甲基莲心碱对胰岛素抵抗的HepG2细胞降糖的影响

目的研究甲基莲心碱对胰岛素抵抗的HepG2细胞降糖的影响。方法用CCK-8法进行细胞毒性实验筛选出合适的甲基莲心碱浓度;取对数生长期的HepG2细胞,胰岛素10^-4 mol/L、10^-5 mol/L、10^-6 mol/L、10^-7 mol/L、10^-8 mol/L 5个浓度干预12 h、24 h、36 h、48 h探索最佳的胰岛素浓度和作用时间;实验分为正常组、模型组、实验组(甲基莲心碱组),正常组不做处理,模型组用10-7 mol/L胰岛素干预36 h,实验组胰岛素干预后给与甲基莲心碱处理。用葡萄糖测定试剂盒(葡萄糖氧化酶-过氧化酶法)检测各组细胞的耗糖量;Western blot法检测各组细胞中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR、p-mTOR)、自噬微管相关蛋白轻链(LC3)、泛素结合蛋白(p-P62)蛋白的表达。结果给药后培养12 h,当甲基莲心碱的浓度为88.02μmol/L时,HepG2细胞致死率为5%;胰岛素10-7 mol/L干预36 h可成功建立胰岛素抵抗模型;实验组中不同浓度的甲基莲心碱均可促进胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗量(P<0.05)。与正常组相比,模型组mTOR、p-mTOR、LC3蛋白表达显著升高,P62蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,实验组的mTOR、p-mTOR、LC3表达不同程度地降低,P62蛋白表达不同程度地升高(P<0.05)。结论甲基莲心碱可增加胰岛素抵抗的HepG2细胞的葡萄糖消耗量,减轻胰岛素抵抗。其可能是通过减少细胞自噬来发挥作用的。