血管内皮生长因子及其功能

血管内皮生长因子（VEGF）是一类具有高度生物活性的功能性糖蛋白,由于能够有效地刺激内皮细胞有丝分裂和诱导血管生成而得名[1]。它在许多病理生理过程中都有表达,

血管内皮生长因子和抗肿瘤血管新生药物研究进展

肿瘤的生长与迁移离不开新血管的形成,这使得抗血管新生成为肿瘤治疗的重要途径之一。血管内皮生长因子(VEGF)是针对内皮细胞作用最强、特异性最高的血管新生促进因子,因而VEGF是抗肿瘤治疗的重要靶点。我们简要介绍了VEGF的一些生物学特点及肿瘤血管新生,着重介绍了一些抗血管新生药物的最新研究成果及其临床应用。

血管内皮生长因子检测试剂盒质控标准的确定

目的确定血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)检测试剂盒的质控标准。方法对已制备的VEGF检测试剂盒反应体系的线性范围、最低检出限、精密性、准确性、稳定性进行质量评价,确定质控标准。结果 VEGF检测试剂盒的线性范围为0～400 pg/ml;最低检出限为0 pg/ml;检测不同浓度VEGF样品的批内精密性为9.83%～13.73%,不同时间检测VEGF的批内精密性为5.47%～14.08%,批间精密性为7.88%;检测不同浓度VEGF的回收率为94%～105%,确定试剂盒的质控标准为批内、批间精密性<15%,回收率在90%～110%之间。3批试剂盒于4℃分别放置6个月,各项指标均符合已确定的质控标准。结论已确定了VEGF检测试剂盒的质控标准,为其进一步应用于临床奠定了基础。

血管内皮生长因子定量检测试剂盒的研制

目的 研制血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）检测试剂盒（酶标法）.方法 以一株特异性抗VEGF单克隆抗体作为捕获抗体,另一株单克隆抗体作为检测抗体,通过棋盘滴定法确定两抗体的最佳浓度组合.制备冻干VEGF165参考品,并对样本稀释液、封闭液等实验条件进行优化.检测自制试剂盒的特异性并对其进行初步应用.结果 棋盘滴定法确定捕获抗体的质量浓度为10μg/ml,检测抗体的稀释倍数为1：20 000.冻干VEGF165的质量浓度为720～880 pg/ml,样本间变异系数〈10%.以5%牛血清白蛋白作为封闭液和样本稀释液最为合适.自制试剂盒与10种细胞因子均无交叉反应,具有较高的特异性和灵敏度.结论 成功研制出VEGF检测试剂盒.

血管内皮生长因子化学发光免疫测定试剂盒的研制及验证

目的研制血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）化学发光免疫测定试剂盒,并对该试剂盒进行验证。方法以试剂盒的技术指标和血清检测结果为参考依据,建立检测方法,确定检测范围,并对包被抗体（1∶500、1∶1 000和1∶2 000倍稀释）及酶标抗体浓度（1∶3 000、1∶5 000、1∶6 000和1∶8 000倍稀释）、包被温度（室温和4℃）、封闭液成分（1%小牛血清、1%和0.5%牛血清白蛋白）及干燥方法（超净台吹干和使用真空干燥机进行干燥）进行优化;同时对试剂盒的线性、检出限、精密性、准确度、特异性及热稳定性进行验证;采用本试剂盒对139例非肿瘤人群和100例肿瘤患者的血清样本进行初步检测。结果方法的最佳检测条件为：包被抗体浓度为1∶1 000,酶标抗体浓度为1∶3 000,对血清样本的检测范围为6.25～800 pg/ml,最佳包被浓度为4℃,最佳封闭液成分为0.5%牛血清白蛋白,最佳干燥方法为真空干燥法。试剂盒线性相关系数r〉0.99,校准曲线各点偏差的绝对值〈10%,最低检出限≤3.125 pg/ml,空白检出限≤3.125 pg/ml,批内差异〈5%,批间差异〈7%,回收率为85%～99%;特异性检验结果为本试剂盒对EGF、FGF-2、PDGF-AA、Pl GF-1、Pl GF-2、HGF、TNF-α、TNF-β检测的交叉反应率≤0.52%;经37℃保存3、7 d后,试剂盒线性相关系数r〉0.99,空白检出限≤3.125 pg/ml,批内差异〈8%,回收率为80%～82%。139例非肿瘤人群和100例肿瘤患者的血清样本中VEGF的中位水平（M）分别为44.6和83.4 pg/ml。结论本研究开发的试剂盒具有较高的准确性、灵敏性、特异性,适用于血清VEGF的临床检测,具有较好的临床应用前景。

专注成就事业

回国创业,仅仅始于一个念头,但创业成功,却需要执著和专注。执著于事业不偏离,专注于事业不退缩,持之以恒,才能有所收获。我专注于肿瘤防治,源于早年在同济医科大学求学时。当时同窗好友的父亲患了癌症,转了4次医院,换了不知道多少套治疗方案,直致原本家境富足的他最终辍学打工为父治病,连家里的房子都典卖了,最后他的父亲还是离开了人世。此事对我震动很大,当时我发誓一定要认清肿瘤,改变肿瘤患者因治疗而人财两空的残酷结局。

血管内皮生长因子定量测定试剂盒(酶联免疫吸附法)的性能验证及评价

目的验证北京健平九星生物医药科技有限公司研发的血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)定量测定试剂盒(酶联免疫吸附法)的性能。方法依据美国临床和实验室标准协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)批准的EP15-A2文件方法验证精密度及准确度,EP6-A文件方法验证线性范围,C28-A3文件方法验证生物学参考区间。结果高、低浓度混合血清样本精密度检测结果CV分别为5.64%和7.67%,均小于15%;准确度验证中,VEGF含量理论值为150 pg/mL的国际参考品5 d测量均值为157 pg/m L,标准差为2.30 pg/mL,验证区间为149.53~164.47 pg/mL;理论值为350 pg/m L的国际参考品5 d测量均值为365.80 pg/mL,标准差为5.03 pg/mL,验证区间为349.47~382.13 pg/mL;验证区间均包括定值,且相对差值均不超过±10%。线性范围验证中,高、低浓度混合血清样本的测定值与预测值差别不大,相关系数r^2=0.991,线性较好(斜率b接近1)。生物学参考区间验证中,20份健康人血清样本中有19份VEGF含量均在厂家设定的6.25~142.20 pg/m L参考值范围内,满足20例参考个体中不超过2例的检测值不在参考范围内。结论北京健平九星生物医药科技有限公司研发的VEGF定量测定试剂盒的精密度、线性范围、准确度和生物学参考范围均达到了临床应用的实验要求,各性能指标的验证方法均可为相关实验室提供参考。