七年制医学分子生物学实验课改革与实践

分子生物学是一门实践性很强的学科,广泛应用于生命科学的各个领域。在七年制分子生物学实验教学实践中,通过对教学内容、教学手段、考核方法的改革,充分调动了学生学习的积极性,培养了学生科研思维能力和创新能力。

以临床问题为导向的分子生物学综合性实验探索

随着医学的发展,越来越多将分子生物学的理论与技术,应用于疾病的预防、诊断和治疗。从分子水平探讨各种疾病的发生发展的机制,已成为当代医学研究的共同目标。因此作为一名医学院校的学生,掌握与应用分子生物学实验技术,结合临床实践,在分子水平上认知、诊断各种疾病的发生发展机制是十分必要的。改革与优化实验课教学体系,更新实验课教学内容,有利于提高实验教学质量,培养高素质医学人才,在实验教学中培养学生创新意识、训练学生创新能力、培养学生创新品质。

日本血吸虫成虫体外传代培养细胞的生物学鉴定

本研究结果显示:血吸虫成虫细胞在体外培养中呈半悬浮聚集生长状态,4代内的培养细胞及冻存复苏细胞存活率达90%,并在各代培养中均可见细胞分裂相;传5代细胞的染色体核型为8对16条。超微结构既观察到形态正常细胞,也可见形态异常细胞。表明1640-40特定培养基对血吸虫成虫中的部分细胞体外传代培养获得成功。

充分发挥教学秘书在基础医学实验中心的教学管理

教学秘书是大学基层教学管理人员,在教学管理工程中发挥着重要的作用。大学实验中心教学秘书是实验中心管理的基本力量,其自身素质和业务水平的高低,直接影响着实验中心管理水平。文章详细论述了教学秘书在教学管理中的角色定位、工作任务和作用,分析了教学秘书在大学教学管理中应具备的基本素质。

多站式考试在生物化学实验课考试中的应用

21世纪科学知识迅猛发展,高素质人才培养已成为当今医学教育的主旋律,培养学生的创新思维和创新能力是高等医学教育发展的方向[1]。高等医学教育是一门实践性较强的学科,而实践实验教学又是培养学生创新能力的重要环节[2]。

新生大鼠不同脑区内神经前体细胞生物学特性比较

为了观察海马、中脑和顶叶皮质内神经前体细胞的体外生长特性及其分化后所产生的神经元的形态特征,本研究使用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)体外扩增细胞技术和克隆形成实验分析了神经前体细胞的自我更新特性;采用神经前体细胞和骨髓基质细胞共培养方式,通过免疫细胞化学染色方法,研究了神经前体细胞的分化特点。结果发现:(1)新生大鼠海马、中脑和顶叶皮质内的神经前体细胞,在体外的分裂增殖能力无明显区别;(2)新生大鼠海马、中脑和顶叶皮质内的神经前体细胞在相同的条件下,其后代细胞中,神经元和胶质细胞所占的比例基本相同,但不同脑区内神经前体细胞所产生的神经元的形态却表现出明显不同。这些结果提示新生大鼠不同脑区内神经前体细胞的分化潜能已有了一定限制。

加强生物化学实验室仪器设备、药品、消耗品的管理

加强高等学校实验室的建设与管理,保障学校的教育结果和科学研究水平,生物化学教研室及相关实验中心在实验所需仪器设备、实验药品、消耗品应用及管理中,加强管理措施及改革,对保障实验教学起到了积极作用。

自主式生物化学实验在八年制教学中的实践

在八年制生物化学实验课教学实践中,突破以往的教学内容和方法,采用以学生为主体的自主式教学方法,充分调动学生自主学习积极性,培养学生的团队协作精神、动手能力、科研思维与创新能力。

独立开设八年制医学生生物化学实验技能课

教育部于2004年5月批准我国部分重点高等学校创办八年制医学教育,经过近年的不断探索,深化改革,八年制的医学教育始终遵循＂八年一贯,整体优化,强化基础,注重临床,培养能力,提高素质的基本原则。＂我们学校为适应医学教育发展趋势,依据国家医学教育标准,紧密结合学校实际,围绕社会需求，在白求恩医学班（本、博连读）的创办中，提出了更高的目标要求，认为八年制医学教育要适应我国社会主义现代化建设和未来国际竞争的需要，培养具有现代意识、国际视野、创新能力和良好职业素质的医学领军人物，达到具有宽厚的人文社会科学与自然科学的基础理论，扎实医学基础理论，系统的临床医学理论和较强的临床实际工作能力技能，有一定的预防保健能力的精英教育。

改革医学七年制生物化学实验教学,培养创新型人才

为提高医学七年制学生的综合素质,培养具有厚基础、宽口径,强能力、高素质的有创新能力的医学人才,从实验教学内容、教学手段、课程设置、安排以及实施等方面入手,对生物化学实验课进行了大胆的改革,并取得了一些成功的经验.

抗重组人白细胞介素12单克隆抗体的制备及其生物学特性

目的:以纯化的重组人白细胞介素12(rhIL-12)蛋白为抗原,制备具有生物活性的rhIL-12单克隆抗体(McAb),并对其特性进行研究鉴定,为肿瘤及免疫相关性疾病的诊断与治疗提供具有实用价值的研究工具。方法:以纯化的rhIL-12p70免疫BALB/C小鼠,采用杂交瘤技术,用间接ELISA法筛选抗体阳性的杂交瘤细胞及多次克隆化,培养制备杂交瘤细胞系,用clutathione sepharose 4B进行纯化。采用间接ELISA及Western blotting等方法对McAb的Ig亚类(型)腹水效价及特异性进行鉴定。结果:建立了3株持续分泌rhIL-12p70McAb的杂交瘤细胞株,3株细胞染色体数目均为100条左右,证实为杂交瘤细胞,所分泌的抗体为2株IgG1亚类及1株IgG2a亚类,轻链属k型,小鼠腹水效价测定分别为1∶5.9×106、1∶2.9×107、1∶3.6×107,亲和力依次为EM5>EM6>EV9。结论:成功地制备了3株能稳定分泌抗rhIL-12p70的杂交瘤细胞株,产生的McAb特异性好,亲和力高。

PBL在医学生物化学实验教学中的设计

生物化学在医学院校是一门专业基础课,主要研究组成人体化学物质的化学结构与功能,及其在体内的化学反应过程,概念较多且较抽象,教学内容枯燥,大部分只能靠识记,导致学生的学习难度大,学习的积极性和主动性不够。生物化学实验课是生物化学课程的重要组成部分,通过多年的实验教学,我们将PBL教学法贯穿临床医学专业生物化学实验教学的全过程,不但巩固了所学的理论知识,以提高学生的学习兴趣,而且还大大地激发了学生的科研思维和创新精神,取得了较好的教学效果。

“雨课堂”在医学留学生生物化学实验教学中的应用

目的探索"雨课堂"在医学留学生生物化学实验教学中的应用。方法随机将2017级117名医学留学生分为对照组和雨课堂组。对照组采用传统教学法进行生物化学实验课教学;雨课堂组采用"雨课堂"教学模式进行授课。问卷调查两组学生对教学模式的满意度,统计分析两组学生实验报告单、实验课及理论课成绩的差异。结果雨课堂组学生实验报告成绩、实验课成绩及理论课成绩组均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);雨课堂组学生对教学模式的认可度高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论"雨课堂"教学模式在医学留学生生物化学实验教学中取得了显著的教学效果。

人脐带间充质干细胞来源的外泌体治疗过敏性哮喘小鼠模型的实验研究

目的:构建过敏性哮喘小鼠模型,研究人脐带干细胞来源的外泌体治疗过敏性哮喘模型小鼠的有效性,并探讨外泌体发挥作用的分子机制。方法:本研究中BALB/c小鼠随机分为人脐带间充质干细胞外泌体(hUCMSCs-exos)治疗组、激素治疗对照组、哮喘小鼠模型对照组和正常小鼠对照组。① 模型构建方法:在第1天和第14天给予15只小鼠腹腔内注射0.2 ml含有卵清蛋白(OVA)和AL(OH)3的混合液构建小鼠模型;② 治疗方法:在第21到27天,OVA组每天将致敏小鼠放入有机玻璃箱内给予5% OVA雾化30 min;正常对照组(CON)采用PBS雾化吸入30 min;激素治疗对照组采用布地奈德雾化吸入治疗30 min,每只鼠平均吸入0.02 mg;hUCMSCs-exos治疗组采用人脐带间充质干细胞培养上清制备的浓度为0.7 mg/ml的外泌体每天雾化治疗30 min。③ 标本采取和检测方法:造模和治疗结束后,采用眼周静脉丛采血法采静脉血;取肺组织和肺灌洗液。利用ELISA方法检测静脉血中的IgE及IL-4的浓度;肺组织切片做HE染色;肺灌洗液进行白细胞总数和嗜酸性粒细胞计数。结果:hUCMSCs-exos干预治疗组的小鼠与模型对照组的小鼠相比炎症明显改善,可明显降低IL-4 (p < 0.05)和IgE (p < 0.01)的水平,BALF中的白细胞总数及嗜酸性粒细胞的指标也明显降低(p < 0.01),小鼠的肺组织炎症也有明显的改善;布地奈德治疗组的干预效果与hUCMSCs-exos治疗组的效果相似,但是从小鼠肺泡灌洗液嗜酸性粒细胞数量的组间比较,可见hUCMSCs-exos治疗组的降低更加明显(p < 0.01)。结论:本研究结果证明,人脐带间充质干细胞来源的外泌体治疗过敏性哮喘模型小鼠是有效的。

益肾达络饮对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠丝裂原和应激激活蛋白酶1表达的影响

目的通过分析丝裂原和应激激活蛋白激酶1(MSK1)在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)中的表达情况探讨中药复方益肾达络饮保护小鼠损伤脑组织的机制。方法利用蛋白印迹技术,检测小鼠脑组织中MSK1、CREB的含量。结果脑组织中MSK1表达显示,正常组和中药组、激素组、抑制剂组均有显著性差异(均P<0.01);模型组和抑制剂组有显著性差异(均P<0.01);中药组和激素组、抑制剂组有显著性差异(P<0.01);中药组和模型组、中药加激素组有差异(均P<0.05)。CREB表达显示:中药组CREB的表达与其余各组相比均显著升高(P<0.01);中药组、中药加激素组和激素组的CREB水平依次降低。结论复方益肾达络饮治疗EAE与MSK1升高有关,p38MAPK信号通路下游因子MSK1表达与其底物CREB表达呈相同态势。

褐藻多糖硫酸酯对老龄小鼠抗氧化酶活性的实验研究

目的研究褐藻多糖硫酸酯(APS)对老龄小鼠超氧化物歧化酶(SOD)谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)丙二醛(MDA)的影响。方法化学发光法测定SOD活性,比色分析法测定GSH-px活性及MDA含量。结果老龄小鼠多糖APS组脑、肾、心SOD、GSH-px活性升高,与对照组比较差异显著(P<0.01,P<0.05),肝组织无差异。多糖APS组脑、肾、心MDA含量降低,与对照组比较差异显著(P<0.05),肝组织无差异。结论APS能够提高老龄小鼠SOD、GSH-px活力,降低MDA含量,具有一定清除自由基作用。

“细胞凋亡的诱导与检测”整合性实验的实践与探索

现行的医学教育改革和整合课程体系的实践，主要通过以器官或系统为主线进行基础知识的整合、基础与临床的结合，并综合应用灵活多样的教学形式，有效地改善了传统医学基础教育课程设置多、不同学科之间交叉重复，以及课程教授形式单一等问题对教学效果的影响，体现了国际医学教育的发展趋势，在培养医学生系统与主动的学习医学知识以及创新能力挖掘方面显示出了较大的优势[1,2]。

高脂饮食诱导APOE和LDLR基因敲除鼠AS斑块形成的分子病理学特征

目的观察在高脂饮食条件下,载脂蛋白E(ApoE)和低度密度脂蛋白受体(LDLR)基因敲除小鼠动脉粥样硬化(AS)斑块形成的病理学特征与基质金属蛋白酶(MMP-2,9)和Mac-3表达水平。方法用C57BL/6J小鼠普通饮食作对照,用ApoE基因敲除和LDLR基因敲除两种小鼠,每种分为普通饮食和高脂饮食两组,8只/组。连续喂养120d后,分离获得各组小鼠主动脉,用Masson染色,油红O染色法观察小鼠动脉粥样斑块病理形态学变化,用免疫组织化学检测AS斑块内炎症以及基质金属蛋白酶(MMP-2,9)表达水平,用免疫双荧光抗体法分析AS斑块巨噬细胞和平滑肌细胞内MMP-9表达的差异。结果与普通饮食的基因敲除鼠比,高脂饮食的ApoE和LDLR基因敲除鼠的动脉粥样硬化斑块显著增大,炎性细胞增多,纤维帽中基质纤维成分减少,纤维帽形状变薄和大量中性脂滴沉积。其中,以ApoE基因敲除鼠的最为严重。AS斑块形成大小与Mac-3表达水平和炎症细胞增加呈正相关。斑块内MMP-9表达在巨噬细胞内占50%～70%,在平滑肌细胞内占30%。结论高脂饮食可加重ApoE和LDLR基因敲除小鼠AS斑块形成和Mac-3表达及炎症细胞增加,MMPs水平亦相应增加,其病变呈现出不稳定性斑块特征。

糖尿病大鼠肾脏组织中氧化应激的实验研究

目的探讨糖尿病大鼠肾脏组织中氧化应激水平在糖尿病肾病中的作用。方法采用STZ诱导糖尿病模型鼠。36只大鼠随机分为正常对照组,糖尿病Ⅰ组(给予鱼精蛋白锌胰岛素2~4U/2d),糖尿病Ⅱ组(每日给予鱼精蛋白锌胰岛素9~12U/kg体重)。喂养至12w,测定各组血糖,血中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿素氮、肌酐、糖化血红蛋白(HbA1c)水平,尿肌酐水平和24h尿蛋白含量。运用比色法测定肾脏皮质中抗氧化酶的活性,包括总超氧化物歧化酶(TSOD)、铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx),以及丙二醛(MDA)的含量。结果糖尿病Ⅱ组与正常对照组间各指标无显著性差异。糖尿病Ⅰ组与Ⅱ组或正常对照组比较,血糖、TC、TG、HbA1c明显升高;抗氧化酶中,TSOD、CuZnSOD、CAT活性明显下降,GSHPx活性则升高,MnSOD活性在各组中无显著性差异;MDA水平明显升高。尿蛋白含量在糖尿病Ⅰ组较其他两组明显升高,而肌酐清除率则明显下降。结论糖尿病可以引起大鼠肾脏氧化应激水平的升高,在糖尿病肾病发病机制中起重要作用。

小柴胡汤对实验性肝纤维化大鼠TIMP-1 mRNA表达的影响

①目的 探讨肝纤维化过程中组织金属蛋白酶抑制因子 1 (TIMP 1 )mRNA的表达及小柴胡汤对其表达的影响。②方法 用体积分数 0 .4 0的四氯化碳花生油制备大鼠肝纤维化模型 ,并用不同剂量的小柴胡汤进行干预。应用苏木精 伊红常规染色法进行组织病理学检查 ;采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)半定量法测定大鼠肝组织中TIMP 1mRNA的表达。③结果 小柴胡汤干预治疗 (6周、1 2周 )可明显减轻四氯化碳所致的大鼠肝纤维化程度。TIMP 1mRNA在肝纤维化模型早期 (6周 )表达上调 ,随纤维化发展进程表达逐渐增强 ,至肝纤维化晚期 (1 2周 )TIMP 1mRNA表达明显升高 (F =1 9.6 2、2 2 .71 ,q =7.0 1、8.71 ,P <0 .0 1 ) ;小柴胡汤不同剂量干预治疗均可抑制肝纤维化早、晚期TIMP 1mRNA表达 (q =4 .2 3～ 7.83,P <0 .0 1 )。④结论 小柴胡汤能显著减轻大鼠肝纤维化程度 ,其可能通过抑制TIMP