蛋白质组学技术在中医药防治糖尿病及并发症研究中的应用进展

糖尿病是以长期高血糖为主要临床特点的全身慢性代谢疾病。蛋白质组学从整体蛋白质的水平,更深入地发现和探讨糖尿病的发病机制,现在在中医药研究中已有较多应用。本文对蛋白质组学在中医药干预糖尿病及其并发症中的研究应用进行综述,包括糖尿病及并发症的中医证候蛋白质组学筛选验证,以及相关中药药理机制的蛋白质组学分析,并进行了展望,以期为中医有关糖尿病的病机理论以及中药作用靶点提供新的线索和依据,深化中医药干预糖尿病研究。

基于概率图的中医动态交互问诊与智能辨证的数学模型的探索

本文提出了一个基于概率图的数学模型和迭代推理的算法,探索建立以经典中医辨证体系和方证对应理论为基础的自动交互式问答问诊数学模型。用于中医在线交互问诊和自动辨证分析,以提高远程中医临床问诊有效性,提供中医人工智能辅助辨证。该模型运用迭代推理算法可以实现通过简短的交互问答,自动推理出更优化的辨证分析结果,能够表达临床医师的辨证经验,并体现其对中医古籍知识的积累与运用能力,有利于中医师个人经验的传承和发扬。模型具备可扩展性和可配置性,能够不断积累辨证经验和中医药知识。为中医临床诊疗提供更加高效、便捷的实践助力,有利于加快中医药的传承与推广,有利于扩大中医药诊疗服务的群众基础和市场供给,具有深远的社会效益。

基于网络药理学探讨复方丹参滴丸治疗糖尿病周围神经病变的作用机制

目的基于网络药理学探讨复方丹参滴丸治疗糖尿病周围神经病变(DPN)的作用机制。方法(1)在中药系统药理学数据库和分析平台中检索复方丹参滴丸3种药物(丹参、三七和冰片)的活性成分,在SwissTargetPrediction平台对活性成分进行反向靶点预测。利用GeneCards^(■)数据库和OMIM^(■)数据库预测DPN相关靶点。对上述两类靶点取交集后获得药物-疾病共同靶点。(2)针对药物-疾病共同靶点及其对应的活性成分、药物,采用Cytoscape软件构建药物-活性成分-靶点网络后筛选关键活性成分。针对药物-疾病共同靶点,利用STRING数据库构建蛋白-蛋白互相作用网络,再利用Cytoscape软件进行拓扑分析以获得关键靶点。(3)针对药物-疾病共同靶点,在微生信平台进行功能富集分析和通路富集分析。(4)利用AutoDock Vina软件,将关键活性成分和关键靶点进行分子对接。结果(1)最终获得99个药物-疾病共同靶点。(2)关键活性成分包括甘草素、积雪草酸、木犀草素和丹参醇B;关键靶点包括热休克蛋白90α家族A类成员1(HSP90AA1)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)和白细胞介素6(IL-6)。(3)功能富集分析结果显示,药物-疾病共同靶点涉及类固醇代谢过程等生物过程,膜筏等细胞组分,核受体活性、配体激活的转录因子活性等分子功能;通路富集分析结果显示,药物-疾病共同靶点富集的信号通路包含糖尿病并发症中的晚期糖基化终末化产物-晚期糖基化终末化产物受体信号通路。(4)分子对接结果显示,4个关键活性成分与3个关键靶点的结合能均≤-5.0 kcal/mol,结合活性良好。结论复方丹参滴丸可通过甘草素、积雪草酸、木犀草素和丹参醇B等多种活性成分,作用于HSP90AA1、STAT3、IL-6等关键靶点,发挥抗氧化应激、抗炎、调控机体代谢等作用,从而治疗DPN。

中医药通过抑制细胞焦亡和炎性小体改善糖尿病肾病的研究进展

糖尿病肾病(DN)是糖尿病的严重并发症,是慢性肾衰竭和终末期肾病的主要危险因素,也是糖尿病患者发病和死亡的主要原因和全球最主要的非传染性死亡原因,而细胞焦亡和炎性小体激活与DN的发生发展有着密切的关系,可以介导足细胞足突丢失和融合、炎症因子表达增加、巨噬细胞浸润、肾小球基质扩张和尿白蛋白与肌酐比值增加等多种病理变化,最终导致肾单位丢失和肾损伤。据研究报道,传统草药或经典处方中的多种活性成分在DN治疗中发挥着降糖、降脂、改善胰岛素抵抗、抗炎、抗氧化应激、调节免疫等多种作用,并且可以通过抑制炎症小体的激活,抑制肾细胞焦亡,拮抗DN炎症诱导的损伤,改善肾功能,减缓DN进展,疗效明确。中药干预DN具有多靶点、多信号通路、多系统等特点和作用,在防治DN上具有广阔前景。目前体内外关于中医药干预DN的研究众多,但是缺乏系统的、全面地对中医药干预DN模型实验研究的整理、概括和总结,该文就细胞焦亡和炎性小体的研究进展及在DN中的作用机制及中医药干预研究进展进行综述,以期为DN相关防治药物的研发提供思路和参考。

刘铜华教授治疗自身免疫性甲状腺炎用药经验

自身免疫性甲状腺炎(Autoimmune thyroiditis,AIT)是一种自身免疫性疾病,包括桥本甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis,HT)、弥漫性毒性甲状腺肿(Toxic diffuse goiter)等,以桥本甲状腺炎者居多。刘铜华教授认为情志内伤及先天禀赋不足是AIT发病的关键因素,肝郁气滞火热是本病的关键病机,在临床治疗中重视疏肝理气类和清热泻火解毒类药物的使用,重视“火”类病机,重视“虚实”辨证以及心理疏导,常以自拟的甲炎康泰方为底方,辨证加减论治。本文就刘铜华教授应用甲炎康泰方化裁治疗AIT的临床经验和体会进行论述,以期指导AIT的中医治疗。

滋肾丸对KKay小鼠肝脏胰岛素抵抗以及PI3K-Akt-FOXO1通路的影响

目的 探究不同剂量滋肾丸水提物对于糖尿病小鼠降糖效果及该药对肝脏胰岛素抵抗的作用机制。方法 21只KKay小鼠随机分为模型组、滋肾丸高剂量组和滋肾丸低剂量组,每组7只;7只C57BL/6J小鼠作为正常组。连续灌胃给药6周,滋肾丸高剂量组予2.8 g/(kg·d),滋肾丸低剂量组予1.4 g/(kg·d),模型组、正常组予等体积蒸馏水。观察每周空腹血糖(fasting blood glucose, FBG),最后一周进行口服葡萄糖耐量试验(oral glucose tolerance test, OGTT),酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测各组小鼠血清中的空腹胰岛素(fasting insulin, FINS)并计算胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment-insulin resistance, HOMA-IR),qPCR法检测胰岛素受体底物(insulin receptor substrate, IRS)、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase, PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/Akt)、叉头框蛋白1(forkhead box O1,FOXO1)、磷酸烯醇丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase, PEPCK)、葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase, G6pase)、葡萄糖激酶(glucokinase, GCK)基因表达水平;苏木素-伊红(hematoxylin-eosin staining, HE)染色和糖原过碘酸雪夫染色(periodic Acid-Schiff staining, PAS)观察肝脏病理情况和糖原分布。结果 与模型组相比,滋肾丸高剂量组和滋肾丸低剂量组小鼠FBG、HOMA-IR、OGTT曲线下面积明显下降,肝脏形态学改变部分减少,脂滴减少,糖原分布增加,FOXO1、PEPCK、G6pase基因表达均明显下降,滋肾丸高剂量组GCK基因表达水平显著上升,差异有统计学意义。结论 滋肾丸对于KKay小鼠降糖效果显著,能明显改善肝脏胰岛素抵抗,其机制可能是降低FOXO1、PEPCK、G6pase的转录水平,提高GCK的转录水平,从而抑制糖异生,促进糖原合成有关。

番石榴叶化学成分及其治疗2型糖尿病研究进展

番石榴叶是桃金娘科番石榴属植物番石榴的叶,热带和亚热带地区民间用于治疗糖尿病的常用植物,番石榴叶有燥湿健脾,清热解毒的功效,现代药理研究表明,番石榴叶中的黄酮类、酚酸类,三萜和倍半萜类等化学成分具有降血糖的活性。近些年,番石榴叶临床及基础研究均取得一定进展,本文就番石榴叶有效成分及其治疗2型糖尿病临床、基础研究进展作一综述。

基于网络药理学探讨知母-黄柏治疗糖尿病肾病的靶点和机制

目的:运用网络药理学方法探讨知母-黄柏治疗糖尿病肾病的靶点和信号通路,分析其作用机制。方法:通过TCMSP数据库检索并收集知母和黄柏的候选活性成分及其对应的靶标。通过CTD、TTD、DrugBank、OMIM、GAD、PharmGKB等数据库搜索糖尿病肾病的相关靶点。运用STRING数据库构建蛋白互作网络,通过Cytoscape软件筛选出核心关键靶点。借助Metascape在线工具进行靶点的GO和KEGG通路富集分析。结果:共筛选15个知母、37个黄柏活性成分,92个知母、133个黄柏治疗糖尿病肾病的靶点,构建"药物-成分-靶点"网络。核心关键靶点通过调控炎症反应、氧化应激、晚期糖基化终末产物等相关通路发挥作用。结论:通过网络药理学方法初步揭示了知母-黄柏对糖尿病肾病具有多靶点、多通路的治疗作用,为后续的深入探究提供一定的思路。

番石榴叶总黄酮对胰岛β细胞胰岛素抵抗影响的实验研究

目的:观察番石榴叶总黄酮对HIT-T15胰岛β细胞胰岛素抵抗影响。方法:制备番石榴叶总黄酮(FSL)有效部位,通过HIT-T15胰岛β细胞生长曲线以及不同浓度葡萄糖(GLU)、FSL对HIT-T15胰岛β细胞增殖的影响确定FSL的加药时间、浓度和高糖浓度。然后测定在高糖环境下,FSL对HIT-T15胰岛β细胞胰岛素分泌、胰岛素受体m RNA和胰岛素受体底物1蛋白表达的影响。结果:50 mmol·L-1葡萄糖能够显著抑制HIT-T15胰岛β细胞增殖(P<0.01),50μg·m L-1 FSL能够促进高糖环境下HIT-T15胰岛β细增殖(P<0.01)、促进胰岛素分泌(P<0.05)、胰岛素受体m RNA表达(P<0.05)和胰岛素受体底物1蛋白表达(P<0.01)。结论:番石榴叶总黄酮能够促进高糖环境下HIT-T15胰岛β细胞胰岛素分泌,可能与其增加胰岛素受体m RNA的表达、胰岛素受体底物(IRS-1)蛋白表达有关。

以“从阴引阳”谈阴火升降之机

通过对李东垣的学术理论进行整理,尝试探索发掘阴火的含义。通过整理原文得出,阴火当为阴分之火,是谷气不在其位的病理状态,谷气和阴火实为一物之两态。阴火的产生则是由各种原因导致脾胃虚弱后,谷气下流于肾,激发相火而起,阴火再损伤脾胃,从而形成恶性循环。阴分常指五脏及附属器官、血脉等。通过整理李东垣遣方用药思路,总结出在经风药的升提、甘温药物补养脾肺后,阴火可恢复为阳气,经脏腑重新布散开来,不再为患。

从中医“气”的角度谈辟谷与胰岛素抵抗的关系

辟谷是中国古代的一种修炼养生术。通过辟谷疗法充养人体元气、健运脾肾之气、调整气机升降运动以达到轻身健体、延年益寿的效果。这正好与现代医学防治胰岛素抵抗要求限制饮食、减轻体重、改变饮食结构有异曲同工之妙。从调节肠道菌群这一研究热点出发,发掘辟谷疗法对胃肠微环境的影响在改善胰岛素抵抗方面具有广阔的研究前景和潜力。

基因组学技术推动中医药精准医学研究现状分析与展望

中医药具有精准医学的核心"个体化诊断和治疗"要素。基因组学技术在中医药基于体质的精准预防、个体化诊断与药物、针灸治疗、药物复杂性、包括中医药干预人体微生物环境等方面已经有较多应用。这与精准医学通过分析人群基因信息、生活方式、环境因素等了解疾病发生发展机制、针对相关靶点开发药物的方法及目标相匹配。未来将在整合各组学技术、结合中医药自身特色等方面应用于中医药精准医学研究,为实现中医药现代化及精准治疗的目标提供助力。

藏药珊瑚七十味丸中重金属含量及Hg元素化学形态研究

目的测定珊瑚七十味丸(ShanHuQiShiWei Pill,SHQS)中5种重金属元素的含量,并确定Hg元素存在的各种化学形态,为名贵藏药重金属含量及元素形态的确定提供准确的新型研究方法。方法采用强酸消解法处理珊瑚七十味丸,利用电感耦合等离子体原子发射光谱(Inductively coupled plasma atomic emission spectrometry,ICP-OES)测定样品中不同重金属元素的含量,同时采用X射线光电子能谱技术(Xray photoelectron spectroscopy,XPS)对样品中的Hg元素进行价态分析。结果不同批次的珊瑚七十味丸中Hg、As、Cr、Cd及Cu这5种重金属元素含量存在一定的差异;Hg元素存在游离Hg2+、HgS、HgO共3种形式,且差异较大。结论 ICP-OES和XPS对药物中的5种重金属含量和Hg元素的价态进行的检测和分析,得到的数据较为准确、可靠,能够为珊瑚七十味丸的临床使用提供数据上的参考依据,也为传统道地藏药材中的重金属含量检测及价态分析提供了一种新的研究思路和方法。

桥本氏甲状腺炎实验模型构建研究进展

桥本氏甲状腺炎是一种自身免疫性疾病,临床检查以血清中TPOAb和TgAb的滴度显着增加为主,病理表现为淋巴细胞浸润、正常的甲状腺滤泡变小萎缩、间质纤维化。桥本氏甲状腺炎的实验模型构建是研究疾病的发病原因、病理机制和治疗方法的基础,本文主要从构建实验性桥本氏甲状腺炎的动物选择、动物模型构建方法、动物模型评价指标和细胞实验选择及相关机制验证方面进行综述,通过比较相关造模方式的优缺点,为相关工作者的基础研究提供参考和借鉴。

糖痹康减轻糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经的氧化应激损伤

背景:中药复方糖痹康具有改善血糖、减轻糖尿病周围神经病变的作用,但其调控作用机制尚未清楚。目的:观察中药复方糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经氧化应激的影响,探索糖痹康减轻糖尿病周围神经病变的靶向调控机制。方法:30只SD大鼠随机分为正常组、模型组和糖痹康组,每组10只。后两组构建糖尿病周围神经病变模型,成模后分别灌胃生理盐水或糖痹康2.5 g/(kg·d),持续12周。给药后0,4,8,12周检测大鼠的体质量、空腹血糖水平;通过热板实验及Von Frey实验检测给药12周各组大鼠热痛阈及机械痛阈;给药12周后取材,取材前检测各组大鼠坐骨神经传导速度及坐骨神经血流速度,苏木精-伊红染色和透射电镜检测观察大鼠坐骨神经形态学变化,采用比色法和ELISA试剂盒分别检测坐骨神经中超氧化物歧化酶、丙二醛、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α表达,Western blot检测坐骨神经组织PI3K/AKT/FoxO1通路相关蛋白表达水平。结果与结论:①糖痹康组大鼠造模后4,8,12周血糖水平均显著低于模型组(P<0.05),模型组大鼠第12周体质量明显低于糖痹康组(P<0.05);②造模后12周,糖痹康组机械痛阈及热痛阈相较于模型组有明显改善(P<0.05),糖痹康组坐骨神经传导速度及血流速度均明显高于模型组(P<0.05);③糖痹康组神经纤维排列秩序、致密程度、髓鞘化程度均优于模型组;④ELISA及比色法结果显示,与模型组相比,糖痹康组坐骨神经组织中丙二醛、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α蛋白表达显著降低,超氧化物歧化酶蛋白表达升高(P<0.05);⑤Western blot结果显示,糖痹康组坐骨神经组织中PI3K、p-AKT/AKT、p-FoxO1/FoxO1蛋白表达量较模型组升高(P<0.05);⑥糖痹康可改善糖尿病大鼠坐骨神经功能、减轻坐骨神经氧化应激损伤,其机制可能与糖痹康调控PI3K/AKT/FoxO1通路相关。

糖耐康改善KKAy小鼠Toll样受体4通路及葡萄糖转运子4的作用机制研究

目的:观察中药糖耐康对KKAy小鼠血糖、体质量及Toll样受体4(TLR4)通路中白细胞介素6(IL-6)、核因子κB激酶β抑制物(IKKβ)及葡萄糖转运蛋白4(GluT4)影响,分析其改善2型糖尿病的可能作用机制。方法:选取无特定病原体(SPF)级自发性2型糖尿病动物KKAy小鼠及C57BL/6J小鼠,给予高脂饲料喂养,连续8周给药,评价血糖及体质量。并采用半定量酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血浆中IL-6及GluT4的水平。蛋白质印迹法检测肝组织TLR4蛋白表达、肌肉组织IKKβ蛋白表达水平。结果:中药糖耐康高剂量组,能够显著降低血糖水平(P<0.05),具有一定抑制体质量增长的趋势。同时能够下调IL-6水平,上调GluT4的水平(P<0.01,P<0.05),抑制TLR4及IKKβ蛋白表达(P<0.01,P<0.05)。结论:糖耐康可能通过下调脂多糖(LPS)介导的TLR4通路中关键炎症介质的水平,减轻低度炎症反应,在一定程度上抑制炎症级联效应,同时提高胰岛素信号转导受体后途径中GluT4的转位及活性水平,共同达到改善胰岛素抵抗状态的作用。

从"诸躁狂越,皆属于火"谈甲亢的中医药治疗

"诸躁狂越,皆属于火"是《黄帝内经》中病机十九条其中的一条,至今仍是分析疾病病机的重要依据。甲状腺功能亢进症(甲亢)是临床上常见的甲状腺疾病,其病机与脏腑之火密切相关,使用"诸躁狂越,皆属于火"的理论指导辩证论治甲亢在临床上广泛使用。脏腑气机不疏、情志不遂,内火遂生,可导致狂、躁等症状,火热日久可耗伤气阴,并可产生痰热、瘀血,但贯穿疾病始终的仍为火热,是疾病的起始因素,临床上从火论治甲亢,使用清热法、清热药治疗甲亢,在临床及动物实验方面均取得了明显的效果,再次证明了从"诸躁狂越,皆属于火"治疗甲亢的有效性。

基于网络药理学和分子对接探讨糖脉康颗粒治疗糖尿病周围神经病变的作用机制

目的通过网络药理学和分子对接的方法,探究糖脉康颗粒治疗糖尿病周围神经病变(DPN)的机制。方法利用检索中药系统药理学数据库及分析平台(TCMSP)对筛选糖脉康颗粒的组方药物的化学活性物质,药物靶标采用Swiss Target Prediction平台进行预测,并搜索Genecards数据库、OMIM数据库、TTD数据库和DisGeNET数据库预测DPN相关靶点。对药物与疾病的靶标基因取交集后采用Cytoscape软件构建活性成分–靶点网络图,并导入String数据库构建PPI网络,进行拓扑分析寻找核心基因。采用R软件进行基因本体(GO)注释和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析。结果糖脉康颗粒治疗糖尿病周围神经病变的关键化学成分为巴马汀、广玉兰内酯和11,14,17-三烯酸甲酯等;药物-疾病的共同靶点共331个,关键蛋白包括细胞肿瘤抗原p53、连环蛋白β-1(CTNNB1)、热休克蛋白90-α(HSP90AA1)等。GO富集分析显示,生物过程主要包括细胞对化学应激的反应、对营养素水平的反应和肽基酪氨酸磷酸化等,细胞组成主要包括膜筏膜微域和膜区等,分子功能主要包括蛋白酪氨酸激酶活性、细胞表面受体蛋白酪氨酸激酶活性和细胞表面受体蛋白激酶活性等。KEGG富集分析所涉及的通路有糖尿病并发症中的高糖基化终产物-高糖基化终产物受体信号通路、脂质和动脉粥样硬化、前列腺癌、表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂耐药性和癌症的中枢碳代谢等。分子对接结果显示,糖脉康颗粒中的7个关键活性成分与5个核心靶点蛋白的结合能均≤-5.0kcal/mol,说明成分和靶点蛋白结合性可能较好。结论利用网络药理学和分子对接揭示了糖脉康颗粒通过多种途径,多种信号通路作用于多种靶点发挥药效,为进一步阐释糖脉康颗粒治疗糖尿病周围神经病变的作用机制提供了依据。

藿香正气散治疗新型冠状病毒肺炎以消化道为首发症状患者的探讨

随着新型冠状病毒肺炎在全国乃至全世界的肆虐发展,病情的发展也变得较为复杂,在确诊的新型冠状病毒感染的肺炎患者中,发现有少数以消化道症状为首发表现。国家卫建委颁布的新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案(试行第五版)中指出,在医学观察期出现乏力伴胃肠不适,推荐使用中成药藿香正气散进行治疗。本研究从中医角度探讨了对于新型冠状病毒肺炎的认识,对藿香正气散用于确诊患者消化道症状中医药辅助治疗的可行性进行探讨,以期为冠状病毒的中医药治疗提供参考。

通淋汤对尿毒症患者血管钙化因子BMP-2,OPG表达的影响

目的探究通淋汤对尿毒症患者血管钙化因子骨形态发生蛋白-2(BMP-2)和骨保护蛋白(OPG)表达的影响。方法将80例尿毒症患者随机分为对照组与观察组,每组40例。对照组给予血液透析等常规治疗,观察组在对照组基础上给予通淋汤口服治疗,观察2组治疗效果、用药安全性及治疗前后血清BMP-2、OPG水平及营养指标变化。结果治疗组显效率显著高于对照组(P<0.05)。治疗后,2组血清BMP-2、OPG水平均显著降低(P均<0.05),且观察组水平显著低于对照组(P均<0.05);2组前白蛋白、白蛋白、转铁蛋白、总胆固醇及血红蛋白水平均显著升高(P均<0.05),且观察组上述指标水平均显著高于对照组(P均<0.05)。2组均未发现明显不良反应。结论通淋汤治疗尿毒症患者有利于抑制血管钙化因子BMP-2、OPG表达,改善患者营养不良状况,且安全性好,值得推广应用。