竹红菌甲素对肿瘤细胞光动力作用和体内代谢的研究

竹红菌甲素(Hypocrellin A,HA)合并照光,对HeLa细胞有明显的杀伤作用。可使红细胞产生溶血和K^+释放。使红细胞膜ATP酶和乙酰胆碱脂酶失活。使肝癌细胞线粒体和微粒体膜脂质过氧化作用增加。体内应用HA合并照光,使S-180小鼠肿瘤产生光敏反应,但持续时间不长,一定时间后肿瘤复发。S-180小鼠静注[^(99m)TC】—HA,t1/2α,5.5分钟,t1/2β,231分钟。以肝脏内HA浓度最高,依次为脾、肺、肾、瘤、心、皮肤、肌肉、胃和脑。静注HA后第6小时,光敏反应最显著,24小时后光敏反应基本消失。HA合并照光,使肝癌细胞DNA断链,DNA修复缓慢,50分钟内未完全修复。

二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌前病变中c－myc、N－ras和γ－GT酶表达的相关性研究

本文应用ｃＤＮＡ－ＲＮＡ原位杂交技术和组织化学方法，观察了二乙基亚硝胺（ＤＥＮＡ）诱发大鼠肝癌前病灶中ｃ－ｍｙｃ、Ｎ－ｒａｓ癌基因和γ－ＧＴ酶的表达。结果表明，ｃ－ｍｙｃ、Ｎ－ｒａｓ的过度表达出现于早期增生的小肝细胞以及变异肝细胞灶、增生结节和腺瘤中，γ－ＧＴ酶出现稍晚（诱癌６周），起初在病变中的分布与癌基因相似，而在诱癌１２周后，酶改变病灶数较癌基因要多。提示两者表达有相关住，癌基因激活可能诱导γ－ＧＴ酶的表达，而且一旦γ－ＧＴ基因启动后，则可能不受癌基因活动的影响，同时也表明，并非所有γ－ＧＴ酶异常细胞都具有癌变倾向。

快中子及X射线诱导人直肠癌细胞凋亡及相关基因表达的研究

目的：研究及探讨快中子及X射线诱导人直肠癌细胞凋亡及其相关基因表达。方法：不同剂量X射线（0、2、4、6、8、10Gy）及具有同等放射生物学效应的相当于X射线1／3剂量的不同剂量快中子（0、0．67、1．34、2．01、2．68、3．34Gy）照射细胞，于37℃孵育6小时24小时48小时72小时后，进行Hoechest 33 342荧光染色，观察细胞凋亡形态并计数凋亡指数AI（凋亡细胞的百分数）；用电子显微镜观察凋亡细胞特有的形态学特征；此外，我们分别对不同剂量（0、2、4、6、8、10Gy） X射线及快中子（0、0．67、1．34、2．01、2．68、3．34Gy）照射后24小时的细胞用免疫组化方法进行基因表达（p53及bcl－2）的检测。结果：不同剂量X射线和快中子照射的细胞凋亡指数随着照射剂量和受照时间的延长而逐渐增加，在同一时间点，快中子诱导的细胞凋亡水平明显高于X射线；不同剂量X射线照射后的细胞，较阳性对照组，p53基因表达下调明显，bcl－2基因表达下调不明显；不同剂量快中子照射后的细胞，p53及bcl－2基因表达下调均不明显。结论：高能X射线和快中子诱导人直肠癌细胞的凋亡具有明确的时间－剂量相关性，随着受照后时间的延长和剂量的逐渐增大，凋亡指数渐趋升高，无明显变缓之势；快中子照射人直肠癌细胞。

4种不同检查方法在宫颈癌筛查中的临床应用价值

目的：了解4种不同检查方法在宫颈癌筛查中的临床应用价值。方法：采用第二代杂交捕获技术（hyhrid capture 2，Hc—Ⅱ）检测13种高危型人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）、薄层液基细胞学技术（Liquid—hased cytologytest，LCT）检测宫颈脱落细胞、醋酸肉眼检查（visual inspection with acetic acid，VIA）和阴道镜检查4种方法对2004年11月～2004年12月深圳南山区华侨城区域15～59岁有性生活女性共1137例进行盲法同步宫颈癌筛查。对阴道镜检查异常或可疑异常者行阴道镜下直接活检；对HPV阳性并且LCT≥未明确诊断意义的不典型鳞状上皮细胞（atypical squamous cells of undetetemined sign，Ascus），或HPV阴性但LCT≥低度鳞状上皮内病变（low grade squamous intraepithelial lesion，LSIL）的妇女再次行阴道镜下活组织病理学检查，以病理结果作为验证4种检查方法的金标准。结果：共取病理122例。病理结果证实该人群中无宫颈癌病例：子宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithlial neoplasia。CIN）Ⅲ级3例，CINⅡ级11例，CINⅠ级36例；慢性宫颈炎和鳞状上皮化生69例；正常宫颈3例。人群的高危HPV总检出率为14．0％；LCT阳性率为12．6％；VIA阳性率为12．5％；阴道镜阳性率为13，6％。随宫颈病变级别升高，高危HPV感染率及LCT阳性率均呈趋势性增加（P〈0．005）；VIA和阴道镜阳性率在各级宫颈病变中无统计学差异，但在宫颈病变组阳性检出率明显高于正常宫颈组。高危HPV对宫颈高度病变的敏感性、特异性、准确性、阳性预测值、阴性预测值、阳性似然比和阴性似然比分别为100％、87．1％、87.3％、8．8％、100％、7．6％和0；LCT以上各指标分别为92．9％、88．4％、88．5％、9．1％、99．9％、8．0％和8．0％；VIA以上各指标分别为35．7％、96．0％、95．3％、10．0％、99．2％、8．9％和67．0％；阴道镜以上各指标分别为50．0％、86．8％、86．4％、4．5％、99．3％、3．8％和58．0％。结论：高危HPV检测和LCT检查均为目前宫颈癌筛查较好的方法，VIA和阴道镜检查敏感性较差，漏诊率高，不适合大范围筛查，但二者阴性预测值均较高，可应用于临床病例诊断。

模糊状态风险分析的广义Logistic回归理论与应用(4)——广义无条件与条件Logistic回归模型

本文发展了广义风险函数 ,用于Logistic回归模型 ,通过条件分量分析和实际应用 ,提出了“微弱相关影响因素”交互效应的“非线性放大作用”概念 。

大鼠实验性肝癌最早可测的分子标志

作者应用原位杂交技术对大鼠肝组织在二乙基亚硝胺（ＤＥＮＡ）诱癌过程中Ｎ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ的表达进行了研究。结果表明，在整个肝癌变过程中，Ｎ－ｒａｓＣ－ｍｙｃ表达增高，并且最早出现于小肝细胞及嗜碱性肝细胞灶，在晚期瘤样结节和肝癌中ｃ－ｍｙｃ的表达仍呈高表达，Ｎ－ｒａｓ在部分癌灶中不表达。结果提示它们的异常表达是大鼠肝癌变中较早出现的分子改变，可能与肝癌的启动有关，也是肝癌形态发生的分子基础之一。结果支持化学诱发肝癌的启动阶段致使肝细胞正常的分化途径阻断的假说。

血卟啉衍生物（HPD）加光照对无细胞体系DNA合成的抑制作用

本文从腹水型肝癌细胞部分纯化了依赖于ＤＮＡ的ＤＮＡ聚合酶。，以热变性的小牛胸腺ＤＮＡ为模板，观察了ＨＰＤ的光敏效应对这－ＤＮＡ合成体系的影响。结果表明，单独的ＨＰＤ或光照对无细胞体系ＤＮＡ合成无影响；而既用ＨＰＤ处理，又经光照后的ＤＮＡ合成系统表现出明显的抑制作用。此抑制作用呈显著的剂量和时间的依赖效应关系．ＨＰＤ的光敏反应与ＤＮＡ模板非竞争性地作用于酶。增加模板量不能使抑制作用逆转：而增加酶量可使抑制作用部分逆转。四种脱氧核苷三磷酸与ＨＰＤ预保温未见抑制作用；酶与ＨＰＤ预保温后抑制率比对照组增加两倍；而酶和ＤＮＡ一起与之预保温后抑制率则增加近４倍。捉示ＨＰＡ的光敏效应是既抑制了酶活性又破坏了ＤＮＡ模板的结构和功能，从而发挥最大的抑制作用。

早期乳腺癌前哨淋巴结转移的影响因素分析

目的 探讨早期乳腺癌前哨淋巴结转移的影响因素.方法 回顾性分析2006年1月至2011年12月中国医学科学院肿瘤医院635例乳腺癌前哨淋巴结活检病例.采用Logistic回归分析,观察各项临床病理特征与前哨淋巴结转移的相关性.结果 全组女性,年龄21～91岁,平均（50±12）岁.前哨淋巴结转移率19.7％（125/635）.平均每例获取（3.8±2.3）枚前哨淋巴结.单因素分析显示,年龄、腋窝触及淋巴结、病理类型、肿瘤大小和脉管瘤栓与前哨淋巴结转移相关（P＜0.05）.浸润性导管癌是最常见的病理类型（75.1％,477/635）,并且前哨淋巴结阳性率最高（23.9％,114/477）.多因素分析中,腋窝触及淋巴结[OR=7.90,95％可信区间（CI）2.59 ～24.05]、病理类型（OR =7.23,95％ CI 2.39 ～21.85）、肿瘤大小（OR =2.42,95％CI 1.14 ～5.14）和脉管瘤栓（OR=10.00,95％ CI4.27～23.44）是前哨淋巴结转移的影响因素（P＜0.05）.结论 腋窝触及淋巴结、病理类型、肿瘤大小和脉管瘤栓是预测早期乳腺癌前哨淋巴结转移的因素.

林县食管癌中p53基因突变与p53高表达相关性的研究

用免疫组织化学染色和ＰＣＲ直接测序法分别检测了食管癌高发区林县食管癌组织中Ｐ５３蛋白表达水平和基因突变以及二者的相关性。在３３例食管癌标本中，２３例发现有Ｐ５３的高表达，１０例未发现可检测到的Ｐ５３蛋白，其阳性率为６９．７％。Ｐ５３基因第５→８外显子出现点突变和缺失者１２例，其频率为３６％。在１２例ｐ５３基因突变的病例中，９例均有Ｐ５３蛋白的高度表达，提示ｐ５３基因突变与Ｐ５３蛋白的表达密切相关，并是造成Ｐ５３高表达的重要原因之一。Ｐ５３突变和Ｐ５３蛋白表达在食管癌组织中发生的高频率说明：Ｐ５３的改变是食管癌癌变过程中重要的生物学事件之一。

合格科研管理者应具备的基本素质

本文从科研管理的特点出发 ,结合科研管理者目前工作中经常遇到的一些难题及实际经验 ,以科研项目 (即课题 )管理为例 。

自泌性转化生长因子－β对人卵巢癌细胞生长的影响

目的：我们以往观察到，人卵巢癌细胞系ＣＯＣ１和ＣＯＣ２在无血清培养条件下，可以分泌转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）类似物，本研究进一步观察该ＴＧＦ－β类似物对自身细胞生长的作用。方法：分别制备ＣＯＣ１和ＣＯＣ２ＲＰＭＩ１６４０无血清培养条件的培养液ＳＦＣＭ１和ＳＦＣＭ２；观察ＳＦＣＭ１和ＳＦＣＭ２对体外培养和接种ＢＡＬＢ／ｃ裸鼠ＣＯＣ１和ＣＯＣ２细胞生长的影响，并与ＴＧＦ－β标准品相比较。结果：ＳＦＣＭ１和ＳＦＣＭ２对体外培养的自身细胞ＣＯＣ１和ＣＯＣ２均表现为剂量依赖性促进作用，ＳＦＣＭ２明显促进ＣＯＣ２细胞在裸鼠体内生长。放射性受体分析结果显示，ＣＯＣ１和ＣＯＣ２细胞均表达ＴＧＦ－β受体（结合部位）；上述ＳＦＣＭ１和ＳＦＣＭ２的促进作用均可以被抗ＴＧＦ－β中和抗体部分阻断。结论：在ＣＯＣ１和ＣＯＣ２细胞存在ＴＧＦ－β自分泌环调节机制，该机制可能与ＣＯＣ１和ＣＯＣ２细胞自主性无止境生长有关。

一种生物素标记探针DNA—RNA原位杂交方法

一种生物素标记探针ＤＮＡ—ＲＮＡ原位杂交方法王建明，李凌，沈贵华，崔惠云，李申德我们采用国产生物素光标记试剂盒标记探针，用于细胞涂片，冰冻切片及石蜡切片的原位杂交，检测细胞中目的基因的转录产生水平。一、材料和方法１．标本：人大肠肿瘤手术标本，冰冻切片...