探讨新冠病毒感染疫情下应激性失眠的中医治疗思路

目前,新型冠状病毒肺炎疫情仍在持续,疫情的严防严控是当前最重要的工作。此次疫情中,应激性失眠人群不容忽视。应激性失眠患者女性居多,睡眠障碍发生前有应激事件,脱离应激原后,仍有部分人群未及时干预而发展为慢性失眠。应激性失眠属于中医“不寐”的范畴,病因多是情志不遂,责之于肝郁。治疗以从肝论治为基础,疏肝类方剂不仅可以调节神经递质以提升睡眠质量,还可通过下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴改善应激状态;同时注重中医情志疗法,阳虚者酌加温补阳气之品,充分发挥中医药特色,以期标本兼治。

中医临床证据的转化策略——决策辅助工具的研制

目的:介绍决策辅助工具的研制方法与步骤。方法:首先,成立课题组,制订计划书;第2步,采用调查研究的方法评价患者的决策需求;第3步,确定理论框架及目标用户;第4步,针对临床问题组织内容版块,应用文献调研及系统评价的方法形成背景信息与干预措施风险效益比,同时匹配患者价值观及测试知情决策程度。第5步,修订工具。结果:研制出冠心病心绞痛患者用药决策辅助工具。结论:知识转化是桥接研究证据产出与循证临床实践的关键环节。决策工具的研制为科学有效地转化与利用中医临床研究数据提供思路。

临床实践指南实施性促进研究之五:中医/中西医结合临床实践指南与专家共识的实施性评价

目的 通过指南实施性评价工具评价国内外已发表的中医/中西医结合临床指南与专家共识的实施性质量,了解中医/中西医结合临床指南与专家共识的实施性,为促进中医/中西医指南的实施与推广提供参考。方法 计算机检索中国知网(CNKI)、万方(WanFang Data)、PubMed、医脉通,搜集中医/中西医结合原创指南/共识。应用指南实施性评价工具对纳入的中医/中西医指南进行实施性评价。结果 共纳入指南/共识231部,其中指南119部、共识112部。总体来看,中医/中西医结合指南/共识的实施性较低,大部分指南/共识的实施性质量属于低等级(90.91%)。结论 我国中医/中西医临床实践指南/专家共识的实施性仍有待提高,将实施科学纳入指南制订过程,并从源头开始管理和引导,优化指南内容呈现与传播策略,可促进指南/共识的实施与应用。

恶性淋巴瘤中医规范化诊治探讨

中医药在恶性淋巴瘤的治疗中发挥着重要作用,但目前仍存在缺乏有广泛共识的中医诊疗指南及规范,临床研究总体水平和转化能力有待提高等问题。本文通过分析上述问题的原因,提出初步解决办法,即以总结证侯要素、规范基础证型、减毒增效为切入点,对疾病的中医证候要素、证候诊断标准、证型演变规律、证候分布规律、治法及用药规律进行总结,为淋巴瘤证候的标准化研究及中医临床路径提供基础,并使基础研究成果转化于临床实践,从而形成恶性淋巴瘤的中医规范化诊治指南,探索中医规范化诊治思路。

三七总皂苷拮抗Nogo-A抑制神经细胞生长作用实验研究

目的:观察三七总皂苷对Nogo-A抑制神经细胞生长的拮抗作用。方法:选用人神经细胞系SHSY5Y细胞,采用Nogo-A(20×10-3μmol·L-1)对细胞产生抑制作用的方法,将细胞分为正常对照组,Nogo-A组,三七总皂苷大、小剂量组,Nogo-A+三七总皂苷大、小剂量组,维甲酸(retinoic acid,RA)组。用CCK-8法于加药后不同时间点检测细胞活力;并在倒置相差显微镜下观察加药后72 h的SH-SY5Y细胞的形态及轴突生长情况。结果:Nogo-A组对细胞活性及轴突生长产生明显抑制,胞体皱缩、变圆,突起减少,部分细胞漂浮于培养基中,而Nogo-A+三七总皂苷大、小剂量组细胞活性明显升高,细胞轴突伸长,仅有少量细胞胞体皱缩,细胞轮廓清晰,贴壁良好。且Nogo-A+三七总皂苷大剂量组细胞活性及轴突生长阳性细胞百分率高于Nogo-A+三七总皂苷小剂量组(P<0.05)。结论:三七总皂苷可以起到拮抗Nogo-A对神经细胞生长的抑制作用,促进轴突的生长,并存在一定的量效关系。

临床实践指南实施性促进研究之四:中医/中西医结合指南知识图谱知识抽取、存储与实例展示

本研究基于中医诊疗特点和中医临床指南特点,以《冠心病稳定型心绞痛中医诊疗指南》为例构建中医/中西医临床指南知识图谱,进一步检验知识图谱技术应用于中医/中西医指南领域的可操作性和合理性。构建流程主要包括:根据概念层及数据层设计,从指南中抽取实体与关系、整理成实体库与三元组关系库进行知识导入、利用Neo4j进行知识存储,并检索验证知识图谱的正确性,完成可视化展示。该临床指南知识图谱的构建思路也可为其他疾病中医/中西医结合临床指南的知识图谱建构提供参考。

临床实践指南实施性促进研究之三:中医/中西医结合指南知识图谱框架设计

临床实践指南存在的意义在于它的实施性。然而,目前指南的实施存在诸多问题,临床证据转化存在瓶颈。知识图谱技术的引入为指南智能化提供了坚实的基础,为解决指南实施问题提供了良好的手段。中医/中西医结合体现了我国医疗体系的特色。本研究基于心血管疾病中医/中西医结合诊疗现状及相关指南实施存在的问题,明确心血管疾病中医/中西医结合诊疗临床指南的知识图谱构建目标,据此设计符合专业认知与实际应用需求的知识图谱框架,包括解析指南内容范围、梳理指南内容模块、归纳指南知识结构、设计概念结构表和实体语义关系表。本文提出的中医/中西医指南知识图谱框架设计为指南数字化、智能化提供了基础,有利于推动指南的实施与传播。

基于张从正情志疗法探讨失眠的治疗思路

失眠与情志病以形神一体观为理论指导,二者互为因果,均存在神经—内分泌—免疫网络调节紊乱。张从正在继承《内经》的情志理论的基础上,结合自己的经验,扩展了情志相胜、习以平惊、移情易性等多种情志疗法,对失眠的治疗具有重要的指导意义。张从正的情志疗法虽然效如桴鼓,但有些方法在临床使用时,当把握好时机和尺度,不可盲目照搬使用。在日后的研究中,应将情志疗法标准化,弥补现代医学治疗失眠的短板。

规范中医药临床研究方案内容2018声明:建议、说明与详述

中医学是古老的医学体系之一,但临床试验质量的参差不一限制了其被广泛接受。2013年出版的规范临床研究方案内容声明(Standard Protocol Items:Recommendations for Interventional Trials SPIRIT 2013声明)确立了运作临床试验的规范,从而保证结果准确可靠。由于中医药特殊的理论体系和干预措施特征,中医临床研究直接应用SPIRIT 2013声明存在诸多问题。因此,本文对原始SPIRIT 2013声明进行了中医药扩展。由于中药复方、针刺和灸法是中医药临床实践中最常用且最具代表性的三项干预措施,执行工作组决定SPIRIT-TCM扩展声明应基于此三项干预措施开发。邀请中医药领域的专家,开展三轮Delphi共识调研。执行工作组鼓励所有参与专家提出针对预设条目的意见,并建议新的扩展条目。SPIRIT-TCM扩展声明的条目清单基于共识调研的反馈进行了修改,最终经由一次共识会议定稿了SPIRIT-TCM扩展声明的内容。工作组修订了SPIRIT 2013原始条目中的7项条目,即"题目"、"背景和理念"、"目的"、"合格标准"、"干预措施"、"结局指标"和"数据收集方法"。扩展内容引入了中医学中证候的概念和三项主要的中医药干预措施,同时匹配了实例及说明。SPIRIT-TCM扩展声明为研究者设计高质量的临床试验提供了依据。其原则的广泛传播和应用将有助于持续推进中医药在医疗健康实践的国际化应用。

稳心颗粒调节心肌梗死大鼠心肌缝隙连接蛋白43表达及自噬的研究

目的:探讨稳心颗粒对心肌梗死大鼠心肌缝隙连接蛋白43表达及自噬水平变化的影响。方法:通过心脏左冠状动脉前降支结扎法构建心肌梗死大鼠模型后,随机分为模型组、稳心颗粒低剂量组、稳心颗粒高剂量组及美托洛尔组,连续给药4周,另设正常组作为空白对照,每组8只大鼠。超声心动图检测各组大鼠左室短轴收缩末期前壁厚度(LVAWs)、左室舒张末期前壁厚度(LVAWd)、左室收缩末期内径(LVIDs)、左室舒张末期内径(LVIDd)以及左室射血分数(LVEF);心脏生理电刺激检测各组大鼠的心室颤动阈值;苏木精-伊红(HE)染色观察心脏组织病理学改变;采用免疫组织化学染色及蛋白免疫印迹法检测心肌缝隙连接蛋白43(CX43)、自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、酵母自噬相关基因6哺乳动物同源体(Beclin1)、P62蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠LVAWs、LVAWd、LVEF降低,LVIDs、LVIDd升高(P<0.01);与模型组比较,稳心颗粒低剂量组、稳心颗粒高剂量组、美托洛尔组LVAWs、LVAWd、LVEF升高,LVIDs、LVIDd降低(P<0.05或P<0.01)。模型组大鼠心室颤动阈值明显低于正常组(P<0.01);与模型组比较,稳心颗粒低剂量组、稳心颗粒高剂量组、美托洛尔组心室颤动阈值有所增高(P<0.01)。与正常组比较,模型组LC3、Becli1蛋白平均光密度值明显增加,CX43蛋白平均光密度明显降低(P<0.01);与模型组比较,稳心颗粒高剂量组、美托洛尔组自噬正相关蛋白LC3、Beclin1平均光密度值均明显降低,CX43蛋白平均光密度值增加(P<0.01)。与正常组比较,模型组自噬正相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1表达增加,自噬负相关蛋白P62表达以及CX43蛋白表达降低(P<0.05);与模型组比较,稳心颗粒低剂量组Beclin1蛋白表达明显减少,P62蛋白表达明显升高(P<0.05),稳心颗粒高剂量组及美托洛尔组LC3Ⅱ、Beclin1蛋白表达明显降低,P62及CX43蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:稳心颗粒可改善心肌梗死大鼠的心功能并预防心律失常,其机制与调节心脏自噬水平和缝隙连接蛋白43表达有关。

清热消瘕方延缓糖尿病肾脏病大鼠肾损伤作用机制

目的探讨“肾络癥瘕”病机指导下的清热消瘕方对糖尿病肾脏病(DKD)大鼠肾损伤的保护作用及相关潜在机制。方法将24只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、清热消瘕方组和缬沙坦组,每组6只。除假手术组外,其余组大鼠以单侧肾切除联合链脲佐菌素二联法构建DKD模型。造模成功后,清热消瘕方组给予清热消瘕方颗粒剂10.2 g/(kg·d)灌胃,缬沙坦组给予缬沙坦8 mg/(kg·d)灌胃,假手术组和模型组给予等量蒸馏水灌胃,均连续灌胃16周。比较各组大鼠一般情况、体重、肾重体重比、肾功能相关指标、血糖及血脂水平,HE、PAS、Masson染色观察各组大鼠肾脏病理形态,免疫组化染色观察各组大鼠肾脏组织中谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11(xCT)表达情况。结果与假手术组比较,模型组大鼠体重和肾脏组织中GPX4、xCT阳性表达面积百分比均明显降低(P均<0.05),肾重体重比、24 h尿蛋白总量、血尿素氮、血糖、血清胆固醇和三酰甘油水平均明显升高(P均<0.05);肾脏肾小球体积增大,肾小管上皮细胞广泛空泡变性坏死,肾小球硬化、纤维化改变明显。与模型组比较,清热消瘕方组大鼠肾脏组织中GPX4、xCT阳性表达面积百分比均明显升高(P均<0.05),肾重体重比、24 h尿蛋白总量、血尿素氮、血清胆固醇水平均明显降低(P均<0.05);肾小球系膜基质增生减少,纤维化程度有所缓解。结论清热消瘕方可有效减轻DKD肾损伤和上调肾脏GPX4、xCT表达,该方可能通过调控铁死亡延缓DKD的进展。

基于气血与脏腑理论分期论治缺血性脑血管病

气血和脏腑理论被广泛应用于多种临床疾病的治疗中。缺血性脑血管病各期病机演变与肝脾肾功能密切相关,从脏腑立论,本病根本病机是肝肾亏虚、脑窍失养,发病关键是肝失疏泄、气机逆乱,病理基础是脾虚失运、痰瘀内生。该病风、火、痰、瘀、虚各证候要素的变化又与气血的动态变化密不可分,故从气血立论,其病机又可概括为气血逆乱和气虚血瘀。本文基于气血和脏腑理论认为,缺血性脑血管病的治疗需结合气血与脏腑辨证,急性期急则治标,宜疏肝、清肝、平肝兼破血逐瘀;恢复期标本兼治,宜调肝健脾兼活血化瘀;后遗症期治病求本,宜补肝肾、健脾兼补气活血化瘀。

新型脊髓完全横断缺损模型大鼠的建立

背景:大鼠脊髓完全性横断模型是研究神经组织工程的常用模型,使用既往造模方法横断脊髓后,无法保证断端间隙长度的相对统一,以致无法客观评价各种治疗方法或组织工程材料的效果。目的:采用自制的双刃显微剪刀建立大鼠脊髓完全横断缺损模型,并通过与常规造模方法比较,探索这种新模型的可行性。方法:成年雌性SD大鼠42只,随机分为A组(n=6)、B组(n=18)和C组(n=18),A组仅行椎板切除;B组用尖刀在已显露脊髓的中间位置横向切断脊髓,刀尖要触及椎管前壁和侧壁骨面,反复切割,制备脊髓完全横断模型;C组采用自制双刃显微剪刀制备脊髓完全横断模型,用一钝头小钩将手术缝线从已显露脊髓的腹侧穿到对侧,轻微抬起脊髓,用双刃显微剪刀将脊髓、硬脊膜及血管一次性全部切除。结果与结论:1B和C组大鼠造模后1周,后肢完全性瘫痪,BBB评分接近,但脊髓残端间距离有显著差异。2造模后4周,两组大鼠后肢功能有不同程度恢复,但BBB评分差异无显著性意义。3造模后8周,两组大鼠后肢运动功能评分差异有显著性意义;生物素化葡萄糖胺示踪显示:B组大鼠损伤尾侧可观察到少量被标记的轴突纤维,而C组大鼠尾侧无被标记的神经纤维,说明脊髓横断完全。4以上结果提示:使用自制的双刃显微剪刀造模方法可有效消除个体差异,有利于治疗效果的量化分析和研究对比。

脑病痰浊病机源流探讨

中医脑病是中风、眩晕、痴呆等多种疾病的总称,发病机制复杂多样,其中痰浊作为一种重要的致病因素与脑病的发生、发展、转归与预后关系密切。故从历史文献、临床研究、实验研究等诸方面总结痰浊病机在脑病相关疾病中的作用机制,为进一步挖掘中医脑病的病机,提高对疾病的认识、创新治疗方法、提高临床疗效提供依据。

基于文献探讨中医证候演变规律研究的设计形式和要素

证候是中医诊疗的核心内容,也是中医临床疗效评价的特色元素。中医证候的变化规律是证候研究的重要组成部分,常依托于临床观察、试验方法进行,其中合理的设计是有效发掘规律的前提。本研究采用文献调查方法,回顾现有的证候变化规律研究,从发表年份、研究的临床特征、证候的表现形式、研究的设计方法和数据处理方法5个方面,分析证候变化规律的研究现状;在此基础上总结出证候变化规律评价的基本形式,分析证候变化规律研究的设计要素,以期能为相关的中医证候研究提供具有一定适应性的规范化参考。

中风患者头面部红外热像图特征初探

目的:使用红外热成像技术将人体体表温度直观成像,通过观测异常温区的形态、范围及温差的变化,为中风病的筛查预警及临床疗效评价提供新的量化及可视化指标。方法:采集20例中风患者与50例健康对照组头面部红外热像图并进行初步分析。结果:中风组两侧额头及面颊部红外热像图分布不均匀,两侧热图不对称;中风组两侧额头温度差及两侧面颊部温度差较健康对照组均存在明显差异,健康对照组左右额头平均温度差0.0875℃,左右面颊部平均温度差0.225℃;中风组左右额头平均温度差0.2613℃,左右面颊部平均温度差0.2613℃,差异有统计学意义。结论:本研究发现中风患者头面部红外热图的分布特征与健康人存在明显差异,为中风患者的病情评估及疗效评价提供了另外一种可能的技术与方法。

三七总皂苷对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞血管细胞黏附分子1表达的影响

背景:氧化低密度脂蛋白能诱导血管内皮细胞活化和黏附分子表达,在动脉粥样硬化形成早期起重要作用。三七总皂苷在心血管系统方面具有保护血管内皮细胞、显著改善动脉粥样硬化病变程度的药理作用。目的:验证三七总皂苷对氧化型低密度脂蛋白损伤内皮细胞后血管细胞黏附分子1的表达及与人单核细胞黏附的影响。设计、时间及地点:体外实验,分组对照,于2007-03/2008-05在北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点实验室完成。材料:原代人脐静脉内皮细胞为美国Cascade Biologics公司产品;三七总皂苷(血塞通冻干粉针)为黑龙江珍宝岛制药有限公司产品,成分为三七总皂苷,批号:20040207。方法:以培养原代人脐静脉内皮细胞作为靶细胞,用氧化型低密度脂蛋白造成人脐静脉内皮细胞损伤模型。将培养的人脐静脉内皮细胞分为5组:氧化型低密度脂蛋白组(100mg/L)、氧化型低密度脂蛋白+三七总皂苷组(终浓度分别为200,100,50mg/L)、正常对照组。主要观察指标:光镜下观察细胞形态变化,四甲基偶氮唑盐法检测细胞活性;采用蛋白定量法检测人脐静脉内皮细胞与单核细胞的黏附率;用流式细胞仪测定人脐静脉内皮细胞的血管细胞黏附分子1的蛋白表达。结果:氧化型低密度脂蛋白作用人脐静脉内皮细胞后12,24h时,人脐静脉内皮细胞损伤明显,细胞活性显著降低,人单核细胞与人脐静脉内皮细胞的黏附率显著升高,人脐静脉内皮细胞的血管细胞黏附分子1的蛋白表达水平也均明显升高,均明显高于正常对照组(P<0.05,P<0.01),而三七总皂苷能使氧化型低密度脂蛋白损伤的人脐静脉内皮细胞形态趋于正常,活性增强,并明显降低人单核细胞与人脐静脉内皮细胞的黏附率,以及显著降低血管细胞黏附分子1的蛋白的表达水平,与氧化型低密度脂蛋白组相比均有显著性差异(P<0.05,P<0.01),这种作用随着剂量的增加而增强。结论:三七总皂苷能通过下调血管细胞黏附分子1的表达抑制单核-血管内皮细胞黏附,从而发挥对血管内皮细胞的保护作用,这可能是其治疗动脉硬化闭塞症的机制之一。

新加良附方抑制人胃癌细胞增殖的分子机制

目的:探讨新加良附方及其主要成分薯蓣皂苷药物血清对人胃癌细胞BGC-823的增殖抑制作用及可能的作用机制。方法:制备新加良附方及薯蓣皂苷药物血清,并作用于胃癌细胞株BGC-823,使用MTS方法检测细胞增殖抑制率;采取实时PCR方法观察新加良附方及薯蓣皂苷药物血清对人胃癌细胞BGC-823中caspase-3及p53表达的影响;采取实时PCR方法检测胃癌细胞中miR-34a表达水平。结果:新加良附方药物血清及薯蓣皂苷药物血清对胃癌细胞BGC-823有明显的增殖抑制作用,并且其作用与时间正相关。新加良附方对胃癌细胞的增殖抑制作用在48 h、72 h高于其主要成分薯蓣皂苷;人胃癌BGC-823细胞中caspase-3的表达明显低于其在正常胃黏膜上皮细胞GES-1中的水平,p53基因表达水平高于正常GES-1细胞中的p53表达水平。新加良附方药物血清及薯蓣皂苷药物血清作用于BGC-823细胞后其caspase-3表达水平均明显上升,且随着时间增加其表达量升高;p53基因表达水平下降,并且与时间负相关。新加良附方与其主要成分薯蓣皂苷相比较,两者对caspase-3、p53的调控作用无明显差异;胃癌细胞中miR-34a表达水平高于正常胃黏膜上皮细胞GES-1。结论:新加良附方及其主要成分薯蓣皂苷可以显著抑制胃癌BGC-823细胞的生长,新加良附方对胃癌细胞的抑制作用高于其主要成分薯蓣皂苷。新加良附方及薯蓣皂苷抑制胃癌细胞增殖作用可能与增加凋亡相关蛋白caspase-3表达,抑制突变型p53表达相关。miR-34a可能发挥癌基因的作用,应明确其作用并进行下一步研究。

内皮素与神经系统疾病关系的研究进展

血管内皮细胞合成并释放一种具有强烈收缩血管作用的物质称为内皮素,其主要作为一种体液性介质参于许多疾病,可作为内皮细胞受损的分子标志物,通过影响血管功能状态来参与心、脑、肺及肾脏疾病的发生,尤其是心脑血管疾病的发病过程[1]。文献总结发现,多种神经系统疾病发病时血清内皮素(ET)水平明显增高,且经治疗后ET水平明显降低,但仍高于正常水平。内皮素在神经系统疾病的发病、病变程度、疾病的进展以及疾病的预后中具有重要的意义。

三七总皂苷对β-淀粉样蛋白42损伤脑微血管内皮细胞ZO-1表达的影响

目的观察三七总皂苷对β-淀粉样蛋白(Aβ)42损伤脑微血管内皮细胞ZO-1表达的影响,为阿尔茨海默病的对因治疗提供新的依据。方法细胞分为正常对照组、模型组和三七总皂苷低、中、高剂量组,37℃、5%CO2培养箱中培养24 h后,采用MTT比色法检测细胞活力,Western blot检测ZO-1蛋白表达。结果 Aβ42刺激后微血管内皮细胞活力降低(P<0.01),ZO-1蛋白表达被抑制(P<0.01);与模型组比较,三七总皂苷低、中、高剂量组微血管内皮细胞活力增加,其中三七总皂苷中、高剂量组增加较为明显,差异有统计学意义(P<0.05),ZO-1蛋白表达增加。结论三七总皂苷通过抑制Aβ42所致微血管内皮细胞活力降低,恢复血脑屏障的部分屏障功能。