姜黄素对阿尔茨海默病小鼠海马InR和IGF1R表达的影响

目的观察姜黄素对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)模型APP/PS1双转基因小鼠胰岛素受体(insulin receptor,InR)和胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor 1 receptor,IGF1R)表达的影响。方法将3月龄的APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、阳性罗格列酮对照组(每日10 mg/kg)、姜黄素大(每日400 mg/kg)、中(每日200 mg/kg)、小剂量组(100 mg/kg),正常组为相同背景非转基因小鼠。灌胃3个月后,应用免疫组织化学和Western blot方法进行检测。结果 InR和IGF1R免疫组化染色,模型组小鼠大脑海马CA1区较正常对照组InR阳性细胞明显增加(P<0.01),姜黄素干预组有所恢复;而模型组小鼠大脑海马CA1区较正常对照组IGF1R阳性细胞明显减少(P<0.01),姜黄素干预组有所恢复。Western blot检测海马InR和IGF1R的蛋白表达结果与免疫组织化学检测结果一致。结论姜黄素可以使APP/PS1双转基因小鼠海马增加的InR和减少的IGF1R得以恢复,改善APP/PS1双转基因小鼠胰岛素信号转导。

通脉宁胶囊对AngⅡ诱导血管平滑肌细胞增殖及相关因素的影响

目的 :观察通脉宁全方及拆方药物血清对血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )诱导的血管平滑肌增殖及相关因素的影响。方法 :组织贴块法进行血管平滑肌细胞 (VSMC)培养 ,应用血清药理学方法 ,制备通脉宁全方、益气拆方、活血拆方三组药物血清 ;AngⅡ作为刺激因子。应用流式细胞仪检测VSMC周期 ,采用Fluo 3染色荧光探针标记测定钙离子荧光强度 ,检测NO含量及NOS酶活力。结果 :通脉宁全方及拆方药物血清可明显降低VSMC的S期数目百分比 ,增加G0 /G1期数目百分比 ;减弱细胞内钙离子荧光强度 ;增加细胞培养液中NO含量及NOS酶活力。通脉宁全方作用优于益气拆方和活血拆方。结论 :通脉宁药物血清抑制AngⅡ诱导的VSMC增殖与部分阻断细胞内的信号转导途径、增加NO含量及NOS酶活力等因素有关。

高血压患者高敏C反应蛋白与认知功能关系的研究

目的:研究高血压患者认知功能的发病机制。方法:采用横断面调查研究方法,对就诊高血压患者认知功能进行评价,同时检测患者的血清高敏C反应蛋白(HsCRP),并对二者的关系进行统计分析。结果:高血压患者高敏C反应蛋白与患者连线实验、STROOP TEST 2、年龄量表总分以及MQ值之间经相关性分析(P<0.05),有显著意义;高敏C反应蛋白正常组和高敏C反应蛋白异常组比较:STROOP TEST2、图像自由回忆、无意义图形再认方面评分存在显著差异(P<0.05),在联想学习,年龄量表总分、MQ值存在极显著差异(P<0.01)。高血压患者最高收缩压水平与HsCRP存在显著相关意义,且1级、3级之间HsCRP存在显著差异;结论:高血压患者脑内存在血管内炎性反应,血管内炎性反应可能是导致认知功能损害的机制,高血压损伤患者认知功能可能与脑内海马旁回、海马、边缘系统、双顶上区等部位的损伤有关。

姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠突触相关蛋白表达的影响

目的:观察姜黄素对AD模型APP/PS1双转基因小鼠突触相关蛋白突触后致密蛋白-95(postsynaptic densityprotein-95,PSD-95)和骨架蛋白Shank1表达的影响。方法:将3月龄的APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、罗格列酮阳性对照组(10 mg.kg-1.d-1)、姜黄素高、中、低剂量组(400,200,100 mg.kg-1.d-1),正常对照组为相同背景非转基因小鼠。灌胃3个月后,应用免疫组织化学和Western blot方法进行检测。结果:行为学检测,治疗组与模型组相比定位航行实验和空间探索实验存在不同程度的差异(P<0.01或P<0.05)。PSD-95和Shank1免疫组化,模型组小鼠大脑海马CA1区较对照组阳性细胞明显减少(P<0.01),姜黄素干预组有所恢复。Western blot检测海马PSD-95的蛋白结果显示,模型组小鼠海马PSD-95的蛋白表达条带均比对照组小鼠明显变细、颜色变浅(P<0.01);姜黄素干预组小鼠海马PSD-95的蛋白表达条带均明显增粗、颜色加深(P<0.05)。结论:姜黄素增加APP/PS1双转基因小鼠突触相关蛋白shank1和PSD-95表达,改善APP/PS1双转基因小鼠突触的结构和可塑性,提高空间学习记忆能力。

姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠Aβ及Aβ寡聚体表达的影响

目的运用免疫组织化学方法和蛋白质印迹(Western-blot)方法观察淀粉样前体蛋白/早老素1(APP/PS1)双转基因小鼠治疗前后β淀粉样蛋白42(Aβ42)、β淀粉样蛋白40(Aβ40)和可溶性Aβ寡聚体(ADDLs)的变化,判断姜黄素(curcumin)对Aβ级联反应的影响。方法将3月龄的APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、阳性对照组(罗格列酮组)及姜黄素大、中、小剂量组。灌胃3个月后,以免疫组织化学方法和Western blot方法检测Aβ42、Aβ40和ADDLs蛋白表达量的变化。结果免疫组织化学检测模型组小鼠海马Aβ40、Aβ42和ADDLs阳性细胞均较正常组增加,Aβ40和Aβ42相比,阳性细胞计数增加以Aβ42更加明显,各干预组小鼠海马Aβ40、Aβ42和ADDLs阳性细胞明显降低。Western blot检测模型组小鼠海马Aβ40、Aβ42和ADDLs蛋白表达比正常对照组明显增加(P<0.01);与模型组小鼠相比,虽然各干预组小鼠海马Aβ40、Aβ42和ADDLs蛋白表达均减少,罗格列酮组和姜黄素中剂量组小鼠海马Aβ40和Aβ42的蛋白表达显著减低(P<0.01);罗格列酮组小鼠海马ADDLs的蛋白表达减低显著(P<0.01),姜黄素大、中剂量组小鼠海马ADDLs的蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论姜黄素给药3个月能显著减少APP/PS1双转基因小鼠脑内海马CA1区Aβ40、Aβ42和ADDLs的表达,对Aβ42减低更为明显。其潜在的神经保护机制是否通过下调Aβ42和ADDLs的产生,增强Aβ42和ADDLs的降解影响Aβ级联反应,有待进一步研究。

通脉宁调控AngⅡ、LPC诱导血管平滑肌细胞c-fos、c-myc基因表达的研究

目的观察通脉宁胶囊对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、溶血磷脂酰胆碱(LPC)诱导的兔血管平滑肌细胞(VSMC)c-fos、c-myc癌基因表达的影响。方法组织贴块法培养兔主动脉平滑肌细胞,用AngⅡ、LPC诱导VSMC增殖,采用RT-PCR方法,观察通脉宁全方及益气拆方和活血拆方药物血清对AngⅡ、LPC诱导的VSMC c-fos、c-myc蛋白表达。结果AngⅡ、LPC组c-fos和c-myc蛋白表达增加,与空白组比较有显著性差异(P<0.01);通脉宁全方组、益气拆方组、活血拆方组均可使c-fos和c-myc的蛋白表达下调,与AngⅡ、LPC组比较有显著性差异(P<0.01);通脉宁全方组与益气拆方组、活血拆方组比较也有显著性差异(P<0.01)。结论通脉宁胶囊可下调AngⅡ、LPC诱导的VSMC c-fos、c-myc基因表达,而对VSMC增殖起到抑制作用。

姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠海马神经元ChAT表达的影响

目的观察淀粉样前体蛋白/早老素1(APP/PS1)双转基因小鼠海马CA1区神经元胆碱乙酰转移酶(ChAT)表达,评价姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆的影响。方法将3月龄的APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、罗格列酮组及姜黄素大、中、小剂量组,并以同月龄遗传背景相同的C57BL/6J小鼠作为正常对照组。各治疗组每天灌胃给药1次,连续灌胃3个月。应用跳台实验、免疫组织化学和蛋白质印迹(Western-blot)检测学习记忆能力和海马神经元ChAT的变化。结果与正常组小鼠相比,模型组小鼠潜伏时间显著缩短(P<0.01),与模型组小鼠相比,姜黄素各剂量组小鼠潜伏时间增加(P<0.05或P<0.01)。免疫组化检测,模型组小鼠海马CA1区ChAT阳性细胞较正常对照组明显减少(P<0.01),而姜黄素干预组可以使其不同程度地恢复。Western blot检测,模型组小鼠海马ChAT的蛋白表达条带比正常组小鼠明显变细、颜色变浅(P<0.01);姜黄素干预组小鼠海马ChAT的蛋白表达条带均明显增粗、颜色加深(P<0.05或P<0.01)。结论姜黄素能通过增加ChAT的蛋白表达,促进阿尔茨海默(AD)模型动物神经传导障碍,进而改善APP/PS1双转基因小鼠的学习记忆能力。

通脉宁胶囊对LPC诱导血管平滑肌细胞增殖及细胞周期的影响

目的 观察通脉宁胶囊不同剂量药物血清对溶血磷脂酰胆碱 (LPC)诱导的血管平滑肌细胞增殖活性及细胞周期的影响。方法 组织贴块法进行血管平滑肌细胞 (VSMC)培养 ,应用血清药理学的方法 ,LPC10 -8mol L作为刺激因子 ,将通脉宁胶囊分为大、中、小 3个剂量组。MTT法测定细胞增殖活性 ,流式细胞仪检测细胞周期。结果 通脉宁大、中、小剂量组可明显降低细胞的OD值呈剂量依赖性地抑制LPC诱导的VSMC增殖。明显降低细胞的S期数目百分比 ,增加G0 G1期数目百分比 ,使VSMC阻滞在G0 G1期 ,抑制细胞进入S期。结论 从细胞分子水平说明通脉宁胶囊主要是通过影响细胞内DNA合成 ,减少有丝分裂 ,增加G0 G1期数目百分比 ,减少S期数目百分比而发挥抑制VSMC增殖作用。

通脉宁对AngⅡ及LPC诱导的血管平滑肌细胞内钙超载的影响

目的 观察通脉宁全方及拆方药物血清对AngⅡ及LPC诱导的血管平滑肌细胞内钙超载的影响。方法 组织贴块法进行血管平滑肌细胞 (VSMC)培养 ,应用血清药理学研究的方法 ,AngⅡ1 0 - 6 mol/L、LPC 1 0 - 8mol/L作为刺激因子 ,制备通脉宁全方、益气拆方、活血拆方药物血清。采用Fluo 3染色荧光探针标记测定钙离子荧光强度。结果 通脉宁全方及拆方药物血清对AngⅡ及LPC诱导的VSMC内钙超载具有明显的干预作用 ,且通脉宁全方组的干预作用明显优于益气拆方组及活血拆方组。结论 通脉宁药物血清抑制AngⅡ及LPC诱导的VSMC增殖与部分阻断AngⅡ及LPC细胞内的信号转导途径有关 ,这可能是通脉宁抑制VSMC增殖的作用途径之一。