各剂量组及盐酸美金刚组按照给药剂量给予相应药物灌胃,正常组和模型组给予等体积纯水灌胃,连续给药12周。新物体识别、Morris水迷宫、巴恩斯迷宫法分别检测小鼠的学习记忆能力,在体海马场电位实验记录小鼠海马长时程增强(LTP)效应,免疫组化实验检测突触后致密蛋白-95(PSD-95)、突触素(SYN)蛋白水平的变化,蛋白质印迹法检测海马神经元NMDAR1、NMDAR2B、Ca2+在细胞内所结合钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)蛋白表达情况。结果:与模型组比较,地黄饮子各剂量组小鼠新物体识别系数增加,差异有统计学意义(P<0.001);在目标象限停留时间明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),且平台穿越次数增加,逃避潜伏期缩短;进入逃生箱所需时间减少,但差异无统计学意义(P>0.05),在逃生箱所在象限停留时间明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。在体海马场电位记录实验表明,高频刺激前各组小鼠fEPSPs斜率无明显差异,高频刺激后30 min、60 min地黄饮子各剂量组较模型组斜率增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,地黄饮子各剂量组CA1区海马神经元PSD-95蛋白、SYN蛋白表达水平上升;地黄饮子各剂量组CA3区海马神经元PSD-95蛋白、SYN蛋白表达水平上升。与模型组比较,地黄饮子各剂量组海马神经元CaMKⅡ、NMDAR1、NMDAR2B蛋白表达水平升高。结论:地黄饮子能改善AD模型小鼠的学习记忆能力,机制可能为通过调节海马神经元Ca2+维持神经突触可塑性,。

小动物神经行为学实验平台规划设计原则及施工建设要求

小动物神经行为学实验平台已经是神经科学和脑科学领域最基本的支撑条件,本文拟从小动物神经行为学实验平台设计建设一般原则、小动物神经行为学实验平台布局及功能区划、小动物神经行为学实验平台相应配套设施设备、小动物神经行为学实验平台施工建设要求方面系统论述小动物神经行为学实验平台规划设计原则及施工建设要求,以期为小动物神经行为学专业化实验室建设提供可资借鉴的规划设计参考及施工建设规范。

基于“肾脑相济”理论与线粒体稳态相关性探讨补肾方药治疗阿尔茨海默病的机制

阿尔茨海默病(AD)是一种与年龄密切相关的神经退行性疾病,机体进程性的衰老是导致AD发生的因素之一,脑内能量代谢异常、神经元损伤或凋亡则是其主要病理特征。现代研究表明,上述三者的发生与线粒体稳态失衡存在着紧密的联系。中医学认为AD责之于“肾脑失济”,补肾填精是根本治疗之法。基于“肾脑相济”理论及现代研究,探究“肾脑相济”理论与线粒体稳态的相关性,发现补肾方药可以通过纠正线粒体稳态失衡来延缓机体衰老,改善AD患者脑内能量代谢异常、神经元损伤或凋亡。因此在AD中,肾精与线粒体稳态具有相关性,补肾方药治疗AD的科学内涵是改善线粒体稳态失衡。

潞党参口服液对慢性脑缺血小鼠气体信号分子和神经炎症因子的影响

目的研究潞党参口服液对慢性脑缺血(Chronic Cerebral Ischemia,CCI)小鼠气体信号分子和神经炎症因子的影响。方法将SPF级C57BL/6J雄性小鼠随机分为5组,分别为假手术组、模型组和潞党参口服液低、中、高剂量(4.25、8.5、17 g·kg^(-1))组,每组12只。假手术组只分离相关血管,模型组和给药组复制双侧颈总动脉狭窄(Bilateral CCA Stenosis,BCAS)模型。假手术组和模型组灌胃生理盐水,给药组灌胃潞党参口服液,连续灌胃30 d。HE染色法观察海马CA1区病理变化;免疫荧光染色法检测脑组织基质金属蛋白酶2(MMP2)和低氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白的表达;Western Blot法检测脑组织血红素氧合酶1(HO-1)、诱导性一氧化氮合酶(iNOS)和3-巯基丙酮酸转硫酶(3-MST)表达水平;相关检测试剂盒测定脑组织硫化氢(H2S)、一氧化碳(CO)、一氧化氮(NO)的含量和胱硫醚β合成酶(CBS)的表达水平。结果HE染色结果显示,与假手术组比较,模型组海马CA1区神经元细胞数量明显减少,排列散乱,部分神经细胞核固缩甚至坏死,而不同浓度的潞党参口服液可改善上述病理变化。免疫荧光染色结果显示,与假手术组比较,模型组HIF-1α和MMP2蛋白表达增加(P<0.001);与模型组比,潞党参口服液低剂量组(P<0.01,P<0.05)和中、高剂量组(均P<0.001)能够降低HIF-1α、MMP2蛋白增加。Western Blot结果显示,与假手术组比较,模型组HO-1和3-MST蛋白表达明显降低(均P<0.001),iNOS蛋白表达明显升高(P<0.001);与模型组比,潞党参口服液低、中、高剂量组明显降低iNOS蛋白表达(P<0.01,P<0.001),潞党参口服液中、高剂量组明显升高HO-1和3-MST蛋白表达(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。试剂盒检测结果显示,与假手术组比较,模型组NO含量明显升高(P<0.001),H2S、CO含量及CBS蛋白表达明显降低(P<0.001);与模型组比,潞党参口服液低、中、高剂量组可升高H2S含量(P<0.05,P<0.001),潞党参口服液中、高剂量组升高CO含量和CBS蛋白表达(P<0.05,P<0.01,P<0.001),潞党参口服液高剂量组明显降低NO含量(P<0.01)。结论潞党参口服液可能通过调节气体信号分子,抑制神经炎症因子实现对慢性脑缺血小鼠的保护作用。

针刺腧穴“降压方”对自发性高血压大鼠ACE-AngⅡ-AT1R轴及Profilin-1的影响

目的研究针刺腧穴“降压方”对自发性高血压大鼠(SHR)的降压效应及对ACE-AngⅡ-AT1R轴、Profilin-1的影响,探讨针刺降压的作用机制。方法按随机数字表法将30只SHR均分为模型组、针刺组,另以15只Wistar Kyoto Rats(WKR)作为正常对照组。针刺组取双侧人迎穴、曲池穴、足三里穴进行针刺,模型组随意在大鼠躯干部位进行针刺,对照组不针刺,其他操作相同。每周连续干预6 d休息1 d,连续4周,共24次。采用大鼠无创血压测量系统测量血压,并记录一般行为变化,采用ELISA法检测大鼠血清中血管紧张素转化酶(ACE)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量,采用免疫组化法(IHC)检测主动脉中血管紧张素Ⅱ受体1(AT1R)、前纤维蛋白-1(Profilin-1)蛋白表达的水平。结果针刺组第2周开始收缩压、舒张压持续降低,模型组收缩压、舒张压逐渐升高,对照组血压未见明显变化;针刺组较模型组一般行为得到改善。实验4周后针刺组血清中ACE、AngⅡ较模型组显著降低,AT1R、Profilin-1表达水平降低。结论针刺腧穴“降压方”对SHR降压效应明确,其机制可能是通过降低SHR血清中ACE、AngⅡ含量,影响SHR主动脉组织中的AT1R和Profilin-1表达,进而抑制局部肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)的活性起到降低血压的作用。

基于医案数据挖掘探讨地黄饮子临床应用规律

目的分析临床运用地黄饮子的证候规律与用药特点。方法以PubMed、Embase、Cochrane Library、CNKI、VIP、万方数据库、古今医案云平台为检索数据库,获取并挖掘地黄饮子临床医案数据。结果共筛选到233例医案,以中风病为多见,肾精亏虚证为主要证候,症状以头晕和言语不利多见,舌脉象以舌红、苔薄白、脉细为主。主要药物为山茱萸、石菖蒲、远志、麦冬、肉苁蓉、巴戟天、熟地黄、五味子、茯苓、石斛;加味中药以平性、温性、寒性多见,甘味、辛味、苦味为主,归肝、脾、肾经最多,功效以清热凉血、强筋骨、生津为主。药物关联规则分析得到核心药对石菖蒲-远志。主要药物聚类分析得到3个聚类药组,复杂网络分析得到9种核心药物。结论通过分析地黄饮子的临床应用规律,明确了临床运用地黄饮子辨治疾病的典型症状、关键证候、核心药物及其加减等,可为临床医师合理应用地黄饮子提供方证对应和加减用药参考依据。

基于潜在剖面分析的脑卒中患者报告临床结局异质性研究

目的 根据患者报告临床结局探索脑卒中患者的异质性亚型。方法 选取山西省9家不同等级的医院或社区卫生机构脑卒中患者为研究对象,采用一般资料调查表和脑卒中临床结局评价量表(Stroke-PROM)对其进行调查。以Stroke-PROM各维度最终得分为模型外显变量,利用潜在剖面分析构建分类模型,采用方差分析和相关分析对可能影响分型的各因素进行评估。结果 低生理低社会型(9%)、高生理中社会型(40%)、中生理中社会型(26%)和中生理高社会型(25%)是潜在剖面分析结果中平行可比的4个亚型。潜在类别在4个领域上的得分均具有统计性差异(P<0.05),与患者的年龄、费用支付形式和运动频率之间存在相关性(P<0.05)。结论 脑卒中患者存在明显的分型特征,应重点关注处于高龄、自费状态和缺乏运动的脑卒中患者,提供有针对性的护理措施改善其生命质量。

潞党参口服液对慢性脑缺血小鼠脑血流量及认知功能的影响

目的观察潞党参口服液对慢性脑缺血(chronic cerebral ischemia,CCI)小鼠脑血流量(cerebral blood flow,CBF)及认知功能的影响。方法将SPF级C57 BL/6 J雄性小鼠按随机数表法分为5组,分别为假手术组、模型组和潞党参口服液4.25 g·kg^(-1)组、潞党参口服液8.5 g·kg^(-1)组、潞党参口服液17 g·kg^(-1)组,每组12只,假手术组只分离相关血管,模型组和给药组复制双侧颈总动脉狭窄(bilateral CCA stenosis,BCAS)模型,假手术组和模型组灌胃生理盐水,给药组灌胃潞党参口服液,连续灌胃30 d。采用激光散斑血流成像系统观察小鼠术前及术后多个时间点(2 h、2 d、4 d、7 d、14 d、30 d)前额叶局部CBF,应用旷场实验、新物体识别实验和Morris水迷宫实验等行为学方法评价认知功能。结果术后小鼠前额叶CBF骤降,以术后2 h最明显,至术后30 d仍低于正常水平,同时小鼠出现认知功能障碍。旷场实验观察到各组之间自主行为差异无统计学意义,相较于假手术组,模型组新物体识别指数降低,差异有统计学意义(P<0.05),逃避潜伏期显著增长,差异有统计学意义(P<0.05),穿过平台次数减少,差异有统计学意义(P<0.05),第Ⅲ象限的时间及路程百分比显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。相较于模型组,潞党参口服液高剂量组新物体识别指数显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),潞党参口服液中、高剂量组穿越平台的次数增加,差异有统计学意义(P<0.05),逃避潜伏期降低,差异有统计学意义(P<0.05);潞党参口服液低、中、高剂量组在第Ⅲ象限停留时间及路程百分比明显提高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论双侧颈总动脉狭窄法可造成小鼠出现慢性CBF下降进而导致小鼠出现持续性认知功能障碍;潞党参口服液能够增加CCI小鼠局部CBF,改善认知功能,且具有量效关系。

基于肺魄理论解析“肺主治节”及其临床应用

志意精神魂魄理论是中医学认识和研究人体生理、病理现象的一大瑰宝,“肺魄”对人体精神心理活动及神经内分泌系统发挥重要调控作用。通过梳理肺魄理论、“肺主治节”相关研究及语义评析,得出以下认识:肺魄具有抑制性、被动性,主司较低级的精神神经活动,如肢体运动、耳听目视、冷热痛痒等;“肺主治节”即是肺通过肺魄、肺气宣降、营卫循行发挥对经络系统即包含神经、体液、内分泌等在内的本能性、自律性信号传导系统的综合调控功能;肺魄以“治节”为功能路径;临床可对肺魄靶向用药以调理其“治节”功能。“肺主治节”不可简单地理解为治理和调节气血津液,其中深意应当结合“肺魄”理论加以辨析,实现理论贯通并更全面地应用于临床。

中国新型冠状病毒肺炎密接者感染危险因素的Meta分析

目的系统评价我国新型冠状病毒肺炎密切接触者感染的主要危险因素。方法计算机检索PubMed、the Cochrane Library、中国知网、中国生物医学文献数据库、万方数据知识服务平台、维普网等数据库,搜集2019-12/2022-03期间发表的关于我国新型冠状病毒肺炎密切接触者感染影响因素的相关文献,采用Stata 15.0软件对纳入文献进行Meta分析。结果最终检索文献186篇,纳入文献16篇。Meta分析得到危险因素6个,各影响因素的合并OR值和95%CI依次为:家庭成员26.17(8.44,81.11)、经常接触9.02(5.61,14.49)、同住7.28(3.91,13.55)、同餐5.00(2.83,8.83)、已有其他疾病3.68(1.92,7.04)和高龄2.36(1.67,3.33)。结论家庭成员、经常接触、同住、同餐、已有其他疾病、高龄是影响密接者感染的危险因素,尚不能证明性别之间存在感染差异。