不同时期女性心血管疾病特点及中医药治疗探析

女性心血管疾病与其经、带、胎、产、绝经等独特生理因素有密切联系,故不同时期女性心血管疾病有不同的病因病机及临床特点。系统梳理女性不同时期的典型心血管疾病,针对各时期罹患高血压、冠心病、心律失常、心肌病等病证的发病特点,结合团队经验提出辨治方法。青年女性病证以邪实为主,治疗主要为攻邪兼以扶正;妊娠及产后女性病证以正虚为主,因虚致实,治疗以扶正为主兼以祛邪。更年期妇女病证因冲任不调、阴阳失调所致,调理冲任及阴阳可改善病证。绝经后女性病证多因正气不足、肾阴阳两虚,因虚致实,因此治疗多强调扶正补肾兼以攻邪。

基于心脉癥瘕谈慢性冠脉综合征的中医病因病机

慢性冠脉综合征的病机经历了从阳虚寒凝、痰瘀痹阻到瘀毒互结等的发展及演变。本文从慢性冠脉综合征的病理基础出发,认为慢性冠脉综合征阻塞性冠心病、非阻塞性冠心病可统一对应中医“心脉癥瘕”,基于癥瘕的病因病机特点,同时结合慢性冠脉综合征现代证候学研究,本文进一步提出虚为心脉癥瘕之本,痰为心脉癥瘕之始,瘀为心脉癥瘕之基础,毒致心脉癥瘕之变。因虚可致痰、瘀内生,痰瘀互结日久酿毒,虚、痰、瘀、毒的互结互化构成了本病的发生及演变基础。在治疗方面,则应参考治疗癥瘕的温通之法,首辨气血之虚实,后辨痰、瘀、毒之偏重深浅,从补虚扶正、化痰降浊、活血化瘀、解毒稳脉四方面,结合病机特点,随证侧重用药治之。

游戏-教育交互模式在中医药教学中的应用

本文在论述游戏与教育相结合研究背景的基础上,探讨游戏-教育交互模式的内涵,并基于社会角色理论、沉浸理论、叙事医学教育分析了中医药学科学习者、学科知识、医学案例与游戏角色、关卡、剧情产生交互的理论基础,论证游戏-教育交互模式应用于中医药教育的适配性。同时,以角色扮演游戏(RPG)“名老中医之路”为例,展示了游戏-教育交互模式的构建路径,包括:以RPG为框架选择游戏形式、以中医药教育为核心找准游戏定位、以游戏-教育-参与者三方交互为准绳明确设计原则。随着信息化科技的进一步发展与应用,教育-游戏交互模式或能更具可操作性与可推广性,成为中医药教学新型模式,对传统教学模式进行有效的补充。

心脉通胶囊治疗轻、中度原发性高血压(瘀血阻滞兼阴虚阳亢证)的有效性和安全性的随机、双盲双模拟、多中心临床试验评价

目的探讨心脉通胶囊在轻、中度原发性高血压(瘀血阻滞兼阴虚阳亢证)的有效性及安全性。方法采用随机、双盲双模拟、多中心临床试验方法,选择黑龙中医药大学附属第一医院、黑龙江中医药大学附属第二医院、洛阳市中医院、北京中医药大学第三附属医院、山东中医药大学第二附属医院、南阳市中医院六家医院2016年12月30日至2020年4月18日轻、中度原发性高血压(瘀血阻滞兼阴虚阳亢证)患者235例为研究对象,采用随机数表法分为两组。对照组59例采用心可舒片治疗,试验组176例采用心脉通胶囊治疗,两组均完成4周治疗,比较两组血压实测值变化、中医证候评分、血压达标率及药物安全性。结果用药4周后,试验组收缩压和舒张压降低值大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗前中医证候积分比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组治疗12周后证候积分均降低,观察组头痛、眩晕、胸闷、心悸、手足麻木评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组用药过程中不良事件总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论心脉通胶囊用于轻、中度原发性高血压(瘀血阻滞兼阴虚阳亢证)患者中,能降低患者收缩压和舒张压,降低中医证候积分,且药物安全性较高,值得推广应用。

三七三醇皂苷通过PI3K/Akt通路减轻大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的研究

目的探讨三七三醇皂苷(PTS)对心肌缺血/再灌注(I/R)大鼠心肌功能及磷酸肌醇—蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路的影响。方法将40只雄性Wistar大鼠随机数字表法分为5组,每组8只。对照组、I/R组、PTS组、LY294002组、LY294002+PTS组,通过Langendorff离体心脏灌流装置建立心脏缺血/再灌注模型,收集不同时刻的灌流液测量心肌酶学指标(CK-MB、LDH),并记录不同时刻左心室血流动力学参数(HR、LVESD、LVEDD、LVDP、±dp/dtmax);Western-blot检测心肌组织中Akt、p-Akt、GSK-3β、p-GSK-3β的表达,免疫组化检测Bax、Bcl-2、Caspase-3的表达。结果(1)血流动力学参数:对照组HR不同时点无明显变化(P>0.05),其余各组均不同程度上升,且除对照组外其余4组在再灌注75 min时无明显差异(P>0.05)。对照组不同时点LVESP、LVEDP、LVDP、±dp/dt max无明显变化,其余各组随时间延长出现不同程度下降。再灌注75 min时,PTS组明显低于模型组(P<0.05),而LY294002+PTS组与模型组无明显差异,与PTS组差异显著(P<0.05)。(2)CK-MB、LDH:对照组不同时点无显著变化,其余各组再灌注后心肌酶水平均较缺血30 min有显著提升(P<0.05)。各组平衡20 min时无明显差异(P>0.05);局部缺血30 min时,各组CK-MB无统计学差异(P>0.05),而各组LDH较对照组有所升高(P<0.05);再灌注15min、75 min时,各组均较对照组明显升高,PTS组明显低于模型组,LY294002+PTS组高于PTS组(P均<0.05)。(3)Akt、pAkt、GSK-3β、pGSK-3β的表达:缺血再灌注损伤后,各组心肌组织Akt、GSK-3β表达无统计学差异(P>0.05),pAkt、pGSK在PTS组中表达较模型组有显著提高(P<0.05),在应用LY294002的2组中表达较模型组显著下降(P<0.05),且LY294002+PTS与PTS组差异存在统计学意义(P<0.05)。(4)Bax、Bcl-2、Caspase-3的表达:模型组Bax、Caspase-3显著高于对照组(P<0.05),PTS与LY+PTS 2组Bax、Caspase-3表达低于模型组(P<0.05)。对照组Bcl-2强阳性,模型组显著低于对照组(P<0.05),PTS组较模型组显著提高(P<0.05),LY294002+PTS组显著低于PTS组(P<0.05)。结论PTS可改善心肌I/R大鼠离体心脏功能,可能与其调节PI3K/Akt信号通路有关。

三七三醇皂苷对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的作用研究

目的建立Langendorff离体心脏局部缺血再灌注(IR)模型,探讨三七三醇皂苷对大鼠离体心脏IR损伤的作用。方法将40只健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组、IR模型组和低、中、高剂量三七三醇皂苷组(PTSL组、PTSM组、PTSH组),各8只。对照组只穿线不结扎冠状动脉左前降支近分支,以K-H液持续灌流105 min;IR模型组穿线结扎冠状动脉左前降支近分支处30 min后开放结扎线,K-H液复灌75 min;PTSL组、PTSM组、PTSH组穿线结扎冠状动脉左前降支近分支处30 min后,分别给予含5、10、20 mg/L三七三醇皂苷的K-H液复灌75 min。收集5组大鼠平衡灌注20 min、局部缺血30 min和再灌注15、75 min的灌流液,检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)水平。比较5组平衡灌注20 min、局部缺血30 min和再灌注15、75 min通过多导生理仪记录的心脏血流动力学参数水平,包括心率、左心室收缩末压(LVESP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左心室发展压(LVDP)、左心室内压上升/下降最大速率(±dp/dt max),以及LVESP、LVDP、+dp/dt max与平衡末差值占比。结果IR模型组再灌注15、75 min灌流液中CK-MB和LDH水平均高于对照组[CK-MB:(234±51)U/L比(12±6)U/L,(203±63)U/L比(14±3)U/L;LDH:(63.9±9.4)U/L比(6.2±4.6)U/L,(52.1±9.5)U/L比(6.3±4.8)U/L];PTSL、PTSM、PTSH组再灌注75 min灌流液CK-MB水平和再灌注15 min LDH水平均低于IR模型组,PTSL、PTSH组再灌注75 min LDH水平均低于IR模型组(均P<0.05)。对照组不同时点灌流液心肌酶指标水平比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。与对照组比较,IR模型组再灌注15、75 min LVDP、+dp/dt max均降低,LVEDP、-dp/dt max以及LVESP、LVDP、+dp/dt max与平衡末差值占比均升高(均P<0.05)。与IR模型组比较,PTSL组、PTSM组、PTSH组再灌注15 min LVEDP,PTSL组再灌注75 min LVEDP均降低,PTSM组再灌注75 min LVDP、+dp/dt max均升高,局部缺血30 min、再灌注75 min-dp/dt max均降低,PTSL组、PTSM组、PTSH组LVESP、LVDP、+dp/dt max与平衡末差值占比均显著降低(均P<0.05)。PTSL组、PTSH组心率在平衡灌注20 min,PTSM组在平衡灌注20 min、局部缺血30 min和再灌注15、75 min均高于IR模型组(均P<0.05)。结论在大鼠离体心脏局部IR损伤模型中,三七三醇皂苷具有减少心肌酶的释放、减轻左心室收缩和舒张功能障碍的作用。

基于Notch通路研究蓟黄素对心肌缺血再灌注大鼠的心肌保护作用

目的探讨蓟黄素对心肌缺血再灌注大鼠Notch信号通路及心肌保护的作用。方法50只Wistar大鼠随机分为假手术组、心肌缺血再灌注大鼠模型组、蓟黄素组(灌胃100 mg/kg蓟黄素)、抑制剂组、蓟黄素+抑制剂组,每组10只。测定大鼠心律失常发生率、持续时间及大鼠左心室舒张末期压力(left ventricular end-diastolic pressure,LVEDP)、左心室收缩压(left ventricular systolic pressure,LVSP)、左心室内压力下降最大速率(left ventricular pressure drop,LV-dp/dtmax)、左心室内压力上升最大速率(left ventricular pressure rise,LV+dp/dtmax);染色法测定大鼠心肌梗死百分比;酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定大鼠血清白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及心肌组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)浓度;实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检大鼠心肌组织Notch1、Hes1 mRNA表达;蛋白质免疫印迹检测大鼠心肌组织Notch1、Hes1蛋白表达。结果与模型组相比,蓟黄素组大鼠心律失常发生率及持续时间、心肌梗死百分比、心功能、血清炎症因子、心肌组织MDA均降低,心肌组织SOD、GSH-Px及Notch1、Hes1蛋白及mRNA表达水平升高(P<0.05),Notch通路抑制剂可逆转蓟黄素对心肌缺血再灌注大鼠心肌的保护作用。结论蓟黄素通过激活Notch通路改善心肌缺血再灌注大鼠的心肌损伤。

PCI术后益气活血中成药联用西药患者心血管相关指标Meta分析

目的系统评价益气活血中成药联合西药治疗冠心病经皮冠状动脉介入(PCI)后患者的心血管指标变化,为冠心病PCI术后患者的临床治疗提供指导意见。方法采用Meta分析对数据库中从建库时间至2016年5月发表的益气活血中成药联合西药治疗冠心病PCI术后患者的随机对照试验进行系统评价。评价指标包括血管再狭窄例数和检测指标[心肌钙蛋白I(CTn I),氨基末端B型利钠肽原(NTpro-BNP),总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]。结果纳入27篇文献,共4 873例患者。各研究基线资料具有可比性,均报道为随机方法。荟萃分析结果显示,益气活血中成药联合常规西药治疗组患者的下列指标明显优于常规西药单独治疗组:再狭窄发生例数[OR=0.61,95%CI(0.46,0.81),Z=3.2.82,P=0.005],NTpro-BNP[MD=-202.6,95%CI(-294.20,-111.72),Z=4.36,P<0.0001],TC[MD=-0.59,95%CI(-0.81,-0.36),Z=5.05,P<0.00001],TG[MD=-0.37,95%CI(-0.68,-0.06),Z=2.34,P=0.02],HDLC[MD=0.09,95%CI(-0.01,0.19),Z=1.72,P=0.09],LDLC[MD=-0.62,95%CI(-0.97,-0.27),Z=3.49,P=0.0005]。结论益气活血中成药联合西药明显优于常规西药单独治疗冠心病PCI术后患者。

158例慢性心力衰竭患者一年再住院的影响因素分析

目的:探讨液体潴留等各种可能因素对慢性心力衰竭患者一年再住院的影响。方法:连续收集并整理了2003-01-01至2004-12-31因慢性心力衰竭住我院的患者158例,随访记录人口学资料、心脏功能、住院原因、治疗情况、治疗依从性包括门诊随诊情况及出院一年内的再住院,以一年内心力衰竭再住院为研究终点,通过多因素Logistic回归分析,探讨以上各因素与再住院的关系。结果:液体潴留、不定期门诊随诊是再住院的危险因素。不定期门诊随诊的患者比定期门诊随诊的患者再住院危险性增加了13.471倍(OR=14.471,95%的CI为6.332～37.611,P<0.001)。有液体潴留诱因的患者比没有液体潴留的患者再住院危险性增加了1.645倍(OR=2.645,95%CI为1.184～6.345,P<0.05)。年龄、性别、疾病史、肌钙蛋白T、左心室射血分数、院外规律服药等因素对再住院无影响(P>0.05)。结论:有效的疾病管理模式如提高患者治疗依从性包括定期门诊随诊、控制液体潴留等可能降低慢性心力衰竭患者的再住院。

连夏配方颗粒对心肌梗死后大鼠心梗周围区神经生长因子mRNA、酪氨酸激酶受体A mRNA表达的影响

目的观察连夏配方颗粒对心肌梗死后大鼠心梗周围区心肌组织神经生长因子(nerve growth factor,NGF)mRNA、酪氨酸激酶受体A(tyrosine kinase receptor A,Tr KA)mRNA表达的影响。方法将90只清洁级健康7周龄Wistar雄性大鼠随机分为假手术组、心梗模型组、美托洛尔组、连夏配方颗粒高、中、低剂量(189.00、94.50、47.25 mg/kg)组。各组均结扎左冠状动脉前降支以复制心肌梗死大鼠模型,假手术组只穿线,不结扎。假手术与心梗模型组大鼠予生理盐水,余各组予相应实验药物;连续灌胃给药30天,采用Real-time RT-PCR方法检测心梗周围区NGF mRNA、TrKA mRNA表达水平。结果与假手术组比较,心梗模型组大鼠心梗周围区心肌组织NGF mRNA、Tr KA mRNA表达均明显增高(P<0.01);与模型组比较,连夏配方颗粒高、中、低剂量组大鼠心梗周围区NGF mRNA表达均明显降低(P<0.01);连夏配方颗粒高、中剂量组大鼠心梗周围区Tr KA mR-NA表达均明显降低(P<0.01);与美托洛尔组比较,连夏配方颗粒高剂量组大鼠心梗周围区NGF mRNA表达明显降低(P<0.05)。结论连夏配方颗粒可显著降低心肌梗死后大鼠心梗周围区心肌组织NGF mRNA、Tr KA mRNA的表达,达到改善心肌梗死后大鼠心梗周围区自主神经重构的作用。

载脂蛋白B水平与急性心肌梗死患者预后的相关性分析

目的:评价载脂蛋白B(ApoB)水平对急性心肌梗死(AMI)患者1年预后的影响。方法:回顾分析107例住院的急性心肌梗死患者临床资料,根据ApoB是否大于980mg/L,分成ApoB升高组(n=44例)和ApoB正常组(n=63例)。对所有患者进行为期1年的临床随访,记录代谢指标,治疗依从性及心脏不良事件(再发心肌梗死、心绞痛、心源性死亡,缺血性卒中)发生情况。结果:ApoB升高组糖尿病患者所占比例高于ApoB正常组(40.9%与22.2%),差异有统计学意义(P=0.038),而两组患者在年龄,性别,高血压史,入院时心功能分级,总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平、冠心病治疗药物和治疗依从性等方面差异无统计学意义(P>0.05)。1年随访发现,ApoB升高组心脏不良事件发生率高于ApoB正常组(52.3%与31.7%),差异有统计学意义(P=0.033)。其中,ApoB升高组心绞痛发生率显著高于ApoB正常组(45.5%与27.0%),差异有统计学意义(P=0.048)。结论:高载脂蛋白B水平是AMI患者心脏不良事件的预测因素,提示积极控制ApoB可能改善AMI患者预后。

大鼠Langendroff离体心脏局部缺血再灌注模型建立及功能评价

目的建立大鼠Langendorff离体心脏局部缺血再灌注模型的方法并进行功能评价。方法将26只Wistar大鼠随机分成2组,对照组(control,n=12)和模型组(model,n=14)。两组均建立标准的Langendorff离体心脏灌注模型:K-H液持续灌注(95%O2+5%CO2过饱和,左心室插入球囊压力管),K-H液持续灌注平衡20min后对照组K-H液持续灌注105 min;模型组同对照组平衡20 min后穿线结扎冠状动脉左前降支第一对角支下缘部位,造成局部停灌(缺血)30 min,而后剪断结扎线复灌(再灌注)75 min。伊文思蓝、TTC染色观察心肌梗死、缺血面积;记录左心室压力及心率变化过程,比较各组平衡20 min、局部缺血30 min、再灌15 min、再灌30 min、再灌75 min的血流动力学指标及灌流液中肌酸激酶(creatine kinase,CK)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)漏出量。结果对照组血供正常,模型组局部缺血、梗死明显;对照组、模型组平衡末心肌酶学及血流动力学各参数无明显差异(P>0.05),模型组局部缺血、再灌注各个观测时刻心肌酶学及血流动力学参数均与对照组有显著差异(P<0.05),说明模型组经历局部缺血、再灌注损伤,心肌酶漏出明显升高,心脏收缩功能、舒张功能受损,心肌耗氧量升高。结论大鼠Langendorff离体心脏局部缺血灌注模型稳定可靠,掌握制作要点及注意事项后,可顺利快速地成功制备,为心肌局部缺血再灌注损伤的研究提供更接近临床疾病状态的实验途径。

连夏配方颗粒对心梗后大鼠心肌组织酪氨酸羟化酶mRNA、乙酰胆碱酯酶mRNA表达的影响

目的观察连夏配方颗粒对心肌梗死后大鼠心梗周围区心肌组织酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)mRNA与乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,Ach E)mRNA表达的影响。方法将90只健康雄性成年Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、美托洛尔组、连夏配方颗粒189.00 mg/kg、94.50 mg/kg、47.25 mg/kg组;假手术组只穿线,不结扎左冠状动脉前降支,余各组均结扎左冠状动脉前降支以建立急性心肌梗死大鼠模型;假手术与模型组大鼠予生理盐水灌胃,余各组均予相应实验药物;连续给药30天后,采用Real-time RT-PCR方法检测心梗周围区心肌TH mRNA与Ach E mRNA表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠心梗周围区心肌组织TH mRNA与Ach E mRNA表达均明显增高(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,连夏配方颗粒189.00、94.50、47.25 mg/kg组大鼠心梗周围区TH mRNA与Ach E mRNA表达均明显降低(P<0.05或P<0.01);与美托洛尔组比较,连夏配方颗粒189.00 mg/kg组大鼠心梗周围区TH mRNA与Ach E mRNA表达均明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论连夏配方颗粒可显著降低心肌梗死后大鼠心梗周围区心肌组织TH mRNA与Ach E mRNA的表达,达到改善心肌梗死后大鼠心梗周围区自主神经重构的作用。

活血化瘀法对急性心肌梗死大鼠CD_(34)、血管内皮生长因子阳性细胞的影响

目的研究活血化瘀法对大鼠心肌组织微环境中CD34、血管内皮生长因子(VEGF)的影响,探讨其治疗急性心肌梗死的机制。方法 Sprague-Dawley大鼠32只随机分为假手术组(n=8)、模型组(n=8)、中药+粒细胞集落刺激因子(G-CSF)组(n=8)和G-CSF组(n=8)。各组均于造模3 h后给予相应药物,连续6 d,第7天处死取材。苏木素-伊红(HE)染色观察病理形态,免疫组化染色检测梗死心肌边缘区CD34、VEGF、Ki-67阳性细胞表达。结果模型组、中药+G-CSF组和G-CSF组CD34、VEGF、Ki-67阳性细胞表达均高于假手术组(P<0.05);中药+G-CSF组、G-CSF组高于模型组(P<0.05);中药+G-CSF组CD34、VEGF阳性表达高于G-CSF组(P<0.05),两组Ki-67阳性细胞表达无显著性差异(P>0.05)。结论活血化瘀法能够提高CD34和VEGF的表达,其作用优于单独使用G-CSF,可以有效治疗急性心肌梗死。

李平教授清心化痰法治疗功能性室性心律失常经验

李平教授在中医经典理论心"主血脉—神明"论的指导下,经过二十余年的临床实践和临床研究,由温胆汤化裁,从"痰阻脉络""热扰心神"的病理环节出发,确立清心化痰法,研制出具有清热化痰、宁心安神作用的"连夏宁心方",治疗功能性室性期前收缩二联律、三联率疗效理想,并且显著改善了痰热内扰致心悸、胸闷、胸痛、失眠、口干、口苦、头晕等症状,值得临床推广。

PI3K/Akt信号通路与心血管疾病关系的研究进展

磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol-3-kinase/protein kinase B, PI3K/Akt)信号通路具有广泛的生物学效应,在信号转导中起着重要作用。近年其在心血管疾病发生发展中的作用越来越受到关注,本文从PI3K/Akt的分子生物学特点、与心血管疾病的关系以及基于PI3K/Akt信号通路探讨中医药对心血管疾病的干预作用进行综述,以期为心血管疾病的防治、临床与基础研究提供新思路。

从风论治心律失常

心律失常发作没有固定时间,突发突止,以心中悸动不宁、变化迅速、脉象节律不齐为主症,根据中医学取象比类思维,心律失常病症与风邪主动、善行而数变的致病特点相似,可类比为风象。笔者团队认为风邪是心律失常发病的重要因素,提出从风论治心律失常,倡导"心风"论。"心风"包含外风和内风。外风流窜,扰动神明,发为心悸,同时脏腑气血逆乱,阳气亢逆,引动内风,蒙蔽心神,亦可导致心悸。从风辨治心律失常,强调外风宜散,内风宜熄,病程较久者善用虫药搜风通络,以达临床疗效。

龙牙楤木总皂苷及楤木皂苷A对缺氧/复氧诱导的AC16心肌细胞铁死亡的影响

目的探讨龙牙楤木总皂苷及其组分楤木皂苷A能否减轻缺氧/复氧诱导的AC16心肌细胞铁死亡。方法将AC16细胞随机分为正常组、模型组、龙牙楤木总皂苷组、楤木皂苷A组。通过缺氧24小时、复氧12小时建立AC16细胞缺氧/复氧模型,药物组缺氧/复氧损伤前6小时给予药物处理。CCK-8检测细胞存活率,乳酸脱氢酶检测试剂盒检测细胞受损程度,透射电子显微镜观察AC16细胞形态学变化,比色法检测Fe^(2+)水平,酶联免疫试剂盒检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)和谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平,DHE荧光探针检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,蛋白免疫印迹法检测铁死亡相关蛋白p53、SLC7A11、SAT1、GLS2的表达。结果与正常组相比,模型组AC16细胞存活率明显下降,细胞受损程度明显升高,细胞内的线粒体皱缩、内嵴增厚、膜电子密度增高,Fe^(2+)、ROS、MDA水平明显上升,GSH活力明显下降,铁死亡相关蛋白p53、SAT1、GLS2蛋白表达明显升高,SLC7A11蛋白表达明显降低,以上结果差异均具有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,龙牙楤木总皂苷组及楤木皂苷A组AC16细胞存活率明显上升,细胞受损程度明显降低,细胞内的线粒体形态趋于正常状态,Fe^(2+)、ROS、MDA水平下降,GSH活力升高,铁死亡相关蛋白p53、SAT1、GLS2蛋白表达下调,SLC7A11蛋白表达上调,以上结果差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论龙牙楤木总皂苷及其组分楤木皂苷A能减轻缺氧/复氧诱导的AC16心肌细胞铁死亡,其机制可能与抑制p53、SAT1、GLS2蛋白表达,上调SLC7A11蛋白表达有关。

淫羊藿苷对心血管疾病保护作用研究进展

淫羊藿苷是淫羊藿的主要药用成分,既往研究证明其对骨代谢疾病、生殖系统疾病、免疫系统疾病、神经系统疾病具有保护作用。心血管疾病是人类健康的一大杀手,近年来,越来越多的研究证实了淫羊藿苷对心血管疾病亦具有保护作用,包括:对心肌的保护作用、对血管的保护作用、抗高血压肾损伤、抗脑血管重构。其中,淫羊藿苷能够改善心室重构,抗心肌细胞凋亡,抗心衰,抗心肌缺血再灌注损伤,还能够促进胚胎干细胞向心肌细胞的分化,从而对损伤的心肌发挥保护作用。淫羊藿苷对血管的保护作用包括了保护内皮细胞和平滑肌细胞,调节血管舒缩,刺激血管新生。现结合国内外文献对其具体作用及机制进行综述。

大血藤总酚酸调控微小RNA-155对缺氧复氧心肌细胞的细胞活性凋亡及氧化应激的影响

目的探讨大血藤总酚酸对缺氧复氧心肌细胞的细胞活性凋亡及氧化应激的影响及分子机制。方法2019年12月至2020年8月,心肌细胞H9C2分为对照组(正常培养)、缺氧复氧组(缺氧4 h,复氧12 h)、大血藤总酚酸低、中、高浓度组(造模前分别用12.5、25.0、50.0 mg/L大血藤总酚酸培养2 h,然后进行缺氧复氧处理)、大血藤总酚酸-H+NC组(将miR-155模拟物阴性对照转染至H9C2中再用50.0 mg/L大血藤总酚酸培养,最后进行缺氧复氧处理)、大血藤总酚酸-H+miR-155 mimic组(将miR-155模拟物转染至H9C2中再用50.0 mg/L大血藤总酚酸培养,最后进行缺氧复氧处理)。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测微小RNA-155(miR-155)表达水平;MTT法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹法(Western blotting)检测蛋白表达;试剂盒检测细胞培养液中肌酸激酶、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛含量。结果缺氧复氧处理的心肌细胞中miR-155表达水平升高,细胞吸光度降低,心肌细胞凋亡率升高,活化胱天蛋白酶-3(cleaved-caspase-3)表达水平升高,胱天蛋白酶-3前体(pro-caspase-3)表达水平降低,心肌细胞中肌酸激酶、LDH、丙二醛含量升高(P<0.05)。大血藤总酚酸中、高浓度处理后缺氧复氧诱导的心肌细胞中miR-155表达水平降低,细胞吸光度升高,心肌细胞凋亡率降低,cleaved-caspase-3表达水平降低,pro-caspase-3表达水平升高,心肌细胞中肌酸激酶、LDH、丙二醛含量降低,且呈浓度依赖性(P<0.05);而大血藤总酚酸低浓度组各数据无显著变化。过表达miR-155可逆转大血藤总酚酸对缺氧复氧诱导的心肌细胞活性、凋亡[(22.73±0.58)%比(13.55±0.33)%,P<0.05]和肌酸激酶[(79.19±2.78)U/L比(41.22±2.31)U/L,P<0.05]、LDH[(44.20±2.80)U/L比(24.77±2.46)U/L,P<0.05]、丙二醛[(24.05±1.28)μmol/L比(12.73±0.59)μmol/L,P<0.05]含量的影响。结论大血藤总酚酸可能通过下调miR-155抑制缺氧复氧心肌细胞的凋亡及氧化应激。