UPLC-Q-TOF-MS结合分子量印迹和质量亏损过滤策略快速筛选并鉴定血竭中黄酮类化学成分

血竭为名贵活血化瘀中药,现有研究表明其药效成分群为黄酮类化合物。血竭中黄酮类化合物化学结构的多样性为其化学成分轮廓深入表征带来了巨大的挑战。为了系统表征血竭化学成分轮廓,该研究首先采集化学成分质谱信息,进一步利用分子量印迹(molecular weight imprinting,MWI)以及质量亏损过滤(mass defect filtering,MDF)方法处理高分辨数据集,实现血竭中黄酮类化合物的快速鉴定。采用UPLC-Q-TOF-MS采集正离子模式下m/z 100~1000质谱数据;根据前期文献报道中的血竭黄酮类化合物,建立[M+H]+质荷比的数据库,以±10×10^(-3)为误差范围构建分子量印迹,快速检索已知黄酮类化合物,并结合MS2数据确证化学结构。通过已知血竭黄酮类化合物建立MDF的“五点筛选框”,获取可能的目标成分,进一步结合诊断离子(DFI)、中性丢失(NL)和质谱裂解规律,推断化学结构。最终从血竭提取物中初步鉴定了70个黄酮类化合物,包括黄烷氧化同系物类5个、黄烷类12个、二氢查尔酮类1个、黄酮二聚体类49个、三聚体类1个以及其他类型2个。该研究阐明了血竭中黄酮类化学成分组成,同时也表明高分辨质谱技术结合MWI与MDF等数据后处理方法可以实现中药化学成分组成的快速表征。

氯化钠诱导白木香悬浮细胞合成苯乙基色酮类成分的LC-MS分析

采用超高效液相色谱-串联四极杆静电场轨道阱质谱(UPLC-Q-Exactive-MS)结合超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱(UPLC-QQQ-MS/MS)对氯化钠诱导的白木香悬浮细胞中苯乙基色酮类成分进行定性和定量分析。UPLC-Q-Exactive-MS和UPLC-QQQ-MS/MS均采用Waters T3色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相分别进行梯度洗脱色谱分离,质谱分析均采用电喷雾正离子模式采集。利用UPLC-Q-Exactive-MS从氯化钠诱导的白木香悬浮细胞样品中鉴定出苯乙基色酮类化合物47个,其中简单苯乙基色酮及其苷22个、四羟基四氢苯乙基色酮10个、三元氧环四氢苯乙基色酮15个。通过UPLC-QQQ-MS/MS技术对氯化钠诱导处理后白木香悬浮细胞中25个苯乙基色酮进行了定量。通过2种液质联用技术快速、高效地对氯化钠诱导白木香悬浮细胞中苯乙基色酮类成分进行定性、定量分析,为利用体外培养等生物技术制备沉香中主要的药效和香味物质苯乙基色酮提供重要参考。