乳腺癌中PHF2的表达及其临床意义

目的探讨PHF2在乳腺癌细胞和组织中的表达及其与乳腺癌临床病理特征、预后的关系。方法采用q RT-PCR法检测乳腺癌及正常乳腺上皮细胞株(n=7)及配对的癌旁组织(n=30)中PHF2 m RNA的表达水平;应用Western blot法检测乳腺癌细胞株中PHF2蛋白的表达水平,免疫组化法检测乳腺癌组织(n=50)和癌旁组织(n=15)中PHF2蛋白的表达,分析PHF2表达与乳腺癌临床病理特征的关系及预后的关系。结果与正常人乳腺上皮细胞相比,PHF2 m RNA和蛋白在乳腺癌细胞株中表达下调(P<0.01);与癌旁组织相比,PHF2 m RNA在90%(27/30)的乳腺癌组织中表达下调(P<0.05);免疫组化结果显示:在70%(35/50)的乳腺癌组织中PHF2蛋白表达下调(P<0.05);PHF2表达下调与乳腺癌患者的淋巴结转移、ER阴性及预后密切相关(P<0.05)。结论 PHF2在乳腺癌中表达下调,可以作为乳腺癌预后判断的指标之一,有望成为乳腺癌治疗的新靶点。

ATP1A2通过Src/PI3K/Akt信号通路抑制人乳腺癌细胞的侵袭和迁移

目的探讨ATP1A2在人乳腺癌组织与细胞中的表达水平及其对乳腺癌细胞侵袭和迁移能力的影响。方法分析the Cancer Genome Atlas (TCGA)数据库中ATP1A2在正常乳腺组织和乳腺癌组织中的表达差异,以及在有无远处转移的患者组织中的表达情况;对过表达ATP1A2的MDA-MB-231和SK-BR-3细胞进行细胞划痕实验、Transwell侵袭和迁移实验,以研究其对乳腺癌细胞侵袭和迁移能力的影响;通过Western blot检测Src、PI3K、Akt蛋白的激活情况。结果 ATP1A2在乳腺癌组织中的表达低于正常乳腺组织(P<0.05);远处转移的患者组织中ATP1A2的表达低于无远处转移的患者组织(P<0.05);划痕实验和Transwell侵袭、迁移实验中,ATP1A2过表达组的划痕愈合能力及侵袭和迁移出小室的细胞数均少于对照组(P<0.05);Western blot实验发现:过表达组的Src、PI3K、Akt蛋白的磷酸化水平受到抑制(P<0.05)。结论 ATP1A2在人乳腺癌组织中低表达,其表达可能与乳腺癌患者的远处转移相关;过表达ATP1A2后能显著抑制乳腺癌细胞的侵袭和迁移能力,此种作用可能是通过抑制Src/PI3K/Akt信号通路而产生的。

驱动蛋白KIF18B对ER^+乳腺癌细胞增殖、凋亡的影响及其临床意义

目的探讨驱动蛋白KIF18B在雌激素受体阳性(estrogen receptor positive, ER^+)乳腺癌细胞中的表达,其对增殖、凋亡等细胞生物学功能的影响及对ER^+乳腺癌患者预后的意义。方法 RT-qPCR检测KIF18B在ER^+乳腺癌细胞及乳腺癌组织中的表达,通过siRNA转染干扰KIF18B表达,Western blot检测干扰效果,采用CCK-8实验检测乳腺癌细胞的增殖,流式细胞术检测乳腺癌细胞的凋亡。通过Kaplan-Meier数据库分析不同KIF18B的表达水平对ER^+乳腺癌患者预后的意义。结果驱动蛋白KIF18B在ER^+恶性乳腺癌细胞株和ER^+乳腺癌组织中高表达,siRNA转染后乳腺癌细胞增殖能力减弱,凋亡增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier分析显示,KIF18B高表达组的ER^+乳腺癌患者OS、RFS较低表达组明显降低(P<0.05);在ER^+并接受他莫昔芬治疗的乳腺癌患者中,KIF18B高表达组DMFS和RFS较低表达组明显降低(P<0.05)。结论驱动蛋白KIF18B在ER^+乳腺癌中高表达,并促进ER^+乳腺癌细胞的增殖和抗凋亡能力,高表达KIF18B的ER^+乳腺癌患者预后较差。

基于HER-2相关基因构建风险模型用于膀胱癌生存预后评估

目的:探讨HER-2相关基因(the human epidermal growth factor receptor-2-related genes,HRGs)与膀胱癌生存预后的相关性,并基于HRGs构建一种膀胱癌患者生存预后的预测模型。方法:从癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)中下载膀胱肿瘤组织mRNA测序数据和临床数据,通过与分子签名数据库(the molecular signatures database,MSigDB)中HER-2相关的基因联合分析鉴定膀胱癌中的HRGs。利用单因素和多因素Cox回归分析进一步明确与膀胱癌生存相关的HRGs(P<0.05),并构建HRGs风险模型(HRGs risk score model,HRSM),根据风险评分取中位数将膀胱癌患者分成高风险组和低风险组。利用R语言对高风险和低风险组的患者进行生存分析,并对HRGs与临床特征的相关性进行分析。利用多因素Cox回归分析,验证影响膀胱癌患者预后的独立因素。计算HRSM的受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)下的面积(area under the curve,AUC),并构建诺模图(nomogram)对膀胱癌患者进行生存预测。利用TIMER数据库对HRSM和患者免疫细胞浸润相关性进行分析。结果:共鉴定到13个与患者生存相关的HRGs。通过多因素Cox回归分析,筛选出5个基因(BTC、CDC37、EGF、PTPRR和EREG)构建HRSM,高风险组的膀胱癌患者5年生存率明显低于低风险组患者。通过临床相关性分析发现,PTPRR的高表达与肿瘤分级、分期呈显著负相关,而EREG的高表达与肿瘤分级、分期呈正相关;EGF表达量的增加和患者的高级别有相关性,而CDC37的高表达却呈现出了相反的结果;BTC的表达与临床特征无显著相关性。通过对HRSM与免疫细胞的相关性分析发现,风险评分与树突状细胞、CD8+T细胞、CD4+T细胞、中性粒细胞和巨噬细胞的浸润呈正相关。结论:HRGs对膀胱癌患者的预后有重要作用,可能作为新的预测性生物标志物和治疗的潜在靶点。

CTHRC1通过活化FAK-ERK1/2信号通路促进膀胱癌5637细胞迁移和侵袭

目的:探讨胶原三螺旋重复蛋白1(CTHRC1)在膀胱癌组织和细胞中的表达及其对膀胱癌5637细胞迁移和侵袭的影响及其机制。方法:利用TCGA和Arrayexpress数据库中膀胱癌基因表达数据,分析CTHRC1转录和翻译水平。收集2014年9月至2020年12月重庆医科大学附属第一医院手术切除的144例膀胱癌组织和25例全膀胱切除的癌旁组织标本,以及人膀胱癌细胞RT4、5637、T24、UMUC-3、TCCSUP和输尿管上皮永生化细胞SV-HUC-1。采用免疫组织化学染色法、qPCR法和WB法检测膀胱癌组织和细胞中CTHRC1的表达水平,通过Kaplan-Meier曲线分析CTHRC1表达对总生存期(OS)的影响。运用RNAi技术,敲降5637细胞CTHRC1表达后,通过细胞划痕实验和Transwell实验检测CTHRC1表达下调对5637细胞迁移和侵袭的影响。利用基因集富集分析(GSEA)预测CTHRC1相关的潜在信号通路,WB法检测敲降CTHRC1表达对FAK-ERK1/2通路相关蛋白表达的影响。结果:CTHRC1的转录和翻译水平在肌层浸润性膀胱癌(MIBC)组织和细胞中表达显著上调(均P<0.05),CTHRC1高表达组患者5年OS较低表达患者缩短(P<0.05)。干扰CTHRC1表达后,膀胱癌5637细胞迁移及侵袭能力均显著降低(均P<0.01)。GSEA预测显示,CTHRC1高表达组主要富集在黏着斑激酶(FAK)、肌动蛋白细胞骨架调节、FAK和ERK1/2信号通路。WB法实验结果表明,重组CTHRC1蛋白促进膀胱癌5637细胞FAK-ERK1/2信号通路活化(P<0.05或P<0.01)。结论:CTHRC1在MIBC中表达上调,且与膀胱癌患者不良预后密切相关;CTHRC1促进膀胱癌细胞迁移和侵袭,该过程可能与FAK-ERK1/2信号通路的激活有关。

ADAMTS18基因过表达可抑制人乳腺癌细胞的迁移与侵袭

目的:探讨ADAMTS 18(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 18)基因过表达对人乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:采用RT-PCR法检测乳腺癌BT549、MB231、MB468、MCF7、SK-BR-3、T47D细胞和乳腺纤维囊性病MCF10A细胞以及乳腺癌旁组织中ADAMTS18 m RNA的表达情况。将ADAMTS18过表达的重组载体质粒pc DNA3.1(+)-ADAMTS18转染至乳腺癌BT549、MB231和MCF7细胞后,采用克隆形成实验和CCK-8法检测ADAMTS18过表达对乳腺癌细胞克隆形成和增殖能力的影响,划痕愈合实验和Transwell小室法检测ADAMTS 18过表达对乳腺癌细胞体外迁移和侵袭能力的影响。结果:乳腺癌BT549、MB231、MB468、MCF7、SK-BR-3和T47D细胞中ADAMTS18 m RNA的表达水平显著低于乳腺纤维囊性病MCF10A细胞以及乳腺癌旁组织(P值均<0.01)。ADAMTS18过表达后BT549、MB231和MCF7细胞的迁移和侵袭能力被显著抑制(P值均<0.01),而克隆形成和增殖能力无显著变化(P值均>0.05)。结论 :ADAMTS18过表达可抑制乳腺癌细胞的体外迁移和侵袭。