肌炎灵胶囊对实验性多发性肌炎动物模型免疫机制的影响

目的:观察肌炎灵胶囊对多发性肌炎动物模型体液免疫和细胞免疫的影响,探索其作用机制。方法:利用豚鼠肌浆球蛋白多点免疫Lewis大鼠造成肌炎模型,在此基础上胃灌肌炎灵,观察动物血清中特异性抗体、ENA多肽抗体、T淋巴细胞增殖情况,且与泼尼松对照。结果:肌炎灵可以显著抑制大鼠血清特异性抗体含量,抑制由肌浆球蛋白(Myo-sin)和刀豆蛋白A(ConA)诱导的T淋巴细胞增殖。结论:同泼尼松一样,肌炎灵在一些非特异性和特异性细胞免疫及体液免疫方面起抑制作用,以此发挥疗效。

小檗碱对人胃癌细胞增殖、细胞周期及CD44V6表达的影响

目的 :研究小檗碱对人胃癌MGC 80 3细胞增殖、细胞周期及CD4 4V6分子表达的影响 ,探讨其抗肿瘤及抗肿瘤转移作用机制。方法 :MTT法检测小檗碱对人胃癌MGC 80 3细胞体外增殖作用。激光共聚焦显微镜观察用药后细胞形态的改变并用流式细胞仪检测细胞周期的变化。应用免疫组化和流式细胞术技术检测药物对细胞表面CD4 4V6表达的影响。结果 :小檗碱对MGC 80 3细胞有显著抑制作用 ,在 10、2 0、4 0 μg ml浓度下 ,其抑制率分别为 36 2 %、4 9 7%和 5 9 3% ,有明显剂量依赖关系。激光共聚焦显微镜下细胞核固缩 ,并可见凋亡小体。药物可将细胞阻滞在G0 G1期 ,并使细胞表面的CD4 4V6表达降低。结论 :小檗碱可通过诱导MGC 80 3细胞凋亡并将细胞阻滞在G0 G1期 ,发挥抑制瘤细胞的体外增殖作用 ;小檗碱可降低MGC 80 3细胞株CD4 4V6的表达 。

威麦宁抗小鼠Lewis肺癌转移作用及分子机制的研究

目的 :探讨威麦宁抗小鼠Lewis肺癌转移作用及其分子机制。方法 :接种Lewis肺癌细胞复制移植性肺癌转移模型 ,用药后计数肺表面转移灶的数目 ;免疫组化法检测瘤组织中血管内皮细胞CD34的表达情况、并计数微血管密度 (MVD)和瘤细胞表面E -cadherin蛋白表达率 ;RT -PCR法检测瘤细胞E -cadherinmRNA的表达水平。结果 :NS(生理盐水组 )、WL(威麦宁低剂量组 )、WH(威麦宁高剂量组 )、CTX(环磷酰胺组 )各组肺转移灶发生率依次为 10 0 %、90 %、6 0 %和 4 0 %。瘤组织内MVD计数 ,WH组MVD明显低于NS组 (P <0 0 1)。WH组瘤细胞膜表面E -cadherin蛋白表达率及E -cadherinmRNA水平明显高于NS组 (P <0 0 1)。结论 :威麦宁可能通过提高瘤细胞E -cadherinmRNA及E -cadherin蛋白的表达 ;减少瘤组织微血管形成等机制 ,发挥抗Lewis肺癌荷瘤小鼠移植性肺转移作用。

榄香烯乳对人宫颈癌Hela细胞转录因子ELK1及其靶基因的影响

目的观察中药榄香烯乳对人宫颈癌Hela细胞转录因子ELK1及其靶基因的影响,以深入了解榄香烯乳的抗癌机制。方法用MTT法检测药物对细胞的抑制作用,双荧光素酶报告系统检测药物对转录因子ELK1的影响,Western Blot检测磷酸化ELK1及其靶基因c-fos表达。结果榄香烯乳能明显抑制人宫颈癌Hela细胞的生长,其半数生长抑制剂量为80.6μg/mL;榄香烯乳处理组荧光素酶活性下降,磷酸化的ELK1及其靶基因c-fos的表达均下调。结论榄香烯乳可能通过下调转录因子ELK1的磷酸化水平,抑制c-fos的表达,从而抑制人宫颈癌Hela细胞的生长。

重肌灵片体内对EAMG大鼠IFN-γ、IL-10、TGF-β水平的影响

目的:探讨重肌灵片(ZJL)对细胞因子水平的影响。方法:将50只Lewis大鼠随机等量分为佐剂对照组、模型组、地塞米松组及重肌灵大、小剂量组,用从电鳐电器官提取的烟碱型乙酰胆碱受体(N2AchR)纯品,加完全弗氏佐剂(CFA)免疫大鼠制成实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)。大鼠免疫后第24天,用ELISA检测细胞培养上清及血清中IFN-γ、IL-10和TGF-β的含量。结果:在细胞培养上清中,模型组与CFA组比较IFN-γ、IL-10及TGF-β的水平升高(P<0.01);ZJL两剂量组与模型组比较IFN-γ、IL-10的含量均显著下降(P<0.01或P<0.05);而TGF-β的含量均显著升高(P<0.01或P<0.05)。阳性药组与模型组比较,三者含量均显著降低(P<0.01或P<0.05)。结论:ZJL片可通过上调TGF-β的含量,抑制IFN-γ、IL-10的过量分泌,从而降低抗N2AchR抗体的水平,抑制EAMG的发生。

威麦宁对肺癌细胞（PG）表面粘附分子表达的影响

目的:研究威麦宁对人高转移巨细胞肺癌细胞(PG)表面粘附分子表达的影响,探讨其抗肿瘤转移的分子机制. 方法:实验分为威麦宁高剂量(WMH,100 mg/L)、低剂量(WML,62.5 mg/L)两组.流式细胞术法检测威麦宁对PG细胞表面CD44表达的影响;细胞免疫组化法检测威麦宁对PG细胞表面CD44V6表达的影响;RT-PCR法检测威麦宁对PG细胞αVβ3mRNA表达的影响.

威麦宁体外杭肿瘤作用的实验研究浅探

目的 :探讨威麦宁对人肺癌等 6种不同肿瘤细胞株的体外抑制增殖作用及与化疗药物 (顺铂 )合用后的增效作用 ,并探讨其抗肺癌作用机制。方法 :MTT法检测威麦宁单独及与顺铂 (DDP)合用对不同肿瘤细胞体外增殖的影响 ;流式细胞术检测威麦宁对肺癌细胞株 (PG、PAa)细胞周期的影响。结果 :威麦宁对肺癌细胞株PG、PAa、A5 49、肝癌细胞株BEL -740 2、胃癌细胞株MGC -80 3及黑色素瘤细胞株B16-BL6等均有不同程度的抑制作用 (P <0 .0 1,0 .0 0 1) ;并可明显加强化疗药物顺铂 (DDP)抑制肿瘤细胞体外增殖作用 (P<0 .0 0 1) ;可将PG、PAa细胞周期阻滞在S期。

清开灵注射液对小鼠脾T、B细胞增殖的影响

目的:研究清开灵注射液(QKL)在体外对小鼠脾T、B细胞增殖活化的影响。方法:常规制备小鼠脾细胞,观察T细胞转化实验加ConA,观察B细胞转化实验加LPS。采用MTT法观察不同浓度QKL对小鼠脾T、B细胞增殖活化的作用。结果:不同浓度的QKL(1/3200及以上)对脾B细胞的增殖具有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性(P<0.01)。高浓度QKL(1/400及以上)对脾T细胞增殖具有抑制作用,低浓度QKL(1/800以下)对脾T细胞增殖具有促进作用(P<0.01)。结论:QKL可通过影响T、B细胞的活化增殖调节机体的免疫反应。

清开灵注射液对小鼠TB细胞增殖与功能的影响

目的:研究清开灵注射液在体内对正常小鼠胸腺及脾脏指数,迟发型过敏反应(DTH)及T、B细胞活化增殖的影响,探讨其免疫调节作用及机制。方法:将小鼠随机分为正常对照组、DTH对照组、清开灵注射液低、中、高三个剂量组及阳性药物组。各组小鼠给予不同浓度的清开灵注射液,阳性药物或生理盐水腹腔注射后,对各组小鼠胸腺及脾脏指数,DTH反应强度以及T、B细胞增殖活化能力进行比较。结果:清开灵注射液大、中两个剂量组的小鼠胸腺指数明显低于正常对照组,存在极显著性差异(P<0.01),而清开灵注射液对小鼠脾脏指数无明显影响(P>0.05);三个剂量的清开灵注射液均能明显抑制DTH反应,与DTH组相比,差异显著(P<0.05);清开灵注射液三个剂量组均可明显降低正常小鼠由ConA刺激的T细胞非特异性增殖反应,其中以大剂量组作用最为明显,和正常组相比,差异极显著(P<0.001)。而对由LPS刺激的B细胞非特异性增殖反应,则无显著性影响(P>0.05)。结论:清开灵注射液体内可有效抑制T细胞的活化增殖及功能从而调节机体的免疫反应。

慢性移植物抗宿主病狼疮小鼠模型肾组织细胞凋亡及Th1/Th2细胞因子的研究

目的研究慢性移植物抗宿主病(cGVHD)狼疮样小鼠模型肾组织细胞凋亡及Th1/Th2细胞因子的改变。方法20只B6D2F1代杂交鼠,随机分为模型组(10只)及对照组(10只),12周后处死。采用原位末端标记法(TUNEL)染色观察肾组织细胞凋亡;免疫组织化学、Westernblot和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测Fas、FasL基因转录及蛋白表达情况。结果TUNEL法结果显示模型组肾组织细胞凋亡较对照组增多。免疫组织化学提示:各组均有Fas、FasL表达,正常对照组有极少量Fas表达,表达部位在肾小球系膜细胞;FasL表达部位在近端肾小管上皮细胞。聚合酶链反应(PCR)结果:模型组较正常对照组FasmRNA表达增高。模型组较正常对照组FasLmRNA表达差异无显著性。正常对照组干扰素(IFN)-γ和白细胞介素(IL)-4阳性细胞极少;模型组肾组织血管周围浸润的炎性细胞中可见IFN-γ和IL-4阳性细胞,且IL-4阳性细胞明显高于IFN-γ,提示Th2细胞表达占优势。模型组比正常对照组INF-γ和IL-4阳性细胞明显升高,RT-PCR结果显示:模型组IFN-γ与正常对照组比较差异无显著性;模型组IL-4较正常对照组显著升高。结论cGVHD狼疮样小鼠模型肾组织细胞凋亡异常及Th1/Th2细胞因子失衡,在狼疮肾炎(LN)的发病中起重要作用。