犀角地黄汤合银翘散对流感病毒性肺炎小鼠炎性因子和自由基表达的影响

目的观察犀角地黄汤合银翘散对流感病毒感染致病毒性肺炎小鼠炎性因子、自由基表达的影响。方法Balb/c小鼠108只随机分为正常组、模型组、药物组,25μL 50LD50病毒液滴鼻建立流感病毒鼠肺适应株感染的小鼠肺炎模型(除正常组外),感染后1 h,正常组和模型组予以双蒸水灌胃,药物组予中药23 g/(kg.d)灌胃,各组均给药2次/d,连续5 d。感染后2、4、6 d分别取材,采用酶联免疫吸附法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、肺组织匀浆中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的含量,生化法检测肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(iNOS)、丙二醛(MDA)含量。结果临床等效剂量的犀角地黄汤合银翘散在感染后第4、6日可明显降低TNF-α的含量(P<0.01,P<0.05);感染后第6日,抑制MCP-1的表达(P<0.01),升高SOD活性(P<0.01);在各时间点均降低MDA含量(P<0.01);感染后第2日,明显降低iNOS的含量(P<0.01),第4、6日,明显降低NO含量(P<0.01)。结论犀角地黄汤合银翘散可明显抑制流感病毒致病毒性肺炎小鼠体内炎性细胞因子及氧自由基的产生,具有抗炎作用。

小檗碱对流感病毒感染肺泡巨噬细胞炎性细胞因子的影响及其分子机制研究

目的:探讨小檗碱对流感病毒感染大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)后TNF-α、MCP-1转录、表达的影响及与TLR7介导的MyD88依赖性信号通路的关系。方法:流感病毒感染NR8383细胞1小时后,加入含小檗碱的培养基(终浓度5μg/ml),药物作用后6、12、24小时,ELISA检测细胞上清中TNF-α、MCP-1的含量;24小时,Real time PCR检测细胞内TNF-α、MCP-1的mRNA水平,RT-PCR检测TLR7、MyD88、NF-κB P65 mRNA水平;4、6、24小时,免疫组化法检测NF-κB P65核转位情况,并做半定量分析;24小时,Western blot检测NF-κB P65表达水平。结果:小檗碱抑制了流感病毒感染NR8383细胞后TNF-α、MCP-1的转录和表达(P<0.05),降低了TLR7、MyD88、NF-κB P65 mRNA水平(P<0.05、P<0.05、P<0.01),抑制了流感病毒感染后NF-κB P65的核转位及表达(P<0.01)。结论:小檗碱通过抑制TLR7介导的MyD88依赖性信号通路,抑制了NF-κB P65的核转位及表达,从而减少流感病毒感染巨噬细胞后炎性细胞因子TNF-α、MCP-1的产生,在流感治疗中发挥抗炎作用。

小檗碱抗流感病毒性肺炎小鼠肺组织炎性损伤的实验研究

目的观察小檗碱对流感病毒性肺炎小鼠肺组织中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达及炎性细胞渗出的影响,探讨其抗炎性损伤作用。方法 BALB/c小鼠108只随机分为正常组、模型组、小檗碱组。模型组和小檗碱组予25μL 50LD50病毒液滴鼻建立流感病毒感染的小鼠肺炎模型,感染后1 h,正常组和模型组予以双蒸水灌胃,小檗碱组每日予药物0.005 g/kg腹腔注射,各组均给药2次/d,连续给药5 d。感染后第2、4、6日分别取材,免疫组化法检测肺组织中ICAM-1、VCAM-1的表达,对肺泡灌洗液(BALF)中白细胞进行分类计数。结果病毒感染后第2、4、6日,模型组肺组织中ICAM-1、VCAM-1的表达明显增强,小檗碱降低了ICAM-1、VCAM-1的表达水平,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01);模型组BALF中白细胞总数、单个核细胞数、嗜酸性粒细胞数、中性粒细胞数均明显升高,小檗碱组第6日BALF中白细胞总数、中性粒细胞数明显降低(P<0.01),第4日时BALF中单个核细胞数降低(P<0.01)。结论小檗碱能够抑制流感病毒性肺炎小鼠肺组织中ICAM-1、VCAM-1表达,减轻了炎性细胞渗出,对小鼠流感病毒性肺炎肺组织炎性损伤具有保护作用。

重肌灵片治疗重症肌无力的免疫调节机理研究

目的:探讨重肌灵片的免疫调节机制。方法:采用正常小鼠、免疫抑制模型小鼠和EAMG大鼠模型观察重肌灵片的免疫调节作用。结果:重肌灵片增强ConA或LPS诱导的正常小鼠及免疫抑制模型小鼠T、B细胞的增殖,促进IL-2分泌;能对抗ConA诱导的EAMG大鼠淋巴细胞增殖的降低;但抑制AChR诱导的淋巴细胞增殖及IFN-γ、IL-4 mRNA的表达;此外,能显著促进EAMG大鼠CIM+T淋巴细胞的凋亡。结论:重肌灵片增强正常小鼠、免疫抑制小鼠和EAMG大鼠的免疫功能,但抑制AChR诱导的特异性的T细胞增殖及IFN-γ、IL-4 mRNA的表达,该作用可能是通过诱导AChR特异性的CD4+T细胞凋亡实现的。

中药治疗病毒性肺炎的研究进展

病毒性肺炎是一种急性呼吸道病毒感染性疾病。在此病患者中婴幼儿居多。中医虽无病毒性肺炎的病名,但根据此病的临床表现将其归入"风温"的范畴。中医在对病毒性肺炎患者进行抗病毒治疗方面具有诊疗方案个体化、不良反应少、不易导致病毒耐药等优点。近年来,关于采用中药治疗病毒性肺炎的文献报道逐渐增多。本文对用中药治疗病毒性肺炎的临床研究做如下综述。

中医成药治疗甲型H1N1流感研究进展

近年来,中医药治疗甲型H1N1流感取得了较好的临床疗效。尽管目前临床对甲型H1N1流感的治疗仍以西药为主,但西药抗病毒药存在副作用大,易引起耐药性等缺点,限制了治疗的效果。中医治疗甲型H1N1流感则具有独特的思路,根据甲型H1N1流感不同进展阶段的不同证型,选择不同的中药进行"辨证论治",不仅能减轻西药的不良反应,而且在疾病的治疗上也有独特的功效。我们总结了近来学者们对中医成药治疗甲型H1N1流感的临床及基础研究,将甲型H1N1流感分为轻、中、重三种,并分别根据症状与中医证型相匹配,梳理了临床用于治疗甲型H1N1流感的中医成药的适应证型与作用机制。因此,在西药进行抗病毒治疗的同时,根据疾病进展不同阶段的中医的证型,选用不同的中医方药,可有效减少西药的不良反应,取得更好的疗效。

汉黄芩素对流感病毒感染肺泡巨噬细胞NF-κB核转位及表达的影响及机制

目的:探讨汉黄芩素对流感病毒感染大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)中核转录因子-κB(NF-κB)核转位、表达的影响及与Toll样受体7(TLR7)介导的髓样分化因子88(MyD88)依赖性信号通路的关系。方法:流感病毒感染NR8383细胞1 h后,加入含汉黄芩素的培养基(终质量浓度0.016 g.L-1),药物作用后6,12,24 h,RT-PCR检测TLR7,MyD88,NF-κB p65mRNA水平;4,6,24 h时,免疫组化法检测NF-κB p65核转位情况,并做半定量分析;24 h时,Western blot检测NF-κB p65表达水平。结果:汉黄芩素降低了流感病毒感染NR8383细胞后TLR7,MyD88,NF-κB p65 mRNA水平(P<0.05,P<0.01,P<0.05),抑制了流感病毒感染后NF-κB p65的核转位及表达(P<0.01)。结论:汉黄芩素通过抑制TLR7介导的MyD88依赖性信号通路,抑制了NF-κB p65的核转位及表达,从而减轻流感感染中的炎症反应。

小檗碱改善流感病毒性肺炎小鼠肺血管通透性的作用及机制

目的:观察小檗碱对流感病毒感染所致病毒性肺炎小鼠肺血管通透性的影响,并探讨其作用机制。方法:BALB/c小鼠108只随机分为3组,正常组、模型组、小檗碱组,25μL 50LD50病毒液滴鼻建立流感病毒感染的小鼠肺炎模型,感染后1 h,正常组和模型组予以双蒸水灌胃,小檗碱组予药物0.005 g.kg-1d-1腹腔注射;各组均给药2次/d,连续给药5 d。感染后的2 d、4 d、6 d,处死小鼠,肺组织称重以检测肺含水量;1%伊文氏兰5 mL/kg尾静脉注射检测肺血管通透性;Bicinchoninic acid(BCA)法检测肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量;放免法或酶免法测定肺组织中PGE2、PLA2及LT-B4含量。结果:病毒感染后,模型组肺含水量持续升高,肺血管通透性及BALF蛋白含量在感染后第4天开始明显升高,小檗碱降低了肺含水量、肺血管通透性及BALF蛋白含量(P<0.01);模型组肺组织中PGE2、PLA2、LT-B4的含量明显升高,小檗碱不同程度地抑制了PGE2、PLA2、LT-B4的表达。结论:小檗碱通过抑制流感病毒感染后肺组织中PGE2、PLA2、LT-B4的释放,降低了肺血管通透性及肺含水量,对病毒性肺炎中肺水肿的形成,起到一定的治疗作用。

ERM蛋白在微血管内皮细胞通透性调控中的研究进展

埃兹蛋白(Ezrin)/根蛋白(Radixin)/膜突蛋白(Moesin)(ERM)是细胞膜与胞内骨架的连接蛋白,具有高度同源性。细胞外刺激因子可通过多种信号通路磷酸化ERM蛋白,使细胞骨架重构,从而调控微血管内皮细胞通透性,在感染、炎症、代谢异常等病理过程中发挥作用。ERM功能调节的一个重要环节就是其羧基末端苏氨酸残基磷酸化后引起ERM构象的改变,暴露的羧基末端尾部的肌动蛋白(actin)-细胞骨架结合位点;故通过ERM的桥接作用,可将肌动蛋白微丝与细胞膜相连,使血管内皮细胞屏障功能发生变化。目前已知能使ERM磷酸化的激酶有蛋白激酶C(PKC)、促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)、Rho相关激酶(ROCK),分别通过p38-MAPK、Rho/ROCK、PKC信号通路参与微血管内皮屏障功能的调控。本文旨在阐述ERM及其相关信号通路在微血管内皮细胞通透性调控中发挥的作用。