桑叶改善3T3-L1细胞胰岛素抵抗的作用及其机制分析

目的:观察桑叶含药血清对脂肪细胞株3T3-L1胰岛素抵抗(IR)模型葡萄糖消耗量及细胞活力的影响,筛选出桑叶含药血清的最佳浓度,并检测其对炎症因子含量的影响,探讨可能的作用机制。方法:取对数生长期3T3-L1前脂肪细胞,10mg·L^-1胰岛素(Ins),0.25mmol·L^-1地塞米松(DEX),0.5mmol·L^-13-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)诱导48h后,10mg·L^-1 Ins再次诱导48h,待其分化为成熟脂肪细胞后,1μmol·L^-1DEX诱导96h以建立IR细胞模型。桑叶水提物含药血清培养12,24,36,72h后,采用葡萄糖氧化酶法检测桑叶含药血清培养后细胞葡萄糖的消耗量,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测桑叶含药血清培养后IR模型的细胞活力,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测桑叶含药血清对细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的影响,蛋白免疫印迹法(Western blot)测定桑叶含药血清对胰岛素信号通路胰岛素受体(InsR),胰岛素受体底物(IRS),磷酸化IRS1(p-IRS1),葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)蛋白表达的影响。结果:桑叶含药血清可显著提高IR细胞葡萄糖消耗量(P<0.01),增强细胞活力(P<0.01),降低炎症因子TNF-α的含量(P<0.01),调节胰岛素信号通路下游蛋白的表达量(P<0.05,P<0.01)。结论:桑叶可明显改善3T3-L1细胞IR状态,其作用机制可能与抑制TNF-α表达、促进胰岛素信号通路蛋白的表达有关。

RS3型芭蕉芋抗性淀粉的减肥降脂作用及急性毒性分析

目的:评价芭蕉芋RS3型抗性淀粉对肥胖型高脂血症小鼠的减肥降脂作用,并进行安全性评价。方法:KKAy小鼠高脂饲料喂养20周,建立肥胖型高脂血症模型,随机分为模型组,辛伐他汀组(4mg·kg^-1),RS3抗性淀粉高、低剂量组(2,1g·kg^-1),并以维持饲料喂养的小鼠为正常组。给药组分别灌胃相应药物,正常组及模型组给予等量去离子水。8周后,处死小鼠,检测血清中总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及天门冬氨酸氨基转移酶(AST),丙氨酸氨基转氨酶(ALT)的含量,精密称量脂肪质量,计算脂/体比、体脂率及Lee's指数,伊红-苏木素(HE)染色观察肝脏及脂肪组织的病理学变化;采用限量法评价RS3抗性淀粉的安全性,连续观察14d,记录小鼠毒副反应情况。结果:RS3抗性淀粉高剂量能显著降低小鼠体质量、脂肪质量、体脂率、脂/体比、Lee's指数,以及血清中TC,TG,LDL-C,AST,ALT水平(P<0.05)。组织形态学检测显示,给予RS3抗性淀粉可以明显改善肝脏组织的脂肪病变情况,保肝作用明显,可以抑制脂肪细胞膨大,降低小鼠脂肪累积,以高剂量为优;急毒实验小鼠按36g·kg^-1剂量给药后,动物未出现中毒反应及死亡。结论:RS3型芭蕉芋抗性淀粉具有良好的减肥降脂作用,且以高剂量组为佳,最大给药量证明无毒副作用,临床常用剂量安全可靠。