大鼠克罗恩病肺损伤的病理学和肺功能变化

目的:建立大鼠克罗恩病动物模型,从病理形态学改变、肺功能变化探讨克罗恩病发生肺损伤的情况.方法:采用2,4,6-三硝基苯磺酸/无水乙醇法造模,将大鼠随机分为模型组和正常组.分别于造模后第1、2、4周末杀检取材.常规HE染色观察大鼠结肠黏膜、肺泡支气管的病理形态学变化.在小动物肺功能测试仪上检测肺功能.结果:克罗恩病大鼠肺损伤的病理形态学变化:可见典型间质性肺炎病变,肺泡间隔增宽,血管充血,间质水肿,炎性细胞浸润,肺泡腔隙变小,支气管壁增厚.有的可见肺气肿病变,极少数有支气管扩张.肺功能变化:气道阻力先降低后升高,肺顺应性Cl先升高后降低,最大通气量MVV显著降低,用力肺活量FVC降低,第0.2秒末呼出容积(Fev0.2)降低,Fev0.2/FVC无显著差异,最大呼气流量PEF、PEF25-75%有下降趋势.结论:克罗恩病大鼠发生肺损伤,主要是间质性肺炎等限制性通气障碍疾病.少数亦有肺气肿、支气管扩张等病变兼杂出现.

Blackboard教学平台在病理生理学教学中的应用

病理学是一门医学基础理论课,是基础医学与临床医学之间的桥梁。病理学的学习将为今后的临床工作奠定坚实的基础。在中医药院校,病理学内容多而学时少。传统的灌输式教学模式,老师讲,同学只是在被动的接受知识,缺乏良好的互动,也不利于教学相长。随着计算机多媒体技术和网络技术的迅速发展,网络应用于教育领域,使教育信息的传播方式发生了根本改变。Blackboard教学平台是网络教学的最佳平台之一。利用该平台的教学内容模块构建网络病理学课程。通过互动体系,师生一方面就专题进行讨论,深入对理论知识的理解,另一方面,通过协作模块可以培养同学良好的协作精神。通过测验模块在线考试,能够有效帮助教师检查教学效果和学生自检学习效果,教师能够根据学生的网上答题情况及时掌握每个学生的学习情况,并有针对性地给予指导。同时,也对自身教学进行调整,使教学环节的控制变得简单易行,有助于提高教学效果。总之,该平台的应用改革了传统的教学模式,弥补了课堂教学学时不足和师生互动少的缺点,提高了学生学习的主动性和创造性,培养了良好的协作精神,大大提高了教学效果。

心脑舒通胶囊对大鼠脑缺血再灌注损伤后IL-1β、TNF-α与神经细胞凋亡的影响

目的:探讨心脑舒通胶囊对大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞凋亡,及其对炎性因子白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法:采用线栓法阻塞大脑中动脉致大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,24h后断头取脑,HE染色和尼氏染色光镜下观察大鼠大脑皮层区细胞损伤程度,TUNEL法检测皮层区神经细胞凋亡,ELISA法和放射免疫法分别检测缺血侧脑组织和血清中IL-1β和TNF-α的含量。结果:缺血再灌注模型组神经细胞皮层区明显水肿,组织结构疏松,尼氏小体减少;凋亡细胞数增多;脑组织和血清中IL-1β和TNF-α显著升高,与假手术组比较均有显著性差异(P<0.01)。心脑舒通胶囊能明显减轻皮层区神经细胞水肿,增加尼氏小体,降低细胞凋亡;降低IL-1β和TNF-α含量,与模型组比较,有统计学意义(P<0.05或0.01)。结论:心脑舒通胶囊能减轻缺血再灌注脑组织损伤程度,降低神经细胞凋亡的作用,其机制可能与降低脑组织和血清内IL-1β和TNF-α含量有关。

丹酚酸B对脑缺血小鼠脑能荷和三磷酸腺苷酶活性的影响

目的:从脑缺血小鼠脑组织高能磷酸含量和三磷酸腺苷(ATP)酶活性探讨丹酚酸B对脑水肿的影响。方法:将NIH小鼠分为假手术组、缺血组、丹酚酸B治疗组和尼莫地平对照组,复制脑缺血模型。丹酚酸B组尾静脉注射丹酚酸B(22.5mg·kg^(-1));尼莫地平组尾静脉注射尼莫地平(0.03mg·kg^(-1));假手术组和缺血组尾静脉注射等量的生理盐水,30min后阻断双侧颈总动脉,观察缺血30min脑组织ATP、二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷(AMP)和磷酸肌酸(PCr)的含量并计算能荷(EC)值;同时测定Na^+-K^+-ATP酶和Ca^(2+)-ATP酶的活性以及脑含水量。结果:与缺血组比较,丹酚酸B组脑组织ATP,ADP,PCr含量和能荷值显著升高(P<0.01);Na^+-K^+-ATP酶和Ca^(2+)-ATP酶活性显著增强(P<0.01);而脑含水量则明显降低(P<0.05)。结论:丹酚酸B减轻脑缺血小鼠脑含水量的作用机制,可能与其提高高能磷酸含量和增强ATP酶活性有关。

脂多糖对体外培养人脐静脉内皮细胞分泌功能及活力的影响

目的 :观察脂多糖对人脐静脉内皮细胞分泌缩血管因子内皮素 - 1、舒血管因子一氧化氮及其细胞活力的影响 ,为探讨感染性休克的发病机制提供实验资料。方法 :选用体外培养的 3代人脐静脉内皮细胞 ,分别使用浓度为 1g/L、10 0mg/L、10mg/L、1mg/L、10 0 μg/L、10 μg/L、1μg/L的脂多糖与之孵育 6h。分别使用放免法、硝酸还原酶法以及MTT法测定培养上清液内内皮素、一氧化氮的含量和内皮细胞的活力。结果 :正常对照组培养基中ET - 1的浓度 (pg/L)为 :2 5 1 6 4± 10 90。脂多糖与内皮细胞共孵育组培养基中ET - 1的浓度 (pg/L)分别为 :2 2 0 85± 19 14,2 78 6 7± 15 45 ,30 6 40± 11 6 0 ,312 87± 33 5 0 ,32 4 38± 17 0 2 ,2 91 49± 14 30 ,2 82 11± 13 38,各组与正常对照组比较 ,P <0 0 5或P <0 0 1;正常对照组培养基中总硝酸根离子 (NOx)的浓度 (μmol/L)为 6 2 9 46± 13 36 ,脂多糖与内皮细胞共孵育组培养基中总硝酸根离子 (NOx)的浓度 (μmol/L)分别为 :732 5 8± 2 3 2 1,6 6 9 87± 9 32 ,6 6 1 2 4± 16 80 ,6 5 0 33± 13 2 4,6 0 6 5 9± 12 94,6 2 6 75± 9 83,6 2 7 6 1± 5 6 1,各组与正常对照组比较 ,P <0 0 5或P <0 0 1。各组内皮细胞的活力分别为 :74%、81%。

从溃疡性结肠炎大鼠肺损伤看“肺与大肠相表里”的特异性

目的观察溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠肺支气管病损特点及肺肠相关的特异性,为"肠病及肺"理论提供依据。方法采用家兔结肠黏膜组织致敏与三硝基苯磺酸(TNBS)-乙醇模型相结合的免疫复合法复制UC大鼠模型,并与正常大鼠对照。检测两组大鼠肺功能[吸气阻力(Ri)、呼气阻力(Re)、用力肺活量(FVC)、0.2秒率(FEV0.2/FVC)、最大通气量(MVV)和平均用力呼气流速(FEF25%-75%)]及肝肾功能[血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)];观察两组结肠、肺、肝、肾病理改变。结果模型组大鼠急、慢性期均表现为体重下降,黏液便、稀便,部分大鼠出现呼吸困难,气促、喘鸣等症状。与正常组比较,模型组大鼠急性期MVV、FVC、FEV0.2和FEF25%-75%以及慢性期Ri、Re、MVV、FVC和FEF25%-75%均显著降低(P<0.05,P<0.01),FEV0.2/FVC显著升高(P<0.05),且病理显示有间质性肺炎及肺间质纤维化改变。两组肝肾功能均在正常范围,肝肾组织病理观察未见明显病变。结论 UC可以特异性引起肺支气管病损,肺损伤是UC的肠外表现之一,并从"肠病及肺"角度论证了肺与大肠相表里理论。

中药治疗肝硬化门静脉高压症的研究进展

门静脉高压症是肝硬化重要的并发症,严重影响了患者的生存质量。开发治疗门静脉高压症的药物一直是该领域的研究热点。β-受体阻断剂及其他药物因为各种不良反应大大限制了其临床应用。随着中医对门静脉高压症病机认识的深入以及中药有效组分的研究进展,中药在治疗门静脉高压症方面取得了一些进展。治疗门静脉高压症的单味药物包括丹参、当归、泽泻、冬虫夏草等;复方包括扶正化瘀胶囊、复方861、抗纤软肝颗粒、复方鳖甲软肝片、强肝软坚汤、加味瓜蒌散、肝络通等。这些单味药以及复方在抗纤维化以及降低门静脉压力方面都显示出治疗作用。通过总结中药在治疗肝硬化门静脉高压症方面的研究进展,旨在为降低门静脉压力,从而降低曲张静脉破裂出血的风险提供更多选择。

心脑舒通胶囊对局灶性脑缺血再灌注大鼠皮层VEGF、VEGFR2 mRNA表达的影响

目的:探讨心脑舒通胶囊对局灶性脑缺血再灌注大鼠皮层血管新生的影响。方法:采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型(n=9),于缺血1.5h分别再灌注3h、6h、12h、24h、72h5个时点,用RT-PCR方法,动态观察缺血再灌注皮层VEGF及其VEGFR2 mRNA表达;并选取脑缺血1.5h再灌注24h,选用心脑舒通胶囊进行提前3d给药干预,观察其对皮层超微结构相应病理改变和VEGF、VEGFR2 mRNA表达的影响。结果:脑缺血再灌注各时点大鼠皮层VEGF、VEGFR2 mRNA表达呈明显上升趋势,并均于再灌注24h升至高峰(P<0.01);同时发现在该时点进行药物干预,心脑舒通胶囊可明显改善神经细胞、微血管损伤程度,明显下调VEGFR2 mRNA过高表达。结论:心脑舒通胶囊可有效调控急性脑缺血再灌注病理过程中的血管新生,对急性脑缺血再灌注病理损伤的修复具有一定的积极意义,这可能与参与抑制血脑屏障通透性的增加及脑水肿的形成有关。

加味生脉饮注射液对内毒素休克大鼠肺组织肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β和核转录因子-κB含量的影响

目的:观察加味生脉饮注射液对内毒素休克肺组织TNF-α、IL-1β和NF-κB表达的影响。方法:静脉注射脂多糖(LPS,8.00mg·kg^(-1))造成内毒素休克模型,用加味生脉饮注射液作干预治疗,酶联免疫吸附法检测上述因子在假手术组、模型组、加味生脉饮组、阳性对照组等各组大鼠肺组织内的表达。结果:模型组肺损伤较重,TNF-α、IL-1β和NF-κB含量明显升高(P<0.05);加味生脉饮组和阳性对照组肺损伤较轻,TNF-α、IL-1β和NF-κB含量明显降低(P<0.05)。结论:加味生脉饮注射液能减轻内毒素休克时肺损伤和TNF-α、IL-1β和NF-κB表达,提示该药对内毒素休克肺损伤的保护作用可能是通过调控NF-κB通路过度激活而实现。

11-羰基-β-乙酰乳香酸(AKBA)调节基质金属蛋白酶-1,-2,-9的活性(英文)

目的:降低创面的高MMPs活性是治疗慢性皮肤溃疡的新途径。本研究主要观察11-羰基-β-乙酰乳香酸(AKBA,中药乳香的一种活性成分)对MMP-1、MMP-2和MMP-9活性的调节作用。方法:人间质胶原酶(MMP-1)或者明胶酶A(MMP-2)被醋酸氨基苯汞(p-aminophenylmercuric acetate,APMA)激活后,与不同浓度的AKBA共同孵育1h,通过底物裂解法观察其活性的改变。MMP-9在中性粒细胞(polymorphonuclear neu-trophils,PMNs)中含量丰富,因此以大鼠腹腔PMN作为MMP-9的来源。PMN裂解产物与不同浓度的AKBA共同孵育1h,通过明胶酶谱法观察其中MMP-9活性的改变。我们建立了3个细胞模型:由TNF-α活化的人皮肤成纤维细胞模型;PMA活化的THP-1细胞模型和成纤维细胞-THP-1共培养细胞模型。AKBA与这3个细胞模型共同孵育24h后,用ELISA法检测细胞上清中MMP-1、MMP-2和MMP-9的含量,用明胶酶谱法检测细胞上清中MMP-2、MMP-9的活性。结果:AKBA在0.1-0.8mmol/L浓度范围内对MMP-1、MMP-2的活性有抑制作用,IC50分别为0.18mmol/L和0.27mmol/L;在0.05-0.85mmol/L浓度范围内对MMP-9活性表现出不同程度的抑制作用(P<0.01),其抑制作用呈浓度依赖性。AKBA促进成纤维细胞分泌MMP-2,但是,对THP-1细胞分泌MMP-9表现出抑制作用。在共培养细胞模型中,AKBA对MMP-1、MMP-2和MMP-9的分泌均表现出抑制作用。结论:AKBA作为乳香的一种活性成分,它对MMPs活性的直接抑制作用和对MMPs分泌的抑制作用可能是中药乳香治疗慢性皮肤溃疡的机制之一。

地塞米松对内毒素休克大鼠脑组织细胞因子含量的影响

目的探讨地塞米松对内毒素休克大鼠脑组织细胞因子含量的影响。方法 54只健康成年Sprague-Dawley大鼠分为假手术组、脂多糖组和地塞米松组,后两组静脉注射脂多糖8 mg/kg,地塞米松组于造模成功后10 min静注地塞米松5 mg/kg。动态监测血压。分别于造模后1 h、3 h、6 h用ELISA法检测脑组织中白细胞介素(IL)-4、IL-10和肿瘤坏死因子(TNF)-α的含量。结果脂多糖组与假手术组比较,随着血压的下降,脑组织中IL-4、IL-10浓度减少(P<0.01),TNF-α增加(P<0.01);与脂多糖组比较,地塞米松组TNF-α含量减少(P<0.01),IL-4、IL-10含量升高(P<0.01)。结论地塞米松能调节脂多糖诱导的内毒素休克大鼠脑内炎性因子,发挥脑保护作用。

加味生脉饮注射液对内毒素休克大鼠脑组织肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1α含量的影响

目的:以加味生脉饮注射液对内毒素休克大鼠脑组织TNF-α、IL-1α含量的影响为切入点,探讨补气活血解毒治法的作用机制。方法:96只SD大鼠随机分为假手术组(生理盐水20mL/kg)、模型组(脂多糖8mg/kg)、加味生脉饮组(脂多糖8mg/kg+加味生脉饮注射液10mL/kg)、地塞米松组(脂多糖8mg/kg+地塞米松5mg/kg)4组,每组再分为1h、2h、3h和6h4个观测时点。各动物手术分离颈总动脉并与生物机能系统连接,监测平均动脉压(MAP),测定脑组织TNF-α、IL-1α含量等指标。结果:模型组动物在注射脂多糖后MAP进行性下降,TNF-α、IL-1α含量增加(P<0.05),各治疗组上述病理改变明显改善。结论:生脉饮加味方可通过对休克时脑内过量炎性递质生成的抑制而起到抗休克、保护脑组织的作用,补气活血解毒治法是感染性休克有效的中医治法。

清开灵注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤过程中转化生长因子-β1表达的影响

目的:探讨清开灵注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤过程中转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠,随机分成正常组、模型组及清开灵注射液治疗组。反复夹闭双侧颈总动脉复制脑缺血再灌注损伤模型。利用免疫组织化学方法在缺血再灌注不同时间点分别检测脑组织中GFAP及TGF-β1的含量。结果:大鼠脑缺血再灌注损伤不同时间点脑组织中GFAP及TGF-β1的表达有不同程度增加,而清开灵注射液可不同程度地降低GFAP及TGF-β1的表达。结论:清开灵注射液可能通过抑制星形胶质细胞活性而降低TGF-β1的表达。

利开灵对脑出血大鼠内毒素血症炎症效应的影响

目的观察脑出血后大鼠继发内毒素血症的炎症效应,并探讨利开灵对其影响。方法采用Rosenberg法改良后建立大鼠脑出血模型,根据脑出血不同时点(12、24、48、72小时)分为4组,每个时间点再分为3组:假手术组、模型组、利开灵组,用终点显色法检测各组血浆内毒素(LPS)水平,ELISA法检测各组血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)水平,放射免疫法检测各组出血局部脑组织TNF-α、IL-1β水平。结果模型组LPS均明显升高,在48小时达高峰(P<0.01);血清TNF-α、IL-1β升高,均在24小时达高峰(P<0.01);出血局部脑组织TNF-α升高,呈上升趋势直至72小时,IL-1β呈先升高再下降的趋势,在48小时达最高(P<0.01)。同时发现利开灵可下调血浆LPS、血清和出血局部脑组织TNF-α、IL-1β过高表达。结论脑出血后大鼠继发内毒素血症,并且引发体内炎症反应和加重脑局部的炎症反应。利开灵对脑出血继发内毒素血症的炎症效应有较好的调控作用,这可能是利开灵改善脑出血后脑水肿的作用机制之一。

脂多糖对人脐静脉内皮细胞ET-1、eNOS、iNOS mRNA表达的影响

目的 :观察脂多糖 (LPS)对人脐静脉内皮细胞ET - 1、eNOS、iNOSmRNA表达的影响 ,在分子水平上进一步探讨LPS影响人脐静脉内皮细胞分泌ET - 1、NO的机制。方法 :选用体外培养的第 3代人脐静脉内皮细胞 ,以 10 0 μg/L浓度的LPS与之共孵育 6h。提取总RNA ,运用半定量RT -RCR的方法 ,对ET - 1、eNOS、iNOSmRNA的表达情况进行分析。结果 :ET - 1的灰度比值分别为 :正常对照组 0 .82 ,LPS组 1.32 ;eNOS的灰度比值分别为 :正常对照组 1 2 0 ,LPS组 0 6 5 ;iNOS组的灰度比值分别为 :正常对照组 0 2 0 ,LPS组 0 .19。结论 :低浓度的LPS对人脐静脉内皮细胞ET 1mRNA的表达有促进作用 ,对eNOSmRNA的表达有抑制作用 ,对iNOSmRNA的表达则无显著作用。

RhoA/Rho激酶信号途径在门静脉高压发病机制中的研究进展

门静脉高压(PHT)是肝硬化后期的一个重要并发症,其引起的上消化道出血、脾大、腹腔积液、侧支循环形成严重影响患者的生存质量。由于PHT发病机制复杂、肝内和肝外存在诸多矛盾,导致临床上缺乏有效治疗PHT的药物,这也是目前PHT治疗的瓶颈问题之一。因此,深入研究PHT的形成机制,开发安全有效、不良反应少的药物一直是该领域的研究热点。调节血管收缩的Rho A/Rho激酶信号途径异常可能是PHT形成的关键机制之一。该文总结了近年来Rho A/Rho激酶信号途径在PHT发病机制中的研究进展,旨在为开发治疗PHT的药物提供新思路。

三氧化二砷对皮肤成纤维细胞、中性粒细胞MMPs活性,TIMP-1及TGF-β_1表达的影响

目的:砒石是化腐生肌的常用中药,其主要成分是三氧化二砷(As2O3)。本研究通过观察As2O3对基质金属蛋白酶(MMPs)活性、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)及转化生长因子β1(TGF-β1)表达影响,探讨化腐中药能否调节胶原代谢,从而治疗慢性皮肤溃疡。方法:明胶酶谱法检测大鼠中性粒细胞(PMNs)来源的MMP-9活性、人成纤维细胞(hFb)分泌的MMP-1、MMP-2的活性,免疫细胞化学法检测hFb TIMP-1、TGF-β1的表达。结果:As2O3浓度在50mg/L时可以提高大鼠PMNs来源的MMP-9的活性(P<0.01);在0.8mg/L可以提高hFb分泌的MMP-1、MMP-2的活性(分别P<0.01);同时As2O3作用于hFb6h、12h、18h后,TIMP-1、TGF-β1表达持续降低(P<0.01)。结论:As2O3在一定范围内可提高PMNs来源的MMP-9的活性;也可提高hFb分泌的MMP-1、MMP-2的活性,同时抑制hFbTIMP-1、TGF-β1的表达。提示砷类制剂可通过提高多种MMPs的活性,降低TIMP-1的表达从而发挥化腐作用。

利开灵对脑出血大鼠继发肠源性内毒素血症的干预作用

目的:探讨利开灵对脑出血后大鼠体内继发肠源性内毒素血症的干预作用。方法:采用Rosenberg法改良后建立大鼠脑出血模型,根据脑出血不同时点(12h、24h、48h和72h)分为4组,每个时间点再分为3组:假手术组、模型组、利开灵组,观察利开灵对肠组织相应病理改变的影响,并用终点显色法检测各组血浆内毒素(LPS)水平,ELISA法检测各组血清TNF-α、IL-1β水平。结果:模型组血浆LPS各时点均明显升高,在48h达高峰(P<0.01);血清TNF-α、IL-1β升高,均在24h达高峰(P<0.01)。同时发现利开灵可明显改善肠组织病理形态损伤,下调血浆LPS以及血清TNF-α、IL-1β过高表达。结论:脑出血大鼠继发肠源性内毒素血症,利开灵对其有较好的调控作用,这对改善脑出血预后具有积极意义。

缺血性脑损伤时脑脊液中相关蛋白研究进展

本文通过5年来国内外相关文献的检索和归纳,回顾了缺血性脑损伤时相关蛋白在脑脊液中的特异性表达,并与其在脑组织及血清中的表达进行比较,发现在缺血性脑损伤时对脑脊液中相关蛋白进行检测具有较高的灵敏度和不可代替的地位,重在拟从新的角度进一步研究脑缺血的损伤机制,为后续开展的动物实验和临床检测提供借鉴和理论指导。

缺血性脑损伤时脑脊液中活性因子表达的研究进展

本文通过对近年来国内外相关文献的检索和归纳，回顾缺血性脑损伤时各种生物活性因子在脑脊液中的特异性表达，并与其在脑组织及血浆中的表达规律进行比较，发现在缺血性脑损伤时对脑脊液中生物活性因子进行检测具有较高的敏感度和不可代替的地位，有进一步研究的必要性和重要意义，将为进一步开展的动物实验和人体实验提供借鉴。