基于循证医学背景下名老中医隐性经验研究探讨

名老中医学术思想与临床经验是中医药创新的源泉与动力。由于经验具有难以把握、不易理解的特点,因此如何高效、完整、全面、系统地挖掘名老中医经验中的隐性知识,仍是中医师承教育面临的关键问题。目前名老中医隐性知识传承过程中面临辨证论治研究过程不规范、有效验方转化不足、数据共享存在壁垒等问题,医学循证方法学的引入和数据挖掘技术的应用,有助于“经验”到“证据”的客观量化。引入真实世界研究评价名老中医疗效证据,定性定量研究结合完善评价体系,伞式、篮式研究辅助验方说明书修订,开展技术规范化研究促进有效技术推广等可以进一步挖掘和推广名老中医经验。此外,加强病案质量控制、医案记录数据质量规范化管理、完善真实世界临床研究隐私保护和伦理制度以及数据共享和知识产权保护制度将有助于促进名老中医经验传承。在将来,名老中医经验传承的工作重点仍应围绕凝练理论、规范操作、转化验方等切实实现传承精华,守正创新,丰富和发展中医学术。

1069例冠心病患者冠状动脉造影与中医证候特点

目的:研究冠心病冠状动脉造影和中医证候特点。方法:用临床流行病学方法调查1069例冠心病患者,按发病年龄分青年组(82例,年龄≤45岁)和中老年组(987例,年龄>45岁),分析两组患者临床资料及冠状动脉病变和中医证候特点。结果:青年组男性比例、甘油三酯、总胆固醇、吸烟人数、发生急性心肌梗死比例和冠心病家族史显著高于中老年组(P<0.05)。中老年组伴发高血压和糖尿病的病例高于青年组(P<0.05)。中老年组冠脉造影检查,左主干、回旋支和多支病变的发病率显著高于青年组(P<0.05)。青年组单支病变和双支病变的发病率显著高于中老年组(P<0.05)。青年冠心病组中气滞、痰浊的比例显著高于中老年组(P<0.05),而中老年组的寒凝、阳虚、阴虚和肾虚的比例显著高于青年组(P<0.05)。结论:青年冠心病心绞痛中医证候和冠脉病变有自身的特点而区别于老年冠心病。

炎症因子对再生障碍性贫血免疫机制的影响研究进展

再生障碍性贫血(AA)的发病机制复杂,与造血干细胞缺陷、骨髓微环境异常、免疫功能障碍、体细胞突变等有关,而免疫机制在其中起着重要作用。本文从调节性T细胞减少、凋亡相关因子/凋亡相关因子配体信号通路导致造血干细胞减少及炎症因子刺激微RNAs诱导靶基因表达异常与调节性T细胞功能缺失等方面综述AA的发病机制,以期为临床治疗提供思路与方法。

实验性偏头痛动物模型效度评价与中药新药研究的探讨

动物模型是连接实验室研究与临床应用的桥梁,不同的实验性偏头痛动物模型具有不同的效度,如:皮层扩散抑制(CSD)模型较好地解释了偏头痛的先兆,具有建构效度;三叉神经血管(TVS)相关模型是抗偏头痛药物作用和疗效机理评价的主要模型,具有较好的建构效度和预测效度;硝酸甘油(GTN)模型建立了较完整的行为学评价体系,有着较好的表面效度。在传统中医理论指导下,中药新药研究应结合模型自身特点综合评价药物的疗效,预防性作用中药研究可选用CSD模型和GTN模型,治疗性作用中药研究可选用TVS相关模型和GTN模型。选择恰当的动物模型有助于中医药治疗偏头痛机理的阐述,可为中药新药开发提供依据。

瞬时感受器电位离子通道V亚家族成员4基因敲除对小鼠血脂和脂肪组织的影响

目的探讨瞬时感受器电位离子通道V亚家族成员4(TRPV4)基因敲除对小鼠血脂水平以及脂肪组织的影响。方法观察野生型C57BL/6J小鼠和TRPV4基因敲除(TRPV4^(-/-))小鼠在高脂饮食饲养后体质量、脂肪质量、血脂水平变化以及肩胛间棕色脂肪组织(iBAT)、腹股沟白色脂肪组织(iWAT)及附睾白色脂肪组织(eWAT)的激活情况;利用3T3-L1脂肪细胞观察TRPV4激动剂对脂肪棕色化基因PR结构域蛋白16(PRDM16)表达的影响。结果在高脂饮食喂养16周后,TRPV4^(-/-)小鼠的血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)均较野生型小鼠升高,差异有统计学意义(P<0.05);体质量和脂肪组织质量均较野生型小鼠减轻,但差异无统计学意义(P>0.05),TRPV4^(-/-)小鼠脂肪组织呈棕色化趋势较野生型小鼠明显;加入TRPV4激动剂后,3T3-L1脂肪细胞PRDM16基因和蛋白表达水平上调(P<0.05)。结论TRPV4基因敲除能够升高血脂水平并促进脂肪组织棕色化。

从六郁论治早期高血压肾损害

高血压肾损害已经成为引起终末期肾病的主要原因之一,中医药治疗高血压肾损害颇有优势,对延缓病情的进展、提高患者的生活质量,有很好的疗效。长期的临床实践表明,气、血、湿、痰、热、食等六郁滞在高血压肾病早期发病和进展的过程中占据了重要的作用,气郁、食郁为发病基础,痰郁、湿郁、热郁为主要的致病因素,血瘀为贯穿始终的核心病机。在临床上从六郁论治早期高血压肾损害,治疗“以通为用”,处方选用越鞠丸加减。在把握“郁”的基本病机的同时,判断正邪虚实轻重,注重补虚与开郁并行,维持肾脏聚散平衡的状态,灵活加减用药,扶正固本以助元气、调气机以治郁结、通利三焦以治痰湿、通络消癥以治血瘀。

葛根素调节血管平滑肌细胞凋亡相关基因在斑块组织中表达的研究

目的 差异筛选葛根素促进VSMC凋亡相关基因 ,观察其在动脉粥样硬化组织中的表达 ,探讨葛根素防治动脉粥样硬化的可能机制。方法 葛根素诱导培养的兔血管平滑肌细胞凋亡 ,提取总RNA ,荧光标记差异显示反转录 PCR法筛选差异基因片段 ,克隆测序及同源性分析 ,Northern印记杂交鉴定 ,组织原位杂交观察该基因在兔斑块组织中的表达水平。结果 差异筛选出全长 733bp的基因片断与兔葡萄糖调节蛋白 94基因高度同源 ,Northern印记杂交显示该基因表达量随着葛根素浓度而增加 ;兔斑块组织原位杂交显示该基因片段在动脉粥样硬化斑块组织中表达水平增高。结论 ①证实葡萄糖调节蛋白 94基因在葛根素促进增殖血管平滑肌细胞凋亡过程中表达增高 ,可能是葛根素作用靶点之一 ;②证实该基因片段在动脉斑块细胞质中表达增高 ,提示如能上调该基因促进需管平滑肌细胞凋亡 ,将有可能对动脉粥样硬化治疗产生一定作用。

心肌缺血动物模型气虚血瘀证的评价

目的:评价心肌缺血大鼠的证候属性。方法:采用左冠状动脉前降支结扎方法制作大鼠心肌缺血模型,通过观察和检测大鼠宏观状态、心电图和超声心动图变化,对模型进行证候的评价。结果:心肌缺血模型组与假手术组相比,体质量下降、游泳力竭时间减少(P<0.05),体温变化不显著,I、avL和胸部导联出现异常Q波(P<0.01),心率减慢(P<0.05),PR间期延长(P<0.05),室间隔收缩末期厚度(inter-ventricular septum end-stolic thickness,IVSTs)和室间隔舒张末期厚度(inter-ventricular septum end-diastolic thickness,IVSTd)变薄(P<0.01)、左室收缩末期内径left ventricular end-stolic diameter(LVEDs)和左室舒张末期内径(left ventricular end-diastolic diameter,LVEDd)增大(P<0.01),左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)和短轴缩窄率(fractional shortening,FS)下降(P<0.01),左室收缩末期后壁(left ventricular posterior wall end-stolic thickness,LVPWTs)和左室舒张末期后壁厚度(left ventricular posterior wall end-diastolic thickness,LVPWTd)无变化。结论:将宏观状态、心电图和超声心动图的变化结合,可以很好的评价心肌缺血大鼠气虚血瘀证。

黄芪卫矛合剂对糖尿病肾病大鼠血清LN和Ⅳ型胶原含量影响

目的:观察黄芪卫矛合剂对实验性糖尿病肾病大鼠血清Ⅳ型胶原和LN含量的影响。方法:将雄性SD大鼠随机分4组,假手术组、模型组、中药组和西药组,后3组选用左肾摘除及尾静脉注射链脲佐菌素方法造成糖尿病肾病大鼠模型。中药组应用黄芪卫矛合剂灌胃,西药组予氯沙坦灌胃,假手术组和模型组予等量纯净水灌胃,共进行12周。实验结束,检测各组大鼠血清LN和Ⅳ型胶原含量。结果:黄芪卫矛合剂组可降低大鼠血清Ⅳ型胶原,且优于西药对照组,两组均能降低LN含量,无显著差异。结论:黄芪卫矛合剂能减少肾小球合成和分泌LN和Ⅳ型胶原是其防治DN的作用机制之一。

气虚血瘀证大鼠模型缺血心肌蛋白质组学研究

目的:筛选气虚血瘀证特征性的差异蛋白质或蛋白质群。方法:采用左冠状动脉前降支结扎法制作气虚血瘀证模型,术后32d,取出气虚血瘀证组和假手术组心肌组织,进行双相电泳,并对差异蛋白进行质谱分析。结果:气虚血瘀证组与假手术组相比,有18个差异蛋白,其中4个表达上调,14个表达下调,对其中差异最显著的10个蛋白进行了肽质指纹图谱分析,其中8个与NCBInr数据库中相应的蛋白质覆盖率高,下调的为Malate Dehydrogenase 1,NAD(苹果酸脱氢酶)、NADH dehydrogenase Fe-S protein 8(NADH脱氢酶,铁硫蛋白)、myosin,light polypeptide 3(肌浆球蛋白轻链)、Cu-Zn superoxide dismutase(铜锌超氧化物歧化酶)、Gpx1 protein(谷胱甘肽过氧化物酶);上调的为alpha B-crystallin(αB-晶状体蛋白)、Protease(prosome,macropain)28subunit(蛋白酶前体或α亚基)、Tpi1 protein(磷酸丙糖异构酶)。结论:气虚血瘀证实质可能与能量代谢障碍、氧化损伤和应激反应有关。

基于PI3K/Akt信号通路探索益气活血祛风通络法治疗糖尿病肾病的作用机制

目的基于PI3K/Akt信号通路探索益气活血祛风通络法治疗糖尿病肾病的分子机制。方法 40只GK大鼠,随机分为模型组、假手术组、益气活血组、祛风通络组、益气活血祛风通络(全方)组,每组8只。糖尿病肾病模型通过高脂高糖喂养加单肾切除术复制。益气活血组、祛风通络组、全方组分别给予益气活血颗粒、祛风通络颗粒、益气活血祛风通络颗粒,模型组、假手术组给予纯净水。干预8周,观察大鼠在干预后肾脏的病理改变以及24小时尿蛋白变化,同时肾脏组织的pPI3K、p-Akt和PTEN的表达情况采用Western blotting以及免疫组化法检测,PI3K mRNA、Akt mRNA以及PTEN mRNA的表达水平采用RT-PCR法检测。结果 HE染色结果显示,中药干预的大鼠肾小管上皮细胞空泡变性程度、纤维化以及肾小球硬化比模型组以及假手术组要轻,且在肾间质纤维化方面,全方组要好于益气活血组以及祛风通络组;PASM染色和Masson染色阳性率均显示益气活血组、祛风通络组、全方组阳性率明显低于模型组(P<0.01),但全方组阳性率与益气活血组以及祛风通络组无统计学差异(P>0.05);益气活血组、祛风通络组、全方组的24小时尿蛋白在中药干预后明显减少,而且与模型组对比具有显著性的差异(P<0.01)。Western blotting结果显示,中药干预的三组pPI3K、p-Akt的表达明显高于模型组(P<0.01),而PTEN的表达显著低于模型组(P<0.01)。免疫组化结果显示,p-PI3K、p-Akt在药物干预的三组表达显著低于模型组(P<0.05);PTEN在祛风通络组以及全方组的表达显著低于模型组(P<0.01),在活血化瘀组表达水平与模型组差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR结果显示PI3K mRNA、Akt mRNA在中药干预的三组均明显低于模型组(P<0.05),而PTEN mRNA的表达水平则显著高于模型组(P<0.01)。结论益气活血、祛风通络法治疗糖尿病肾病均可以起到降低蛋白尿、减轻肾间质纤维化以及延缓肾小球硬化的作用,二者结合在延缓肾间质纤维化方面效果更好,三者作用分子机制均可能与抑制PI3K/Akt信号通路有关,且祛风通络法及益气活血祛风通络法抑制效果要略强于单独益气活血法。

葛根素能诱导血管平滑肌细胞凋亡部分相关基因差异表达

为观察葛根素诱导兔血管平滑肌细胞凋亡过程中相关基因mRNA的差异表达 ,探讨葛根素促进血管平滑肌细胞凋亡的分子机制。应用葛根素体外诱导兔血管平滑肌细胞凋亡模型和mRNA差异显示技术观察葛根素诱导与正常细胞间基因差异表达 ,将葛根素作用后高表达的cDNA片段克隆、测序 ,与GeneBank进行同源性分析 ,并用32 P标记探针 ,再与不同浓度葛根素作用的血管平滑肌细胞总RNA进行Northern印迹分析。结果发现 ,1、差异显示图谱出现一些仅在葛根素组高表达而在对照组无表达的cDNA片断。2、将其序列与GeneBank进行同源性比较 ,证实其中 3个序列均与兔葡萄糖调节蛋白 94基因高度同源。3、Northern杂交证实兔葡萄糖调节蛋白 94基因在葛根素作用的血管平滑肌细胞中高表达 ,与差异显示图谱一致。4、灰度扫描分析 ,兔葡萄糖调节蛋白 94基因在血管平滑肌细胞中表达量与葛根素浓度成正比。上述结果提示 ,葛根素诱导血管平滑肌细胞凋亡过程中上调了兔葡萄糖调节蛋白 94基因表达 。

血管平滑肌细胞凋亡与动脉粥样硬化及其中药防治

细胞凋亡在动脉粥样硬化形成的发病和治疗中具有重要意义。随着对动脉粥样硬化研究的深入 ,发现血管平滑肌细胞增生是其中重要因素。本文着重论述血管平滑肌细胞凋亡在动脉粥样硬化疾病中的作用 ,以及目前应用中药单体及中药复方调节血管平滑肌细胞凋亡的研究进展 ,同时对中医药防治动脉粥样硬化的前景进行展望。

醛糖还原酶抑制剂对糖尿病大鼠肾小球蛋白激酶C活性的影响

目的研究糖尿病大鼠肾小球蛋白激酶C活性的变化及醛糖还原酶抑制剂Sorbinil对它的影响。方法采用腹腔内注射STZ法制作糖尿病大鼠模型,将大鼠分为模型组、Sorbinil组、糖适平+洛汀新组和正常对照组。8周后处死大鼠,分离肾小球,分别测定各组肾小球细胞浆和细胞膜PKC活性。结果糖尿病模型组细胞浆PKC活性显著降低,细胞膜PKC活性显著升高。用两组西药治疗后,洛汀新+糖适平组无明显改善,而Sorbinil组可显著提高细胞浆PKC活性、降低细胞膜PKC活性。结论Sorbinil可通过改善多元醇代谢而降低PKC活性,同时,亦或存在其它途径如直接对PKC的抑制作用等等。Sorbinil通过调节多元醇代谢等途径间接或直接降低PKC活性,是其治疗糖尿病肾病的作用机制之一。

促红细胞生成素对慢性肾衰竭患者血树突状细胞和T细胞亚群的影响

促红细胞生成素(EPO)在治疗慢性肾衰竭(CRF)贫血的同时，还能增强吞噬细胞的活性，影响细胞免疫和体液免疫功能。血树突状细胞(DC)是体内功能最强的抗原递呈细胞，对一些重大疾病的治疗起重要作用。本文研究CRF患者血DC和T细胞亚群的变化，并探讨EPO对其的影响。

2型糖尿病患者的肠道菌群与阳明、太阴体质相关性分析

目的研究2型糖尿病患者的肠道菌群与阳明胃热、太阴脾虚体质相关性。方法选择符合纳入标准的新发2型糖尿病患者30例和健康者13例,结合《三阴三阳体质辨识量表》体质测评及计算机自动判读,将入组者分为阳明体质2型糖尿组、太阴体质2型糖尿病组、阳明体质健康组、太阴体质健康组,并收集粪便样本。将样本进行16s rDNA V3-4区测序,对四组患者肠道菌群进行Alpha多样性、可操作分类单元(OTUs)聚类、群落结构组成及物种差异分析。采用SPSS 20.0统计软件进行统计分析,进一步对Alpha多样性中的查奥指数(Chao)、艾斯指数(Ace)、多样性香农指数(Shannon)、辛普森指数(Simpson)进行秩和检验,以P<0.05为差异有统计学意义。运用发现高维生物标识和揭示基因组特征的软件LEfSe进行LDA分析,筛选出对样本划分产生显著性差异影响的群落。结果(1)阳明体质2型糖尿病患者、太阴体质2型糖尿病患者与阳明体质健康者、太阴体质健康者各组间菌群丰度Chao、Ace、Shannon、Simpson,无显著统计学差异(P>0.05);(2)四组的OTU相似性较高,但各组均有其特异的OTUs,其中糖尿病组阳明体质组为4个,糖尿病太阴体质组为11个;(3)四组的菌群结构组成是厚壁菌门、放线菌门、拟杆菌门、变形菌门;(4)太阴体质2型糖尿病组有11种显著升高的肠道菌群组分,阳明体质糖尿病组有2种显著升高的肠道菌群组分。阳明体质2型糖尿病患者的主要差异物种以厚壁菌门等为主,太阴体质2型糖尿病患者的主要差异物种以拟杆菌门等为主。结论2型糖尿病患者肠道菌群与阳明、太阴体质具有相关性。阳明、太阴不同体质2型糖尿病患者的肠道菌群存在差异,糖尿病患者肠道菌群变化可能是形成阳明、太阴体质差异的内在因素。

刘伟敬从风-虚-瘀论治肾性血尿思路探析

肾性血尿,即血尿来自肾脏,多指肾小球源性血尿。中医学将其归属于"尿血""溲血""溺血"等范畴。血尿为肾系疾病常见症状之一,是多种急慢性肾脏疾病主要临床表现,IgA肾病尤为多见。在该疾病中,血尿多长期伴随IgA肾病的发生发展过程中,反复发作,迁延难愈。现代医学目前鲜有特效药物,而传统医学对肾性血尿的治疗积累了宝贵经验,认为其基本病机为本虚标实,以脾肾亏虚为本,以风、热、瘀、毒为标,刘伟敬教授结合中医理论及多年的临床实践经验,总结出血尿的关键病因为伏风内扰、瘀血阻滞肾络、脾肾不足等。因此治疗上刘教授提出从风、瘀、虚论治,结合脏腑辨证,以达扶正祛邪,标本同治的目的。

小柴胡汤群方在肾脏病中的临床应用

小柴胡汤是和解少阳,疏利三焦的经典名方。以小柴胡汤为核心药物组成的方剂群被称为“小柴胡汤群方”。少阳枢机功能与肾脏生理病理均密切相关,故临床小柴胡汤群方在肾脏病治疗中被广泛应用。本文对这些方剂的功效特点进行总结,以期指导临床辨证应用。

扶正祛邪方联合更昔洛韦对病毒性脑炎疗效、神经功能与脑血流的作用

目的:探讨扶正祛邪方联合更昔洛韦对病毒性脑炎患者的应用价值。方法:选取2017年12月至2020年9月北京水利医院收治的病毒性脑炎患者142例作为研究对象,随机分为对照组和观察组,每组71例。对照组采用更昔洛韦治疗,观察组采用扶正祛邪方联合更昔洛韦治疗,比照2组临床症状持续时间、血清中神经元烯醇化酶(NSE)、S-100β蛋白、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达,以及脑电图检查结果和脑血流等指标的变化。结果:观察组临床症状持续时间显著短于对照组,2组比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗前,2组患者血清中NSE、S-100β、IL-6、TNF-α水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,观察组血清中NSE、S-100β、IL-6、TNF-α水平显著低于对照组,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。观察组脑电图检查结果显示1级发生率显著高于对照组,2级、3级、4级发生率显著低于对照组,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,2组V S、V m、PI水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,观察组V S、V m、PI水平显著低于对照组,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:扶正祛邪方联合更昔洛韦治疗,能够显著缩短病毒性脑炎患者发热、头晕头疼、呕吐等症状的持续时间,减轻局部炎症反应,维持患者机体免疫功能平衡,改善脑血流状态,值得推广。

培元通脑胶囊对脑缺血低灌注大鼠前额叶葡萄糖代谢的影响

目的探讨培元通脑胶囊对脑缺血大鼠前额叶葡萄糖代谢及行为学变化的影响。方法 60只大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组和培元通脑组,每组15只。除假手术组外其余各组大鼠应用双侧颈总动脉永久性结扎剪断血管的方法制备脑缺血低灌注大鼠模型,在术前及术后即刻观察脑血流灌注量变化情况。应用Morris水迷宫(Morris water maze,MUM)观察脑缺血大鼠在空间探索试验中第一象限路程与总路程比值和游泳速度变化、穿越平台次数比较,反向平台延时任务完成情况比较,应用micro-PET观察大鼠前额叶神经细胞18F-FDG摄取变化情况。结果大鼠双侧颈总动脉结扎术前及术后模型组、尼莫地平组、培元通脑组即刻脑血流灌注量明显下降,与术前比较有统计学差异(P<0.01);模型组脑缺血大鼠游泳速度低于培元通脑组(P<0.05),在NE象限游泳路程与总路程比值低于培元通脑组(P<0.05),撤出水下平台后穿越目标区域的次数明显少于培元通脑组(P<0.05),模型组脑缺血大鼠在反向平台模型组与假手术组比较,逃避潜伏期延长,差异具有统计学意义(P<0.01),而反向平台延时任务中模型组与培元通脑组比较逃避潜伏期延长(P<0.05),前额叶神经细胞18F-FDG标准摄取值培元通脑组大鼠的标准摄取值高于模型组大鼠(P<0.05)。结论培元通脑胶囊通过益肾填精,熄风通络能够填精补髓益脑,改善前额叶神经细胞葡萄糖代谢,改善脑缺血大鼠在水迷宫中的空间参考记忆。