褪黑素缓解玉米赤霉烯酮引发的卵巢颗粒细胞氧化应激与雌二醇合成异常

旨在研究玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)对卵巢颗粒细胞的毒性作用以及对雌二醇(Estradiol,E2)合成的影响,为筛选缓解ZEN毒性的药物提供参考.试验利用人颗粒细胞系(KGN)建立ZEN细胞攻毒模型,采用CCK⁃8法检测细胞活力,使用试剂盒检测细胞活性氧及线粒体膜电位水平,利用RT⁃qPCR检测E2合成基因的mRNA表达水平;同时,筛选缓解ZEN毒性的药物并验证其挽救作用.结果显示,添加ZEN(0、30、90μM)后,细胞活力随着ZEN浓度的升高而显著降低(P<0.05),细胞内ROS水平增加并且线粒体膜电位水平显著下降(P<0.05),E2合成基因CYP19A1、CYP11A1、STAR及HSD3B的mRNA表达水平显著下调(P<0.05).与ZEN处理组相比,联合添加褪黑素(Melatonin,MT)可以增加活细胞数量并显著提高细胞活力(P<0.05),同时,E2合成基因CYP19A1、CYP11A1、STAR及HSD3B的mRNA表达水平显著上调(P<0.05),细胞内ROS水平及细胞膜电位水平显著恢复.综上,ZEN导致KGN细胞氧化应激及E2合成紊乱,而MT可部分缓解上述中毒症状,提示MT可用于缓解ZEN毒性.

玉米赤霉烯酮对奶牛乳腺上皮细胞生长和乳脂合成相关基因表达的影响

旨在探索不同浓度玉米赤霉烯酮(ZEN)对奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)生长和乳脂合成相关基因表达的影响。首先,用不同剂量ZEN处理MAC-T细胞36 h,血细胞计数板统计细胞数量,染色并分析细胞凋亡与坏死情况,筛选ZEN添加的合适剂量;接着,试剂盒检测ZEN对MAC-T细胞中活性氧(ROS)以及线粒体膜电位的影响;最后,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术,分析ZEN对MAC-T细胞增殖、凋亡、氧化应激和乳脂合成相关基因表达的影响。结果表明,低剂量ZEN(0.01~1.00μmol/L)有促进MAC-T生长的趋势,而高剂量ZEN(5.00~10.00μmol/L)显著降低MAC-T细胞数量;0.10μmol/L ZEN对MAC-T中ROS和线粒体数量无明显影响,但10.00μmol/L ZEN显著增加了MAC-T中ROS水平,降低了线粒体数量;RT-qPCR结果表明,0.10μmol/L ZEN显著促进增殖基因(CDK1、CCND2)、抗氧化基因(DHODH、GPX4)和抗凋亡基因(BCL-2)表达,但同时提高了凋亡基因(CAS-3、BAX)表达量;10.00μmol/L ZEN显著抑制增殖基因(PCNA、CDK1、CCND2)、抗氧化基因(DHODH、GPX4、AIFM2)和抗凋亡基因(BCL-2)表达,但显著促进凋亡基因(CAS-3、BAX)表达;值得注意的是,0.10μmol/L ZEN显著促进了乳脂合成相关基因(PPARγ、FASN、JAK-2),但10.00μmol/L ZEN显著抑制了这些基因表达。上述结果提示,不同浓度ZEN对MAC-T细胞的作用存在差异:0.10μmol/L ZEN可以促进MAC-T细胞生长和乳脂合成相关基因表达的同时,也会诱导凋亡基因表达;10.00μmol/L ZEN会诱导MAC-T细胞氧化应激、降低线粒体数量,抑制增殖、抗氧化、抗凋亡和乳脂合成相关基因表达,同时促进凋亡基因表达,导致细胞死亡。

全株水稻青贮对奶牛生产性能的影响

【目的】通过体外产气法评价全株水稻青贮替代不同比例全株玉米青贮对奶牛瘤胃发酵特性的影响,筛选全株水稻青贮替代饲粮中全株玉米青贮的最佳比例,为全株水稻青贮在奶牛生产中的应用提供参考数据。【方法】采用体外产气法单因素试验,设Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ共5组,分别用全株水稻青贮替代各组饲粮中0%,25%,50%,75%和100%的全株玉米青贮(风干基础),每组5个重复,同时设2个空白(即只有瘤胃液或只有培养液而无底物)作为产气量矫正,筛选全株水稻青贮替代饲粮中全株玉米青贮的最佳比例;动物试验选用26头产奶量、胎次、泌乳时间相近的健康荷斯坦奶牛,随机分为对照组(粗饲料由全株玉米青贮组成)和试验组(采用最佳替代比例,即用全株水稻青贮替代基础饲粮中50%的全株玉米青贮)2组,每组13个重复,每个重复1头奶牛。预试期14 d,正试期106 d,探究全株水稻青贮替代基础饲粮50%全株玉米青贮对奶牛生产性能、血清生化指标、养分表观消化率及瘤胃发酵参数的影响。【结果】体外产气法单因素试验表明,试验Ⅲ组的48 h累积产气量、Ⅱ组的干物质消失率、Ⅴ组的NH_(3)-N质量浓度均高于其他各组,但相互间并无显著差异(P>0.05);试验Ⅲ组的微生物蛋白质量浓度((3.19±0.37)mg/mL)显著高于Ⅰ、Ⅱ及Ⅳ组(P<0.05),但与Ⅴ组差异不显著(P>0.05);所有试验组乙酸、丙酸、丁酸、总挥发性酸浓度差异均不显著(P>0.05),但试验Ⅲ组的戊酸浓度((1.33±0.39)mmol/L)显著高于Ⅳ和Ⅴ组,试验组Ⅰ和Ⅱ组显著高于试验Ⅴ组(P<0.05),而Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组间差异不显著(P>0.05)。动物试验表明,与对照组相比,试验组奶牛生产性能指标(干物质采食量、产奶量、乳蛋白率、乳脂率、乳糖率、乳尿素氮质量浓度、乳体细胞数、总固体物质量分数)、血清生化指标(总蛋白、葡萄糖、总胆固醇、甘油三脂、白蛋白、尿素氮、谷丙转氨酶、谷草转氨酶)及养分表观消化率指标(粗蛋白、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、干物质)均无显著差异(P>0.05);奶牛瘤胃发酵参数中,除对照组的NH_(3)-N质量浓度((9.89±4.85)mg/dL)、总挥发性脂肪酸浓度((95.25±12.82)mmol/L)和丙酸体积分数(17.12%±3.44%)极显著(P<0.01)或显著(P<0.05)高于试验组外,其他参数间均无显著差异(P>0.05)。【结论】以全株水稻青贮替代奶牛饲粮中50%的全株玉米青贮是可行的。

一种中草药复方对低龄简州大耳羊血清免疫指标及肠道微生物多样性的影响

为研究一种中草药复方对低龄简州大耳羊免疫功能及肠道微生物多样性的影响,本试验将3、6月龄的简州大耳羊分为中草药组和对照组,中草药组添加不同剂量的中草药复方,对照组不添加,饲喂15 d后测定生产性能和血清免疫指标。结果显示:中草药组可提高3、6月龄简州大耳羊的平均日增重,并降低料重比;与对照组相比,中草药组可提高免疫球蛋白G(IgG)、碱性磷酸酶活力(AKP)、干扰素-γ(IFN-γ)及总超氧化物歧化酶活力(T-SOD)的含量;中草药组的Chao1指数、Shannon指数、Simpson指数均有不同程度的提高;中草药组可提高拟杆菌等有益菌的定殖,且能减少厚壁菌、变形菌等致病菌数量。说明该中草药复方可提高3、6月龄简州大耳羊的免疫力,增加肠道微生物的多样性指数并改善肠道菌群结构。

紫象草原花青素的大孔吸附树脂纯化、平均聚合度及体外抗氧化活性测定

试验旨在利用大孔吸附树脂获得紫象草原花青素粗提物的纯化条件,并探究在此条件下获得纯化物的平均聚合度和体外抗氧化活性。试验采用单因素试验设计,通过比较3种大孔吸附树脂D101、HP-20、ADS-17的吸附与解吸特性,选择最优吸附树脂类型,对紫象草原花青素粗提物进行洗脱浓度、上样体积和洗脱体积的筛选,之后利用静态和动态吸附与解吸试验确定纯化条件,制备紫象草原花青素纯化物;采用盐酸-香草醛法测定纯化物原花青素的平均聚合度及其对1,1-二苯基-2三硝基肼(DPPH·)和羟自由基(·OH)的体外清除率。结果表明:采用φ2.6 cm×30.0 cm玻璃层析柱,选择D101型大孔吸附树脂、90%(V/V)浓度乙醇为洗脱剂,上样体积480 mL,洗脱体积155 mL时纯化效果较好,纯化后原花青素B2含量由纯化前10.01 mg/g提升至13.82 mg/g,提升了36.06%;紫象草原花青素粗提物经乙酸乙酯萃取后,获得水相和乙酸乙酯相的平均聚合度分别为26.87、13.63,纯化物的平均聚合度为14.67。当紫象草原花青素纯化物质量浓度为100 mg/mL时,DPPH·、·OH清除能力分别为99.55%、97.72%,相当于1 mg/mL维生素C,并且紫象草原花青素纯化物体外抗氧化活性显著高于粗提物(P<0.05)。综上所述,试验获得了大孔吸附树脂纯化紫象草原花青素的条件,纯化处理基本不影响原花青素提取物的平均聚合度,并发现原花青素纯化物具有良好的体外抗氧化活性。

原花青素B2通过miR⁃499⁃5p促进骨骼肌慢肌纤维基因的表达

旨在探究原花青素B2(Proanthocyanidins B2,PB2)是否通过miR⁃499⁃5p调控骨骼肌慢肌纤维基因的表达.在小鼠C2C12细胞和猪骨骼肌卫星细胞诱导分化形成肌管后,分别向肌管中添加0μg/mL、2.5μg/mL、5μg/mL和10μg/mL的PB2,探究不同浓度PB2对慢肌纤维基因表达的影响.在机制研究试验中,分别向C2C12肌管和猪肌管中添加10μg/mL的PB2,同时转染200 nM的miR⁃499⁃5p inhibitor抑制miR⁃499⁃5p的表达.结果表明,不同添加剂量的PB2均可促进C2C12肌管MyHC I基因的表达(P<0.05);添加5μg/mL和10μg/mL的PB2显著增加猪肌管MyHC I基因的表达(P<0.05);添加5μg/mL和10μg/mL的PB2上调C2C12肌管和猪肌管miR⁃499⁃5p的表达水平(P<0.05).机制研究发现,抑制miR⁃499⁃5p解除了PB2对miR⁃499⁃5p、MyHC I mRNA和慢型MyHC蛋白表达的促进作用.以上研究表明,PB2可以通过miR⁃499⁃5p促进骨骼肌慢肌纤维基因的表达.

植物活性多糖的生理功效及其在反刍动物生产中的应用研究进展

植物活性多糖作为饲料添加剂,因具有来源广泛、安全高效、无毒副作用、生物活性作用效果突出的特点而备受关注。它不仅可以增强机体免疫力、抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、降血脂,还可以提高反刍动物的生长性能、改善瘤胃发酵模式、维持肠道微生态平衡、提高精液保存效果、增强疫苗免疫活性、缓解机体免疫应激。本文主要阐述了植物活性多糖的生物学功能及其作用机制,综述了近些年其在反刍动物安全生产中的应用,并对其应用前景进行展望,以期为植物活性多糖在反刍动物安全生产方面的理论研究及进一步应用提供参考。

褪黑素对动物繁殖的调控作用机制研究进展

褪黑素广泛存在于多种动物体内,具有较强的抗氧化及抗细胞凋亡能力,参与动物机体内多种器官、组织和细胞的生理活动过程,调控下丘脑-垂体-性腺轴,在动物繁殖过程中发挥着重要的调控作用。本文综述了褪黑素对动物季节性繁殖、卵泡发育、精子发生、体外受精、早期胚胎发育和精液冷冻保存的作用及其作用机制,为畜牧生产实践中褪黑素的使用提供参考。

VEGF家族及其受体调控雌性动物生殖活动的研究进展

血管内皮生长因子(VEGF)家族由多个生物活性因子组成,它们具有促进血管内皮细胞增殖分化、增加血管通透性和诱导淋巴管生成等功能,是众多生物学过程的必要调控因子,VEGF在雌性动物生殖活动中发挥着重要作用。本文首先梳理了VEGF家族的分类、受体的信号转导以及生物学功能,再对其在雌性动物卵巢、子宫、输卵管、胚胎发育和部分雌性生殖疾病中的作用进行综述,为进一步研究VEGF在雌性动物生殖活动中的作用提供参考。

枯草芽孢杆菌和粪肠球菌对鲫鱼生长性能、血清学指标和肠道微生物多样性的影响

为探讨在饲料中添加枯草芽孢杆菌和粪肠球菌对鲫鱼生长发育、免疫机能及肠道菌群的影响,将900尾鲫鱼分为3个试验组,分别饲喂基础饲料(S1)、添加枯草芽孢杆菌与粪肠球菌混合饲料(S2)和添加枯草芽孢杆菌饲料(S3),在饲喂47 d后检测3组鲫鱼的生长性能、免疫指标和肠道菌群生物多样性。结果显示,添加枯草芽孢杆菌和粪肠球菌混合饲料组鲫鱼的增质量率、特定生长率和饵料系数均显著高于其他组(P<0.05),该组鲫鱼血清的丙二醛(MDA)含量显著下降且低于其他2组(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)和碱性磷酸酶(AKP)活性较其他2组显著升高(P<0.05);3组鲫鱼肠道菌群中多为厚壁菌门和变形菌门,共有优势菌属均为梭菌属,其中枯草芽孢杆菌和粪肠球菌混合饲料饲养组(S2组)鲫鱼的肠道菌群更具多样性。由此可见,枯草芽孢杆菌和粪肠球菌可有效促进鲫鱼生长,改善鲫鱼肠道菌群结构,增强其免疫机能。

过瘤胃脂肪对牦牛血清生化指标、内源激素、脂肪合成及代谢相关酶与肉品质的影响

本试验旨在研究饲粮添加不同水平过瘤胃脂肪(RPF)对牦牛血清生化指标、内源激素、脂肪合成及代谢相关酶与肉品质的影响。试验选择32头4岁左右、体重为(181.55±23.59)kg的健康牦牛,采用随机区组设计分为4个组,分别对照组(CON组,RPF添加水平为0)、试验1组(RPF1组,RPF添加水平为1.2%)、试验2组(RPF2组,RPF添加水平为2.4%)和试验3组(RPF3组,RPF添加水平为3.6%),每组8个重复,每个重复1头牛。预试期10 d,正试期100 d。结果表明:1)随着RPF添加水平的提高,牦牛血清谷草转氨酶(AST)活性呈线性和二次曲线提高(P<0.05),其中RPF2组血清AST活性显著高于CON组、RPF1组和PRF3组(P<0.05);随着RPF添加水平的提高,血清甘油三酯(TG)含量呈线性降低(P<0.05),其中RPF3组血清TG含量显著低于CON组和RPF1组(P<0.05)。2)RPF2组和RPF3组牦牛血清胰岛素(INS)含量显著高于CON组和RPF1组(P<0.05)。3)RPF1组和RPF3组牦牛血清乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)活性显著高于CON组(P<0.05)。4)随着RPF添加水平的提高,牦牛背最长肌粗脂肪含量呈线性提高(P<0.05)。5)与CON组相比,饲粮添加不同水平RPF对牦牛肌肉脂肪酸组成无显著影响(P>0.05)。综上所述,饲粮添加RPF能促进牦牛肌内脂肪的沉积,但对牦牛肝脏功能有不利影响。

尿素中毒对山羊肾脏氧化应激及铁死亡指标的影响

[目的]本研究旨在探究尿素引起山羊肾脏损伤的病理分子机制。[方法]选择健康无病的简州大耳羊9只,将试验羊随机分为3组:对照组(C组)、5%尿素组(U5组)和10%尿素组(U10组),日粮供给采用粗精料混合饲喂及尿素代替部分豆粕的精料饲喂方式,对照组不加尿素,试验周期为21 d。试验结束后,检测血清血氨含量、肾组织氧化应激指标和铁离子含量,用HE染色和Masson染色观察肾组织病理损伤,透射电镜观察肾小管上皮细胞的超微结构,qPCR检测肾组织铁死亡相关基因mRNA相对转录水平,Western blot检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白表达水平。[结果]与对照组相比,U5组和U10组简州大耳羊丙二醛(MDA)含量极显著上升(P<0.01),谷胱甘肽(GSH)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性极显著下降(P<0.01),铁离子含量极显著上升(P<0.01),肾小管上皮细胞肿胀、变性、坏死,胶原纤维增生,肾小管上皮细胞线粒体皱缩,膜电子密度增加,膜嵴减少,铁蛋白重链1基因(FTH1)、电压依赖性阴离子通道3基因(VDAC3)、肿瘤抑制基因p53、核受体辅活化子4(NCOA4)基因mRNA表达水平均极显著上升(P<0.01),GPX4 mRNA水平和蛋白表达水平均显著下降(P<0.05)。[结论]添加高剂量尿素导致山羊尿素中毒,NRF2表达受到抑制并启动细胞铁死亡机制,引起肾脏氧化应激和铁离子代谢失衡。

牦牛ATF1基因的生物信息学与组织表达特性分析

旨在克隆牦牛激活转录因子1 (Activating transcription factor 1,ATF1)基因及分析其生物信息学和组织表达特性.试验采集母牦牛的心、肝、脾、肺、肾、卵巢、输卵管、子宫组织样品,利用RT-PCR克隆ATF1基因,并采用生物信息学软件分析其分子特征;利用定量PCR (Quantitative PCR,qPCR)检测ATF1基因mRNA组织表达.结果显示,牦牛ATF1基因全长1 162 bp,其中CDS长度为813 bp,共编码270个氨基酸,在210~267位氨基酸位置有1个碱性区域亮氨酸拉链(Basic region leucin zipper, BRLZ),另在30~52位氨基酸还有1个低密度区域,ATF1蛋白属于碱性亲水不稳定蛋白.ATF1核苷酸同源性和核苷酸序列进化树分析结果显示,牦牛与黄牛和瘤牛的亲缘关系最近,与原鸡亲缘关系最远.qPCR结果显示ATF1基因在牦牛组织中的表达特性为:肺中表达量显著高于其他组织(P<0.05),卵巢和肾中的表达量次之,而在心、肝、脾和输卵管中的表达量相对较低.空怀期卵巢、输卵管和子宫中ATF1基因的表达量显著高于妊娠期(P<0.05).综上,牦牛ATF1基因序列在进化过程中较为保守,在各种组织中广泛表达,可能在牦牛低氧适应性和繁殖调控中发挥着重要作用.

不同粗饲料组合添加支链挥发性脂肪酸对牦牛体外瘤胃发酵特性的影响

本研究旨在探讨以不同比例油菜秸秆(RAS)和稻草(RIS)替代全株玉米青贮(WCS)对牦牛体外瘤胃发酵特性的影响,筛选出1种适宜组合后,继续研究添加不同种类支链挥发性脂肪酸(BCVFA)对牦牛体外瘤胃发酵特性的影响。试验1设置12个组,每组4个重复,各组底物组成分别为100%WCS、100%RAS、100%RIS、90%WCS+10%RAS、80%WCS+20%RAS、70%WCS+30%RAS、90%WCS+10%RIS、80%WCS+20%RIS、70%WCS+30%RIS、80%WCS+10%RAS+10%RIS、70%WCS+10%RAS+20%RIS及70%WCS+20%RAS+10%RIS,经体外发酵72 h后测定瘤胃发酵参数,确定1种适宜组合。试验2选择1种适宜组合(70%WCS+20%RAS+10%RIS)为底物,添加0.3%BCVFA(干物质基础),设置对照组(不添加BCVFA)及7个试验组,每组4个重复,各试验组分别添加异丁酸(IB)、异戊酸(IV)、2-甲基丁酸(ME)、IB∶IV=1∶1、IB∶ME=1∶1、IV∶ME=1∶1及IB∶IV∶ME=1∶1∶1,经体外发酵72 h后测定瘤胃发酵参数及纤维素酶活性。结果表明:1)与RAS组和RIS组相比,70%WCS+30%RAS组pH显著降低(P<0.05),微生物蛋白(MCP)和丁酸含量以及干物质降解率(DMD)均显著提高(P<0.05),且中性洗涤纤维降解率(NDFD)显著高于RAS组(P<0.05);80%WCS+20%RIS组pH显著降低(P<0.05),MCP、乙酸、丙酸、丁酸和总挥发性脂肪酸含量以及DMD均显著提高(P<0.05),且NDFD显著高于RAS组(P<0.05);70%WCS+10%RAS+20%RIS组pH显著降低(P<0.05),MCP含量和DMD均显著提高(P<0.05);70%WCS+20%RAS+10%RIS组pH显著降低(P<0.05),MCP含量和DMD均显著提高(P<0.05)。综合比较,70%WCS+20%RAS+10%RIS组为适宜组合。2)与对照组相比,各试验组MCP含量均显著提高(P<0.05),其中IV∶ME组最高;挥发性脂肪酸方面,IB∶IV组和IB∶ME组丙酸和戊酸含量均显著高于对照组(P<0.05);养分降解率方面,对照组和IB∶IV∶ME组显著高于其余各组(P<0.05);纤维素酶活性方面,IB∶ME组、IV∶ME组及IB∶IV∶ME组羧甲基纤维素酶和木聚糖酶活性均显著高于对照组(P<0.05),其中IV∶ME组最高。综上所述,以70%WCS+20%RAS+10%RIS为底物添加0.3%BCVFA(IV∶IB∶ME=1∶1∶1)能有效改善牦牛体外瘤胃发酵特性。

牦牛CCL14蛋白对HepG2细胞活性和凋亡的影响

旨在研究牦牛CCL14蛋白(Bos grunniens C-C motif chemokine 14 protein,BgCCL14)对HepG2细胞的影响和作用机制。将原核表达的BgCCL14蛋白与HepG2细胞共培养,利用CCK-8试剂盒检测细胞活性,平板克隆检测细胞克隆形成能力,细胞划痕检测细胞迁移以及荧光定量PCR检测相关基因的表达量。结果表明,1μg/mL、10μg/mL和20μg/mL的BgCCL14蛋白均能显著降低HepG2细胞活性;20μg/mL的BgCCL14蛋白对细胞增殖和迁移有极显著抑制作用;20μg/mL的BgCCL14蛋白处理36h极显著上调凋亡基因BAK和BAX的mRNA水平,极显著降低HIF1A、PI3K和CDK1基因的mRNA水平,显著降低mTOR基因的mRNA水平。这表明BgCCL14蛋白可能通过促进细胞凋亡抑制肝癌细胞活性。

凉山半细毛羊生长性能和羊毛品质研究

为了监测凉山半细毛羊种群生产性能的变化情况,了解不同年龄段羊只的羊毛品质指标和生长发育性能,本试验对108只不同性别和年龄的凉山半细毛羊的体高、体尺和羊毛品质进行了检测,结果显示:(1)育成公羊的体重和体高、体长和胸围分别显著和极显著高于育成母羊,除了管围以外,成年公羊的体重和体尺均极显著高于成年母羊(P<0.01);(2)同一年龄同一部位的羊毛纤维直径母羊均大于公羊,育成母羊肩部的纤维直径极显著高于育成公羊(P<0.01),成年母羊侧部的羊毛纤维直径显著高于成年公羊(P<0.05);(3)育成羊的毛丛自然长度、卷曲度和伸直率之间无显著差异(P>0.05),成年母羊各部位的毛丛自然长度均显著高于成年公羊(P<0.05),而成年公羊肩部的卷曲度显著高于成年母羊(P<0.05);(4)育成羊的羊毛白度范围在65.30~67.19,光泽度为66.03~68.14,育成期公母羊的羊毛白度(Wht)和光泽度(L)无显著差异(P>0.05),育成公羊肩部和股部的羊毛黄度(YI)显著高于育成母羊(P<0.05),两者分别相差2.56和2.86,成年公羊各个部位的羊毛白度和光泽度以及侧部和股部的羊毛黄度极显著高于成年母羊(P<0.01)。本研究表明,凉山半细毛羊公羊的体重和体尺优于母羊,该品种羊的羊毛品质较好,但其卷曲度和伸直率仍有改善的空间。

原花青素通过塑造肠道菌群调节免疫应答的作用与机制研究进展

原花青素是广泛存在于多种植物中的重要天然生物活性物质。近年来的研究表明,动物饲粮中添加不同来源的原花青素能够调节肠道菌群的多样性与组成,并通过菌群及其代谢产物与肠黏膜免疫系统发生相互作用,从而调节肠道免疫应答。本文综述了原花青素对菌群及其代谢产物的塑造作用,总结了原花青素对肠道免疫应答的调节及可能的作用机制,为原花青素在改善动物肠道健康方面的基础研究和生产应用提供参考依据。

SIRT1对牦牛卵母细胞体外成熟与老化的影响

旨在探索SIRT1在牦牛卵母细胞体外成熟与老化过程中的作用。本研究在体外成熟液中分别添加SIRT1特异性激动剂SRT2104(SRT组)和特异性抑制剂Inauhzin(INZ组),牦牛卵丘卵母细胞复合体(COCs)体外培养24h后,观察卵丘细胞的扩展和第一极体的排出情况;利用免疫荧光检测体外培养24与36h后卵母细胞内的ROS水平;采用实时荧光定量PCR法检测体外培养24与36h后卵母细胞内SIRT1、FOXO3a、SOD2以及Bax的表达水平;体外培养24与36h后的牦牛卵母细胞进行体外受精,观察并统计其卵裂率与囊胚形成率。结果显示,体外培养24h,SRT组的卵丘细胞扩展程度显著高于对照组(P<0.05),而INZ组的卵丘细胞扩展程度和第一极体排出率显著低于对照组(P<0.05)。随着体外培养时间的增加,卵母细胞内的ROS水平显著增加(P<0.05);添加SRT2104能显著抑制卵母细胞中ROS水平的积累(P<0.05),而添加Inauhzin则显著上调卵母细胞内的ROS水平(P<0.05)。体外培养24h后,SRT组SIRT1、FOXO3a与SOD2的表达水平显著高于对照组(P<0.05),但Bax的表达水平显著降低(P<0.05);INZ组的SIRT1、FOXO3a与SOD2表达均显著低于对照组(P<0.05),但Bax的表达水平显著上调(P<0.05)。牦牛卵母细胞体外培养24h后,SRT组的卵裂率与囊胚形成率显著高于INZ组和对照组(P<0.05);卵母细胞体外培养36h后,INZ组的卵裂率和囊胚形成率显著低于其他组(P<0.05)。综上表明,SIRT1参与了牦牛卵母细胞的体外成熟,在体外培养液中适当添加SIRT1激动剂,有利于卵母细胞体外成熟及缓解老化,同时改善早期胚胎的发育能力。

LKB1基因对卵巢颗粒细胞类固醇激素生成相关基因的调控作用

【背景】颗粒细胞类固醇激素的合成能力对卵泡发育及成熟具有重要作用,但其关键的调控因子尚不完全清楚。笔者前期的研究表明肝激酶B1(liver kinase B1,LKB1)基因参与细胞的脂类代谢,类固醇激素的合成与脂类代谢密切相关,并且有研究结果亦显示LKB1敲除可引起小鼠卵巢早衰,表明LKB1对维持卵巢的功能很关键,其在颗粒细胞的确切功能需要进一步研究。【目的】探究LKB1在牛卵泡中的表达模式及其对颗粒细胞类固醇激素生成相关基因的调控作用,为母牛繁殖生理调控研究提供理论依据。【方法】采用免疫组织化学染色对LKB1蛋白在卵泡中进行定位研究;同时分离培养牛原代颗粒细胞,并以促卵泡素受体(follicle stimulating hormone receptor, FSHR)蛋白作为标记基因,细胞免疫荧光染色鉴定颗粒细胞及纯度;然后以原代颗粒细胞为模型,采用siRNA沉默LKB1的技术,利用qRT-PCR方法检测LKB1功能缺失对类固醇激素合成相关基因表达的影响,另一方面采用腺病毒过表达LKB1,qRT-PCR和ELISA技术验证LKB1对类固醇激素合成相关基因表达的调控作用及雌二醇分泌。【结果】1) LKB1蛋白在卵泡中的细胞均表达,但颗粒细胞的染色信号强于膜细胞,进一步的定量分析显示颗粒细胞的表达量显著高于卵泡膜细胞。2)分离培养的牛原代卵泡颗粒细胞贴壁生长、细胞形态多呈圆形,能被颗粒细胞标志基因FSHR抗体标记。3) RNAi技术能显著抑制LKB1的表达。与对照相比,siRNA1和siRNA2干扰LKB1的效率分别为48%(P<0.05)和52%(P<0.05);沉默LKB1显著降低颗粒细胞类固醇激素合成基因STAR (P<0.01)、CYP11A1 (P<0.01)和CYP19A1 (P<0.05)的表达,分别下调了约为对照组的60%、80%和50%。4) LKB1过表达腺病毒及对照组对颗粒细胞均具有高的感染效率,LKB1过表达效率高达10倍(P<0.01);过表达LKB1显著上调STAR (P<0.01)、CYP11A1(P<0.01)和CYP19A1 (P<0.05)的表达,进一步研究显示LKB1基因功能获得促进颗粒细胞雌二醇的分泌(P<0.05)。【结论】LKB1在卵泡颗粒细胞中高表达,促进类固醇激素生成基因STAR、CYP11A1和CYP19A1的表达和雌二醇的分泌。本研究将为LKB1调控牛颗粒细胞类固醇激素合成的功能提供直接的理论依据。

响应面法优化羊源解淀粉芽孢杆菌冻干保护剂配方

为制备羊源解淀粉芽孢杆菌fsznc-06菌.剂,采用响应面法,分析优化冻干保护剂配方,从离心条件、保护剂筛选与复配、稳定性检测等方面探究对菌体存活率的影响.结果表明,最佳离心条件为6000 r/min离心10 min,优化后的冻干保护剂配方为丙三醇(3.102 g/100 mL)、蔗糖(2.926 g/100 mL)和葡萄糖(7.096 g/100 mL),在该条件下解淀粉芽孢杆菌存活率达到96.47%,与理论预测值接近.冻干菌剂在4℃条件下贮存稳定性更高,保藏180天后的存活率约为66.30%,说明响应面法可用于优化解淀粉芽孢杆菌冻干保护剂.