疑似蛇毒液样品的纳升级超高效液相色谱-高分辨质谱分析鉴定

针对5个疑似蛇毒毒液及其沾染样品,基于纳升级超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(Nano LC-MS/HRMS)技术,结合尺寸排阻色谱分离,建立了一种蛋白质种类及物种归属的严格鉴定方法。5个样品经尺寸排阻色谱分离后均得到3个洗脱峰,分别冻干后以胰蛋白酶进行溶液内酶解处理并进行液相色谱-高分辨质谱分析鉴定。首先采用全扫描-数据依赖型MS/MS(Full MS/dd MS^(2))采集模式对样品中的肽段信息进行非靶向采集,依次与Swiss-Prot、蛇亚目(Serpentes)、游蛇科(Colubroidea)、眼镜蛇科(Elapidae)、眼镜蛇亚科(Elapinae)、眼镜蛇属(Naja)蛋白质数据库逐级收缩比对;再筛选符合肽谱匹配度、肽段错误发现率小于1%和特征肽段数目大于等于2的蛋白质,共鉴定到32种蛋白质均来自中华眼镜蛇(Naja atra),可归属于Naja atra的10个家族,主要为三指毒素、金属蛋白酶、磷脂酶A2等。最后,采用平行反应监测模式选取每种蛋白质的两条特征肽段进行靶向验证,当两条特征肽段均满足“至少75%的y^(+)和b^(+)离子的Δm/z小于5 ppm”时,方认为鉴定到了样品中的某一蛋白质。最终鉴定出5个样品均含有Naja atra蛇毒。此鉴定方法研究系统、严格,可为蛇毒中毒司法鉴定以及蛇毒药物研究等提供有效的技术支持。

干血斑中34种苯二氮卓类物质的实时直接分析-串联质谱快速筛查研究

该文通过优化仪器条件和前处理方法建立了实时直接分析-串联质谱快速筛查干血斑(DBS)中34种苯二氮卓类物质(BZDs)的方法。首先将50μL血液沉积在采血卡上形成DBS,DBS经溶剂充分提取后取上层溶液,使用DART 12Dip-It^(TM)模块进样5μL,在多反应监测模式下检测。结果表明:选用400℃作为载气加热器温度,以乙酸乙酯-水(体积比3∶1)混合溶剂提取DBS样品,所得响应强度较高且建立的筛查方法选择性良好,无延迟效应影响,除阿地唑仑、奥沙西泮和α-羟基三唑仑外,其他物质的检出限均在5~50 ng/mL。所建方法可在90.3%的阳性检材中成功筛选出BZDs物质,方法快速、简便、有效,适用于服药自杀等类案件中DBS检材的快速筛查检验。

股骨颈骨折影像人工智能快速诊断方法研究

目的 旨在构建人体股骨颈骨折影像人工智能(artificial intelligence,AI)快速诊断方法,从而实现股骨颈骨折的自动化评估。方法 采集1 018例股骨颈骨折的病例作为研究样本,分为训练集(676例)、验证集(112例)和测试集(230例)。应用训练集和验证集样本通过自动化影像预处理、骨折诊断模型构建和模型评估三个步骤进行股骨颈骨折评估模型构建,应用测试集对模型进行测试。结果 建立了1 018例股骨颈骨折样本数据库。建立的智能评估模型识别股骨颈骨折精准率达到78.7%。结论 该模型将为股骨颈骨折自动化评估软件的研发提供技术支撑。

超高效液相色谱-高分辨质谱法检验4种酰胺类合成大麻素同分异构体

同分异构现象在合成大麻素中普遍存在,因其结构与性质上的差异并不显著,当同时存在时分离鉴定较为困难,为公安实践中合成大麻素的检验鉴定带来了一定的挑战。本研究利用超高效液相色谱-高分辨质谱技术(UHPLC-HRMS)建立了5F-EMB-PICA与5F-MDMB-PICA、ADB-BINACA与AB-PINACA这2对酰胺类合成大麻素同分异构体的检验方法。选用Hypersil GOLD C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.9μm)进行UHPLC分离,以含0.1%甲酸的甲醇溶液和含10 mmol/L甲酸铵的0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱。高分辨质谱采用一级质谱全扫描/数据依赖二级质谱扫描(Full MS/dd-MS^(2))进行检验。结果表明,采用上述仪器条件,能够实现4种合成大麻素同分异构体的分离分析,5F-EMB-PICA和5F-MDMB-PICA的分离度为2.06,ADB-BINACA和AB-PINACA的分离度为1.22,均达到了有效分离的目的。研究进一步开展了方法学指标考察,5F-EMB-PICA、5F-MDMB-PICA、ADB-BINACA和AB-PINACA这4种酰胺类合成大麻素同分异构体的线性关系均较好,相关系数(R^(2))均大于0.99。毛发中4种合成大麻素的基质效应范围为88.67%~111.76%,回收率为96.23%~105.11%,日内、日间精密度(RSD)均小于10%。使用本研究建立的检验方法鉴别案件检材,在毛发检材中检出了AB-PINACA,含量为0.73μg/g;在烟丝检材中检出了5F-MDMB-PICA,含量为11.3 mg/g。研究结果表明所建方法可应用于公安机关对实际案件检材的检验,可为合成大麻素同分异构体的检验鉴定提供方法参考与思路借鉴。

血液中褪黑素中毒标记物鉴定（英文）

褪黑素是失眠及老年人常用的催眠药之一。近年来,一些犯罪分子利用其为作案工具,从而使之也出现在物证鉴定的检验项目中。本文报道一起涉及褪黑素的麻醉凶杀案的检验鉴定,以原体及代谢物作为中毒标记物,对褪黑素及其代谢物6-羟基褪黑素进行分析检验,并对案件信息作深度挖掘。使用日本岛津30A-LC液相色谱仪串联美国AB SCIEX公司API5500 QTRAP质谱仪,对送检样品进行测定化验,发现受害人血液褪黑素浓度超过正常起催眠作用的浓度达25倍以上。本文建立的液相色谱/串联质谱检验分析,方法简单、快速、有效,效果良好。

四种水溶性毒物中毒机理及检测方法研究进展

水溶性毒物是指在水中具有较高溶解度的毒物,一般具有吸收迅速及毒性较高的特点,极易通过血液循环分布到体内各器官组织,从而对人体造成危害。本文选择氰化物、亚硝酸盐、氟乙酸钠和硼砂四种常见水溶性毒物,对其理化性质、毒理机制、中毒症状、体内代谢过程及国内外检测技术发展现状和未来趋势进行综述,希望为法庭科学水溶性毒物检验鉴定和中毒死亡案件原因调查提供参考。

毛细管电泳联合二代测序技术用于亲子鉴定突变分析

目的联合应用毛细管电泳与二代测序技术,探索肯定亲权案件中的STR基因座的突变率和突变方式。方法2600例肯定亲权关系的案件材料采用PowerPlex21试剂盒进行STR检验,发现67例存在基因座突变,对该67例亲子关系(62例三联体,5例二联体)的196个样本用SeqTyper®24构建文库,使用Ion PGMTM平台进行二代测序。结果12个STR基因座共发现71个突变,父源突变与母源突变的比例为3.13‥1。其中64例亲子关系观察到1个基因座突变,2例观察到2个基因座突变,1例观察到3个基因座突变,有些突变从毛细管电泳所得STR基因座结果无法判断是增加还是减少了一步,二代测序则可以明晰等位基因的遗传方式及突变情况。结论对于复杂核心序列、含不完全重复单位的基因座,有些突变可以通过二代测序明确突变的来源和方式,更直观地从微观碱基序列的角度观察等位基因的遗传。

Y染色体微缺失和突变的全同胞关系鉴定

目的探讨Y染色体微缺失和突变时,两男性个体间的全同胞关系鉴定。方法提取两样本DNA,检测Y-STR分型及常染色体STR分型,通过IBS法、ITO法及全同胞-无关个体判别函数法计算两个体间的全同胞关系。结果 33个Y-STR基因座中有2个基因座存在突变,其中一样本存在19个基因座的缺失。两样本IBS为53,大于阈值42;累积全同胞关系指数为1.36×10^(16),远远大于19;全同胞-无关个体判别函数D_(FS2)>D_(R2)。因此倾向于认为两个体为全同胞。结论对于Y染色体微缺失和突变需要进行父系鉴定的情况,可以综合应用IBS法、ITO法以及全同胞-无关个体判别函数法以得出更为可靠的鉴定意见。

北京地区汉族人群16个非CODIS STR基因座的遗传多态性

目的调查16个非CODIS STR基因座(D6S477、D22-GATA198B05、D15S659、D8S1132、D3S3045、D17S1290、D14S608、D2S441、D18S535、D13S325、D10S1435、D11S2368、D1S1656、D7S3048、D10S1248和D19S253)在北京地区汉族人群的遗传多态性。方法应用GoldeneyeTMDNA身份鉴定系统18NC试剂盒,对北京地区300名汉族无关个体DNA进行PCR扩增,3130XL遗传分析仪电泳分析,GeneMapper v3.2分析等位基因片段大小。结果 16个非CODIS STR基因座在北京地区汉族群体基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡,杂合度在0.677～0.873,个体识别率在0.890～0.967,非父排除率在0.393～0.741,多态信息含量在0.706～0.853。结论这16个非CODIS STR基因座在北京地区汉族群体中具有较好的多态性,对群体遗传学研究和法医学应用具有重要意义。

法医学中伪聋鉴定的常用方法

伪聋即装聋,在法医学鉴定工作中常会遇到一些伤者在耳外伤或头颅外伤后涉及"刑事责任"或"赔偿损失"等问题,为达到个人目的,故意伪装成耳聋,而客观上其听觉系统正常或仅有轻微损害。因此,听功能损伤的鉴定是此类案件鉴定的关键。常用的听功能鉴定方法包括纯音听阈测试、言语识别阈测试、响度优势测试、听性脑干反应、畸变产物耳声发射、瞬态诱发耳声发射、多频稳态诱发电位等。但每种方法都有优缺点,在鉴定工作中应将几种方法结合应用,综合评价听力损失程度。

微量物证在北京大兴“11·18”重大火灾事故调查中的应用

近年来,具有重大社会影响的火灾、爆炸、矿难等生产安全责任事故时有发生。由于伤亡人数众多,此类事件极易引起社会关注,如何科学、高效地还原事件经过,考验着每一名刑事技术人员。2017年11月18日,北京市大兴区西红门镇发生重大火灾。刑事技术人员通过细致勘查发现冷库间内电气线路故障,准确提取冷库间墙面保温材料,使用气相色谱/质谱联用仪进行比对检验,迅速确定起火原因。墙面保温材料中释放出的五甲基二乙烯三胺与空气混合,在密闭空间内达到爆炸极限,遇包埋在聚氨酯保温材料内的电气线路短路发生爆炸。装修材料中挥发性有机物的爆炸比较罕见,总结刑事技术人员在微量物证现场勘查及检验鉴定中的工作经验,可以为以后类似案事件的处置提供重要参考。

钝性暴力致腹部脏器损伤的法医学鉴定分析

目的探讨钝性暴力致腹部脏器损伤的形成机制、损伤特点及法医学鉴定。方法回顾性分析65例钝性暴力致腹部脏器损伤患者的鉴定资料。结果 65例均为腹部闭合性损伤,由钝性暴力作用引起;男多于女;平均年龄43岁;体表损伤常较轻而腹部脏器损伤较重;剖腹探查术所见是证实腹腔脏器损伤的主要依据;病理诊断是认定伤前潜在疾病的主要方法。结论在钝性暴力致腹腔脏器损伤案例的法医学鉴定中,正确认识腹部脏器损伤的形成机制、损伤特点,通过临床剖腹探查术的客观所见及病理检验结果,对评定损伤程度、分析伤病关系具有十分重要的意义。

尿液中12种苯二氮卓类新精神活性物质实时直接分析串联质谱快速检测研究

随着新精神活性物质(NPS)种类不断增加、滥用越来越广泛,其兴起给各国禁毒机构带来严峻挑战。该文建立了实时直接分析串联质谱(DART-MS/MS)检测尿液中12种苯二氮卓类新精神活性物质(DBZDs)的方法。优化了质谱条件、进样量、载气加热器温度和前处理方法,并进行了方法学验证。结果表明:使用乙酸乙酯进行液液萃取后,移取5μL上清液至玻璃棒下端,采用DART 12Dip-ItTM玻璃棒自动进样装置进样,载气加热器温度为300℃,在正离子模式下使用多反应监测(MRM)模式分析时可得到最佳响应。采用地西泮-D5作为内标进行定量分析,该方法在0.05~5μg/mL范围内线性关系良好,相关系数(r2)> 0.99;检出限为0.5~20 ng/mL,定量下限为1~50 ng/mL;基质效应为-11.1%~12.6%,回收率为94.7%~115%,高、中浓度的日内及日间相对标准偏差(RSD)均不大于15%,定量下限浓度的日内及日间RSD均不大于17%。方法的重复性良好,符合实战工作要求。

合成大麻素ADB-BUTINACA在人体尿液及体内外代谢模型中的代谢比较

本研究采用液相色谱-高分辨质谱法分析人体尿液样本、斑马鱼体内代谢模型以及肝微粒体体外代谢模型中N-(1-氨甲酰基-2,2-二甲基丙基)-1-丁基吲唑-3-甲酰胺(ADB-BUTINACA)的代谢情况。结果表明,共检测到45个ADB-BUTINACA代谢物,包括37个Ⅰ相代谢物和8个Ⅱ相代谢物,涉及9种代谢途径,其中有7个Ⅰ相代谢物为首次报道。通过对比代谢模型和人体尿液样本中的代谢物发现,斑马鱼体内代谢模型产生的代谢物更接近人体尿液样本,但无论是体内还是体外代谢模型,其代谢物排名与人体尿液样本具有较大差异,仅凭体内外代谢模型得到的代谢物数据难以直接用于真实样本的分析。通过对人体尿液样本中代谢物峰面积排名分析,建议将ADB-BUTINACA原型、M36、M19以及M16作为ADB-BUTINACA的生物标志物。

艾司唑仑体内分布1例

1案例1.1简要案情某男,68岁,有抑郁症病史2年,长期使用艾司唑仑。某日上午,其子陪该男去医院开了3盒艾司唑仑(共60片,每片1 mg)。11:00许其子送该男回到小区门口,30 min后其子联系不上该男,家中也没发现在医院开的药物。3 d后,在距离小区约500 m处的河内发现该男尸体,已轻度腐败,经尸表检查,未发现可疑中毒现象。行尸体解剖,同时提取心血(20 mL)、胃内容物(50 g)、尿液(15 mL)送检。

超高效液相色谱-串联质谱法测定减肥及壮阳类食品中27种非法添加物

本文建立了超高效液相色谱-串联质谱法定性、定量测定减肥及壮阳类食品中27种非法添加物的方法。样品经超声提取后,采用Waters CORTECS T3(2.1 mm×100 mm×2.7µm)色谱柱,以0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL/min;选择电喷雾离子源,多反应监测(MRM)的正离子模式进行检测。实验表明,27种化合物在0.05~20μg/L的浓度范围内线性关系良好,r值均大于0.997。在低油脂低蛋白食品、高油脂食品、高蛋白食品中,27种化合物的回收率分别在83.7%~104.1%、87.4%~103.8%、80.3%~104.4%之间,相对标准偏差分别在0.30%~8.6%、0.97%~6.4%、0.66%~5.7%之间,分特拉明的检出限和定量限分别为2.5μg/kg和5μg/kg,其他26种化合物的检出限和定量限分别为25μg/kg和50μg/kg。该方法前处理简单,准确度及灵敏度高,适用于减肥及壮阳类食品中27种非法添加物的定性定量测定。

新型合成大麻素ADB-BUTINACA在不同时间段斑马鱼体内的代谢组学分析

采用液相色谱-高分辨质谱技术对不同时间段斑马鱼体内ADB-BUTINACA的21种代谢产物进行分析。首先采用正交信号变换的偏最小二乘判别分析和层次聚类分析方法筛选出7种具有显著性差异的组间代谢物,以7种差异代谢物为特征建立Stacking集成学习模型,对4组不同时间段的斑马鱼体内样本进行分类预测。结果显示,模型预测准确率高达98%,表明筛选的潜在差异代谢物能够有效反映不同时间段原药在斑马鱼体内的变化情况;对7种潜在差异代谢物在4类样本体内的含量变化进行富集分析,结果表明差异代谢物的总体含量随着染毒时间的增加而降低,各类代谢物的含量分布由最初的不均衡趋向于均衡分布。此外,实验发现大部分差异代谢物的代谢路径与羟基化反应密切相关,推测原药在生物体内发生羟基化反应与给药时间推断方面具有一定关联性。实验结果可为药物服用时间推断等相关领域分析提供依据。

上半规管裂综合症医疗过错司法鉴定1例

1案例资料1.1简要案情冯某,男,57岁,2010年3月至某医院镶牙,检查见双侧上颌结节隆起明显,需行双侧上颌结节骨突修整术,门诊病历记载＂交待病情,手术风险,预后及费用,患者知情同意＂,但未签署正规知情同意书。手术中（两位实习生参加,未告知冯某）锤击凿除左侧上颌结节骨突时,冯某突然出现剧烈不适,感觉头部震动，眩晕，疼痛剧烈，四肢晃动，术后仍持续性存在眩晕，听力下降，可听到自身关节弹响，触摸头皮声音等症状。

ADC直方图在椎体压缩性骨折时间判定中的应用

目的:探讨表观扩散系数(ADC)直方图在椎体压缩性骨折时间判断中的可行性。方法:搜集42例胸腰椎压缩性骨折病例,在30d和90d时行磁共振扩散加权成像(DWI),在AW4.6上后处理得到ADC图,计算基于感兴趣区(ROI)的平均ADC值,对骨折整体进行ADC直方图分析,计算ADC值直方图的平均值、中位数、标准差、峰度值和偏度值。采用t检验比较30d和90d时的各参数之间是否存在差异,并利用受试者特性曲线(ROC曲线)评价存在统计差异的参数诊断效能。结果:骨折30d时,基于ROI的ADC平均值,直方图ADC平均值以及中位数分别为(1.14±0.34)×10-3 mm2/s、(1.22±0.38)×10-3 mm2/s及(0.97±0.26)×10-3 mm2/s,而骨折90d时,上述参数分别为(0.81±0.44)×10-3 mm2/s、(0.75±0.42)×10-3 mm2/s及(0.72±0.34)×10-3 mm2/s。90d时的上述参数均低于30d时的参数,有显著统计学差异(P<0.05),其ADC值分别为0.811、0.902和0.870。结论:直方图ADC平均值能鉴别新鲜骨折及陈旧骨折,为临床确定骨折时间提供了一定的依据。

毛细管电泳-间接紫外法测定饮用水中草甘膦、草铵膦及其代谢产物

提出了毛细管电泳-间接紫外分析方法测定饮用水中草甘膦及其代谢产物氨甲基膦酸、草铵膦及其代谢产物3-甲基磷酸亚基丙酸。样品与25mmol·L-1乙酸铵溶液混匀后,采用SAX型固相萃取小柱提取待测物。洗脱液经毛细管电泳分离,以o-磷酸基-DL-苏氨酸为内标物,紫外检测波长为214nm。草甘膦、草铵膦、氨甲基膦酸和3-甲基磷酸亚基丙酸的线性范围为0.10~20.0mg·L-1,检出限(3S/N)分别为0.22,0.30,0.18,0.03mg·L-1,加标回收率在82.1%~108%之间。