维生素E对动物精液品质的作用研究进展

维生素E是天然的抗氧化剂,在日粮或精液稀释液中添加维生素E均可通过提高抗氧化作用来提高动物的精液品质,同时维生素E与其他营养物质组合可进一步提高对动物精液品质的有益作用。本文综述了在日粮或精液稀释液中添加维生素E对精液品质的影响,为全面理解维生素E对动物精液品质的作用提供参考。

多不饱和脂肪酸对动物精液品质影响的研究进展

多不饱和脂肪酸(PUFA)主要分为ω-3 PUFA和ω-6 PUFA,是精子质膜脂质的主要成分,对精子抗氧化、提高精子质膜流动性、维持精子结构完整性及睾酮合成等具有重要作用。不同类型PUFA对精液品质的作用有所不同,ω-6 PUFA中的花生四烯酸(AA)能够促进睾酮的分泌,但精浆中过量的AA可能诱导氧化应激;亚油酸(LA)同样可提高体内睾酮水平,共轭亚油酸(CLA)可降低精子的氧化应激;动物体内少量的二十二碳五烯酸(DPA)不仅能参与精子的运输过程,还能提高精子的抗氧化能力。ω-3 PUFA中的α-亚麻酸(ALA)具有抗氧化作用并能刺激睾酮的合成,二十二碳六烯酸(DHA)作用与ALA相似,可提高精子的抗氧化能力,同时可促进睾酮合成;二十碳五烯酸(EPA)对精子结构及睾酮合成具有调节作用。适当的ω-6/ω-3 PUFA比例对精子的活力、质膜结构、脂质组成和顶体反应均具有重要的调节作用。PUFA对精子的作用可因添加的方式、类型、ω-6/ω-3PUFA的比例及动物种类的不同而有所不同。近年来,PUFA对动物精液品质作用的相关研究取得了较大进展,但其提高精液品质的作用机制仍需进一步深入探讨。作者综述了在饲粮或精液稀释液中添加不同类型的ω-3 PUFA、ω-6 PUFA及ω-6/ω-3 PUFA比例对精子的影响,以期为深入了解PUFA在动物精液生产中的应用提供理论参考。

胍基乙酸合成代谢途径及其在动物生产中应用研究进展

胍基乙酸是一种天然存在的氨基酸衍生物,可作为肌酸的直接前体物质,而肌酸是肌肉和神经组织能量代谢中的一种重要化合物。胍基乙酸作为一种新型的营养性添加剂,外源补充对动物无明显的副作用,在改善动物生长性能和胴体品质方面具有重要作用。文章综述胍基乙酸生物转化的基本代谢途径及其在动物生产中的应用,为胍基乙酸在畜禽养殖行业中的应用提供参考。

脑-肠轴及其在动物摄食调控中的作用

摄食是动物的一种反射性活动,动物摄食行为的调节与脑-肠轴密切相关。动物摄食后,营养物质接触胃肠道从而刺激脑肠肽的释放,通过迷走传入神经元将信号传递给中枢神经系统,神经中枢将信号整合后经传出神经到达效应器官以促进或抑制摄食。脑-肠肽是参与食物摄取的重要的胃肠激素,在脑-肠轴调控摄食行为中起关键的作用,本文就脑-肠轴参与摄食调节作用方面的研究进展作一综述。

白蚁肠道木质素及纤维素分解菌的分离鉴定及产酶条件优化

利用刚果红法、Azure-B平板法从白蚁肠道中分离出5株同时具有木质素降解和纤维素分解功能的菌株,选取其中分解功能最强的菌株MX5经形态观察、生化鉴定和16S rRNA鉴定为芽孢杆菌属的地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis。产酶条件优化试验结果表明,菌株MX5以w=0.5%秸秆为碳源,w=0.5%酵母粉和硫酸铵混合物为氮源,初始pH8.0,37℃摇瓶培养96 h,接种量为1%时,产酶活性最高。筛选出产酶活性优良的菌株,对提高木质纤维素的利用率、降低环境污染等方面意义深远。

1株高效低温纤维素分解菌的分离鉴定及产酶条件优化

我国拥有丰富的纤维素资源,但因大量农业废弃物不能及时有效利用造成了资源的浪费,同时也污染了环境[1-2].而纤维素酶的广泛应用为充分利用纤维素提供广阔途径.大多数中温菌在低于20℃时已基本无代谢外源物质活性,普通纤维素酶的最适作用温度多为45℃～65℃,而低温纤维素酶的最适作用温度在20℃左右[3].耐冷菌能在低温条件下氧化外源物质,有助于在保证催化效率的同时降低反应温度和缩短反应时间,从而大幅度节约能源[4].使其在工业应用和基础研究中都具有广泛的研究价值.

不同方法提取的复方中药提取物对小鼠乳腺上皮细胞增殖的影响

为了研究复方中药提取物对小鼠乳腺上皮细胞增殖的影响,为开发提高母畜泌乳量的中草药产品奠定基础,使用混合酶消化法分离培养妊娠中期小鼠乳腺上皮细胞,通过SDS-PAGE对纯化后细胞进行鉴定。使用水煎和醇提两种方法提取的复方中药提取液分别作用于对数期乳腺上皮细胞1、3、5 d,使用MTT法检测细胞活力。结果使用混合酶消化法得到大量乳腺上皮细胞。不同方法提取的中药复方提取液在高浓度时促进细胞增殖,在低浓度时抑制细胞增殖。促进作用随作用时间增加而降低。表明醇提中药复方促进细胞增殖的浓度范围大于水煎中药复方,且醇提的中药复方作用效果优于水煎中药复方。

白蚁肠道木质素分解菌PY12的分离鉴定及lip基因的克隆

利用苯胺蓝平板法从白蚁肠道中分离到一株木质素分解高效菌株PY 12,经形态观察、生化鉴定和16 SrRNA鉴定为肠杆菌属的霍氏肠杆菌(Enterobacterhormaechei).根据已报道的lip(木质素过氧化物酶,Lignin Peroxidase)基因序列设计特异性引物,克隆该菌的lip基因,将其克隆入pMD19-T载体,获得的核苷酸序列为918 bp,并与GenBank中已知的lip序列进行同源性对比,同源性不高,但该核苷酸翻译后的氨基酸序列比对结果发现,其与假单胞杆菌Pseudomonas sp.编码蛋白质的氨基酸序列同源性为88.5%.

日粮能源结构对仔猪小肠黏膜二糖酶活性及基因表达的影响

本试验旨在研究不同能源结构的日粮对断奶仔猪小肠黏膜二糖酶活性及基因表达的影响。试验选用健康、体况一致的杜×长×大三元杂交断奶仔猪18头,随机分为3个处理组,每组6个重复。试验日粮的消化能值保持一致为14.8 MJ/kg,日粮的碳水化合物与植物性油脂的能值比(CEV/FEV)分别为11.7∶1.0、1.5∶1.0和1.0∶6.9。结果表明:随着CEV/FEV值的降低,小肠各段黏膜中乳糖酶、蔗糖酶和麦芽糖酶活性均呈下降趋势,表现为CEV/FEV为1.0∶6.9组的十二指肠黏膜乳糖酶、蔗糖酶和麦芽糖酶活性显著低于CEV/FEV为11.7∶1.0组(P<0.05);空肠黏膜中CEV/FEV为1.5∶1.0和1.0∶6.9组乳糖酶、蔗糖酶和麦芽糖酶活性显著低于CEV/FEV为11.7∶1.0组(P<0.05),1.5∶1.0与1.0∶6.9组间差异不显著(P>0.05);CEV/FEV为1.0∶6.9组的回肠黏膜蔗糖酶和麦芽糖酶活性显著低于11.7∶1.0组(P<0.05)。随着CEV/FEV值的降低,小肠各段黏膜SI m RNA表达量显著降低(P<0.05)。可见,随着CEV/FEV值的降低,仔猪小肠黏膜二糖酶活性及基因表达的降低表现出了对日粮能源结构变化的适应。

过量添加酿酒酵母培养物对肉仔鸡生长性能的影响

本试验研究酿酒酵母培养物作为饲料添加剂时,在过量添加的情况下对肉仔鸡的影响机制。选取144只公母各半,健康状况良好,体重相近的1日龄AA肉仔鸡,随机分为6组,每组4个重复,每个重复6只鸡。对照组饲喂基础日粮,其他试验各组日粮按不同比例添加酵母培养物,其添加剂量分别为0.03%、0.06%、0.12%、0.24%以及0.48%,试验期为42 d。结果表明：与对照组相比,日粮中添加0.03%以上酵母培养物会显著降低1~42日龄内AA肉仔鸡的平均日增重（P〈0.05）与前期（18~21 d）氮素表观沉积率,提高料肉比（P〈0.05）;添加0.06%以上酵母培养物会显著降低后期（39~41 d）氮素表观沉积率;添加剂量在0.03%~0.24%范围内可以提高血清中尿素氮与球蛋白水平,降低碱性磷酸酶水平;酵母培养物的过量添加也会降低仔鸡小肠粘膜发育,降低绒毛高度与VCR比值。

白蚁肠道木质素分解菌、染料脱色菌的分离鉴定及产酶条件优化

分离具有木质素分解功能的菌株,并优化其产酶条件,同时观察分离菌株对染料的脱色情况,可为有效分解利用木质素提供必要的微生物资源。利用苯胺蓝平板法从黑胸散白蚁肠道中分离到2株具有木质素分解功能的菌株PY12、MX5,经16srRNA鉴定PY12、MX5分别为肠杆菌属的霍氏肠杆菌(Enterobacter hormaechei)、芽孢杆菌属的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。优化后菌株PY12LiP活力提高为278U/L,菌株MX5LiP活力提高为256U/L。并研究二者对6种染料的脱色效果观察,发现菌株PY12、MX5对6种染料都有不同程度的脱色作用,但对结晶紫脱色作用较弱。

蜡样芽胞杆菌纤维素酶基因的克隆与其在乳酸菌中的表达

全球每年可产生的纤维素数量庞大。为了探索纤维素资源,更为科学合理的利用纤维素类饲料提供理论依据,根据蜡样芽胞杆菌纤维素酶基因序列设计1对特异性引物,扩增纤维素酶(Cell)基因,获得片段大小约为1 269bp的目的基因。该基因与Bacillus cereus B4264、Bacillus cereus G9842纤维素酶基因序列同源性分别达96%和95%。将Cell基因与乳酸乳球菌表达载体pNZ8149进行连接,电转化入乳酸菌NZ3900中,构建纤维素高效分解基因工程乳酸菌,经乳链菌肽(Nisin)诱导表达,SDS-PAGE分析得到分子量大小约为42kDa的目的片段。刚果红平板验证该表达蛋白具有纤维分解活性。FPA法测定表达产物酶活力为0.57U/mL。该基因的成功表达,对纤维素基因工程菌的相关研究具有指导意义。

家蝇溶菌酶1基因的克隆、序列分析及原核表达

采用cDNA末端快速扩增技术(RACE),对鸡致病性大肠杆菌诱导家蝇幼虫抑制性消减文库(SSH)中筛选得到家蝇溶菌酶1基因((Musca domestica lysozyme-1,MdL-1)进行扩增,测序分析得到一个全长为537 bp的cDNA片段,其开放阅读框(ORF)432 bp,与Genbank中登录号为AY344589.1基因同源性为96%。构建重组表达质粒pET-32a-MdL-1,转化大肠杆菌BL21(DE3),异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析显示,表达产物大小约为34 kD,与预期蛋白大小一致。结果表明,利用RACE技术克隆得到MdL-1全长基因并在大肠杆菌中获得了表达,为进一步研究该蛋白的生物学及免疫学活性奠定了基础。

白纹伊蚊丝氨酸抗凝血AL-71基因的克隆序列分析及原核表达

丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serpin)对生物的生长发育、生理功能和病理起到重要调节作用。本试验成功克隆白纹伊蚊丝氨酸抗凝血AL-71基因,序列大小为1 383 bp。经同源性分析,该基因与原序列同源性为88.85%,氨基酸同源性为90.24%。同时,对其分子生物学特性进行预测和建模分析,发现白纹伊蚊的氨基酸序列活性部位和催化结构域表现出较高的相似性。成功构建原核表达载体PET-AL-71,经IPTG诱导,获得分子量大小约为50 KDa的AL-71蛋白,与预期结果一致。为下一步在真核表达系统表达奠定基础。

肉羊二元杂交组合模式建立与比较的研究

利用品种间的杂种优势生产商品肉羊是我国乃至世界肉羊生产的基本模式,这种模式可以将父、母本品种的优异性状进行有机融合,所生产的商品肉羊不仅具有生长发育快、产肉性能高、肉质优异等特性,而且具有经济效益显著的优点。吉林省是我国肉羊生产优势区域之一,因此,利用自国外引入的杜泊羊、萨福克羊、澳洲白羊等作为父本品种,以小尾寒羊、湖羊、乌珠穆沁羊作为母本品种,进行二元杂交,比较不同杂交组合F1代的生长发育和产肉性能,进而为筛选出适合于吉林省乃至北方农牧交错带最佳的肉羊杂交组合模式提供参考依据。结果表明:各个杂交组合F1代均表现出较好的生长发育性状和产肉性能,尤其是杜泊羊与小尾寒羊的F1代更为突出,表明该杂交组合可以作为商品肉羊生产的最佳二元杂交模式在区域内进行推广应用。

日粮碳水化合物水平对体内脂肪酸合成酶调控的研究进展

脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FASN)是一种参与动物体脂肪酸从头合成的关键酶。在哺乳动物细胞内催化乙酰辅酶A与丙二酸单酰辅酶A合成软脂酸。脂肪酸合成酶作为动物体脂肪酸合成途径中重要的催化酶,它的表达量变化对如何控制动物体脂沉积、如何科学搭配日粮具有至关重要的作用。文章阐述了日粮与动物体脂沉积的关系,主要论述了日粮中碳水化合物水平的变化对FASN的调控如何引起体脂沉积的改变,以及动物摄入日粮后机体内代谢激素的变化对FASN产生的影响,从机制上认识FASN与动物日粮摄入和代谢激素的联系。

乳杆菌联合壳聚糖季铵盐对奶牛子宫内膜上皮细胞炎症的影响

本试验旨在探究魏斯氏乳杆菌(L. weissella)、唾液乳杆菌(L. salivarius)和约氏乳杆菌(L.johnsonii)联合壳聚糖季铵盐(CQN)对奶牛子宫内膜炎的影响。通过乳酸脱氢酶(LDH)释放检测法筛选致病性大肠杆菌(EPEC)最佳处理浓度和时间,建立奶牛子宫内膜上皮细胞炎症模型。诱导细胞炎症后,单独添加0.01 mg/mL CQN、108CFU/mL乳杆菌处理以及乳杆菌联合CQN处理,ELISA法和RT-qPCR法检测细胞因子IL-6、IL-8和IL-10的变化。结果表明:单独添加3株乳杆菌处理与单独添加CQN处理均降低了IL-6的蛋白和mRNA表达(P<0.05),但对IL-8的表达无显著影响;相比单独添加处理,约氏乳杆菌与CQN混合处理降低了IL-6和IL-8的表达(P<0.05),并恢复了IL-6/IL-10和IL8/IL-10的平衡;与CQN混合处理后,约氏乳杆菌对奶牛子宫内膜上皮细胞的黏附率提升(P<0.001)。结果提示,约氏乳杆菌联合CQN具有良好的抗炎潜力,可用于奶牛子宫内膜炎的治疗。

miR-10b对牛卵巢颗粒细胞凋亡的影响

颗粒细胞是卵巢中必需的体细胞,在卵泡发育过程中起重要作用。为探究miR-10b对牛卵巢颗粒细胞凋亡的影响,本实验中2个处理组分别转染miR-10b模拟物(miR-10b mimics)和miRNA模拟物(mimics NC),转染48h后,通过Quantitativereal-timePCR(qRT-PCR)检测内源miR-10b表达量,明确miR-10b mimics转染成功。利用qRT-PCR和Western Blot检测凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2和Bax表达量的变化;利用流式细胞术检测颗粒细胞凋亡率。结果显示:与mimics NC组相比,miR-10b mimics组Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平显著降低,Bax和Caspase-3 mRNA和蛋白表达水平显著升高;同时miR-10b mimics组的细胞凋亡率较mimics NC组显著升高。结果表明,miR-10b可促进牛卵巢颗粒细胞凋亡。

牛PAI-1基因真核表达载体构建、生物信息学分析及功能初探

本研究旨在构建牛纤溶酶原激活物抑制剂1(Plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)基因真核表达载体、生物信息学分析并对其功能进行初探。实验参照GenBank数据库公布的牛PAI-1基因的CDS序列信息设计引物,通过RT-PCR获得PAI-1基因片段,将基因片段与pMD-19-T载体连接转化DH5α感受态细胞,构建pMD-19-T-PAI-1克隆载体,双酶切回收基因片段,构建pcDNA3.1-PAI-1真核表达载体,经双酶切、测序鉴定构建成功。将表达载体转染至293T细胞,48 h后进行荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western Blot检测PAI-1以及凋亡相关基因Bcl2、Bax和Caspase-3的表达。结果显示:pcDNA3.1-PAI-1真核表达载体测序结果与GenBank数据库公布的牛PAI-1基因CDS序列完全匹配,生物信息学分析发现PAI-1基因编码区全长1 209 bp,编码402个氨基酸,存在35个潜在磷酸化位点,主要分布在细胞外。过表达PAI-1可显著提高293T细胞中PAI-1 mRNA和蛋白表达,抗凋亡基因Bcl2 mRNA和蛋白水平显著升高,促凋亡基因Bax和Caspase-3 mRNA和蛋白水平显著降低。

围产期奶牛子宫的免疫调节研究进展

许多奶牛产后发生胎衣不下、亚临床型子宫内膜炎或子宫内膜炎等生殖道疾病,主要原因是分娩后产道受损及子宫内膜表层自然损伤等导致的子宫内细菌感染。中性粒细胞是子宫先天免疫系统的重要组成部分,也是抵御子宫内感染的主要防线,产后中性粒细胞迅速流入子宫可以避免胎衣不下及子宫内膜炎等临床疾病。葡萄糖供应、低钙血症、酮症和炎性细胞因子丰度变化都会影响子宫的免疫状态,有效调节免疫反应以预防子宫疾病有利于围产期奶牛的饲养管理,降低生殖道疾病的发生几率。论文综述了影响先天免疫、生殖道炎症程度和持续时间的因素,探讨了围产期奶牛免疫功能调节的有效治疗方法,可为围产期奶牛产后生殖道疾病预防和科学饲养管理提供理论依据。