兽医生物药品厂GMP车间的设计

生药厂的技术改造必须从市场实际出发,选准产品,把工艺尽可能做细。本文从企业定位,生产工艺细化,GMP车间的净化厂房设计三个方面论述了兽医生物药品厂GMP车间的硬件设计要点。

兽医生物药品生产企业的GMP认证

药厂技改完成后,要抓紧做好软件的编制工作,迎接国家的认证。基于GMP对产品质量的深刻认识,新的质量保证体系比原有的监察制度更完备。完善的软件系统是质量的重要保证。验证是实现GMP认证的重要条件。

第一届华都生物白羽肉鸡养殖技术沙龙高层学术研讨会召开

2011年11月11日,＂第一届华都生物白羽肉鸡养殖技术沙龙＂在北京召开高层学术研讨会,会议由华都集团北京市兽医生物药品厂主办。华都集团总经理佘锋、副总经理张恒涛、集团总畜牧师曹玉强以及中国农业大学乔健教授等出席了会议。来自国内白羽肉鸡养殖龙头企业的总经理或技术总监共30人参加了会议。

乌梅酸枣仁口服液的质量标准研究

目的建立乌梅酸枣仁口服液的定性鉴别和含量测定的方法,为乌梅酸枣仁口服液制定质量标准提供参考依据。方法用薄层色谱(Thin Layer Chromatography)法鉴别乌梅酸枣仁口服液中熊果酸、柠檬酸以及酸枣仁皂苷A;高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography)测定乌梅酸枣仁口服液中的有效成分柠檬酸、酸枣仁皂苷A的含量。结果薄层色谱方法简便、专属性强、重复性好。HPLC法测定结果表明柠檬酸、酸枣仁皂苷A分别在0.2～2.4 mg/ml,50～250μg/ml范围内线性关系良好(r=0.999 8,r=0.999 5),平均加样回收率分别为99.53%、99.88%,RSD分别为0.76%,0.71%。结论建立的特征图谱能够准确、快速进行定性、定量检测,可有效的监测该制剂的质量。

马立克氏病病毒(MDV)814株B抗原基因的克隆及部分序列分析

提取感染鸡胚成纤维细胞ＭＤＶ－Ｉ弱毒株８１４病毒ＤＮＡ为模板，根据ＲＢＩＢ株ｇＢ基因５＇及３＇两端核苷酸序列设计引物，利用ＰＣＲ技术扩增了我国ＭＤＶ－Ｉ弱毒株８１４ｇＢ基因（１．９ｋｂ），将扩增片段平末端克隆到载体ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ中ＥｃｏＲＶ位点，经ＢａｍＨＩ、ＨｉｎｄⅢ酶切鉴定得到不同插入方向的重组质粒。构建扩增片段的酶切图谱及部分序列分析证明与ＲＢＩＢ株ｇＢ基因无差异，显示了极高的同源性。本文进一步证明ｇＢ基因在ＭＤＶ不同毒株间是十分保守的。

乌梅酸枣仁提取物对鸡人工感染传染性法氏囊病的疗效试验

本试验旨在验证乌梅酸枣仁提取物对鸡传染性法氏囊病的预防和治疗效果。以鸡传染性法氏囊LX毒株感染未接种法氏囊疫苗的雏鸡,建立动物模型;以自拟乌梅酸枣仁提取物分高、中、低3个剂量组口服,以黄芪多糖为对照,评价其预防和治疗鸡传染性法氏囊病的疗效。结果表明:①人工感染鸡传染性法氏囊病毒后,预防试验中测试药物中剂量组、黄芪多糖组的相对增重率分别为81.85%和48.24%;成活率分别为87.5%和100%。统计分析结果表明,测试药物中剂量组的相对增重率显著高于黄芪多糖组(P<0.05),两组成活率差异不显著(P>0.05);中剂量组、黄芪多糖组的法氏囊指数分别为0.187和0.123,脾脏指数分别为0.361和0.286。中剂量组的免疫器官指数均明显高于黄芪多糖组,差异显著(P<0.05)。②治疗试验中,测试药物中剂量组、黄芪多糖组的相对增重率分别为29.55%和46.1%,成活率分别为100%和80%。中剂量组、黄芪多糖组的法氏囊指数分别为0.22和0.25,脾脏指数分别为0.34和0.36。经过统计学分析,上述两试验组的各项指标差异均不显著(P>0.05)。由此可知,乌梅酸枣仁提取物以200mg/kg体重口服,连续5d能有效提高人工感染传染性法氏囊病鸡的成活率,且预防和治疗保护率均超过80%;测试药物通过提高鸡法氏囊、脾脏指数而发挥增强机体免疫功能抵抗病毒侵害的功效。

乌梅酸枣仁提取物对人工感染鸡大肠杆菌病的防治效果

目的实验室评价乌梅酸枣仁提取物对鸡致病性大肠杆菌病的疗效。方法根据前期研究自拟乌梅酸枣仁提取物配方,以体外试管二倍稀释法测定其最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),建立鸡致病性大肠杆菌病模型,评价其预防和治疗鸡大肠杆菌病疗效。结果体外试验显示其最小抑菌浓度为12.5 mg/mL;人工感染鸡大肠杆菌病模型显示预防试验中乌梅酸枣仁提取物高、中、低剂量组、利好对照组、感染对照组的成活率分别为50%、70%、50%、60%、10%;肝脏细菌检出率均为100%。治疗试验中上述各组成活率分别为62.5%、50%、37.5%、62.5%、25%;肝脏细菌检出率均为100%。结论体外、体内试验结果表明,乌梅酸枣仁提取物能有效减少人工感染后的临床症状,保护率为50%～70%,推荐使用剂量为200 mg/kg体重,可以替代部分抗生素防治此病。

鸡产蛋下降综合症灭活疫苗研究Ⅰ.EDS_(76)K—11株病毒的增殖、鉴定、纯化和生产性能研究

将 EDS_(76)K—11株病毒接种于鸭胚成纤维(DEF)细胞上,经增殖传代后,细胞培养上清液对鸡红细胞的凝集价可达1:1280倍,经负染用电镜观察,可见典型腺病毒颗粒。将其分别与 EDS_(76) BC14株病毒阳性血清和鸡新城疫(ND)病毒阳性血清做血凝抑制(HI)试验,结果能被 BC14株阳性血清全抑制,而不能被新城疫阳性血清抑制。将病毒液用梯度离心手段进行分离纯化后,接种 SPF 鸡胚肝(CEL)细胞,增殖扩大冻干,做为基础种子批毒。对病毒在 DEF、鸭胚(DE)上的产毒时间、病毒分布及产毒量进行了摸索,确定了适宜的收获时间。在DE 上增殖,胚液的血凝价可达1:20480—1:163840倍。

鸡产蛋下降综合症(EDS76)灭能疫苗研究 Ⅱ、EDS76灭能疫苗的安全性和免疫性试验

将 EDS76 K—11株病毒种毒(参见本刊1992年1期)活性材料接种鸭胚尿囊腔内,制备抗原液。经福尔马林灭活后与油相佐剂乳化,制出灭能疫苗5批。对制品的安全性和免疫性等进行了测定,制品以双倍使用剂量肌肉注射8—6周龄雏鸡,安全性良好;对1日龄雏鸡接种1个使用剂量进行急性毒性试验观察,15天生长曲线表明,对雏鸡没有影响;用1、1/2和1/4个使用剂量分别免疫8—6周龄雏鸡,每组10只鸡,免疫后21—28天,血清中血凝抑制(HI)抗体的几何平均滴度(GMT)均可达到1:160以上,用1/8个使用剂量免疫组为1:62。

浅谈羊疥螨病的防治

螨病也称疥癣或癞病，羊螨病又称羊疥癣．群众俗称为羊疥疮，羊癞或“骚”。通常所指的螨病是由于痒螨或疥螨在动物体表皮肤寄生而引起的一种慢性寄生虫病。其特征是皮炎、剧痒、脱毛、结痂．传染性强．对羊的毛皮危害严重，也可造成死亡。山羊多为疥螨病，绵羊多为痒螨病。

H1N1流感病毒感染小鼠在免疫学研究中的初步应用

目的研究H1N1流感病毒感染能力及机体免疫应答反应。方法利用0.1LD50剂量A/PR/8/34(H1N1)病毒感染C57BL/6小鼠,利用ELISA和流式细胞术等方法检测IL-5、IL-6水平和CD4+效应性T淋巴细胞比例。结果3dpi小鼠肺脏病毒复制达到高峰,为107EID50/g,7dpi肺脏组织病理学观察呈间质性肺炎、炎性细胞浸润;5dpi时IL-6水平达到峰值,为122pg/m L;7dpi时IL-5达到峰值,为680pg/m L;与未感染组相比,感染组CD4+CD44+CD62L-效应T细胞比例显著升高。结论结果表明PR8流感病毒感染小鼠,肺脏病毒复制水平高,机体免疫应答强,适合用于进一步的免疫学研究。

鸡新城疫CS2株活疫苗中间试制及区域试验

在北京市兽医生物药品厂进行中间生产试验,按照《鸡新城疫CS2 株活疫苗制造及检验试行规程》(草案)扩大生产疫苗共7 批,计94.3万羽,检验全部合格。在北京地区进行区域试验,选择了7个鸡场8 个鸡群,共免疫12.59 万羽,免疫后10～15d,HI抗体几何平均值(GMT)达到1∶46～1∶832; 80d 达到1∶99 以上。疫苗安全有效。

鸡产蛋下降综合症灭能疫苗的研究 Ⅲ、EDS_(76)灭能疫苗田间免疫试验

用 EDS_(76)灭能疫苗实验室制品9101、9102、9103、9104、9105批(参见本刊1992年第1、2期),在北京地区六个鸡场进行了田间试验,共免疫注射海赛克斯、伊沙和星杂579商品代母鸡79,680只。这些鸡场都曾发生过 EDS_(76)病。

沙眼衣原体L2型主要外膜蛋白的原核表达及其抗原性分析

克隆表达沙眼衣原体(Ct)L2血清型的主要外膜蛋白(MOMP)基因,并鉴定重组MOMP(rMOMP)的抗原性,为进一步研究Ct感染的诊断和预防技术奠定基础。应用PCR技术对CtL2型标准株的MOMP基因进行特异性扩增,将扩增产物克隆入表达载体pET-32a(+),成功构建了rMOMP-pET-32a(+)表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)后摇菌进行rMOMP的诱导表达、鉴定和纯化,免疫印迹和ELISA法分析显示rMOMP可与兔源抗CtL2多克隆抗体发生特异性反应,表明rMOMP具有良好的抗原性。

H9亚型禽流感病毒广西株的分离与鉴定

2010年5月，广西某肉鸡养殖场免疫传染性支气管炎、禽流感、新城疫疫苗的8500只黄羽肉鸡自22日龄开始出现死亡，5d内陆续死亡500多只，剖检发现支气管黏膜严重出血、支气管堵塞，充满淡黄色干酪样物质，肾脏肿大、有暗红色充血性坏死灶，初步怀疑为禽流感和新城疫病毒感染。我们采集典型病料，进行病毒分离、RT—PCR和动物回归试验等，最终确定该病毒为H9亚型禽流感病毒。

鸡传染性支气管炎病毒(IBV)干扰新城疫病毒(NDV)增殖现象的研究

ＩＢＶ毒株Ｈ１２０、Ｈ５２、ＭＡ５对ＮＤＶ－ＬａＳｏｔａ的干扰实验证明ＩＢＶ特异性干扰ＮＤＶ增殖。１）采取不同顺序的同胚接种法：ＩＢＶ接种之后再接种ＮＤＶ；或ＮＤＶ接种之后再接种ＩＢＶ，及ＩＢＶ，ＮＤＶ同时接种，ＩＢＶ均干扰ＮＤＶ的增殖。２）ＮＤＶ接种３６小时之内，干扰现象最为明显，Ｈ１２０，Ｈ５２的干扰能力稍强于ＭＡ５。３）ＮＤＶ血清中和实验结果显示，不同顺序同胚接种ＮＤＶ、ＩＢＶ时，ＮＤＶ－ＬａＳｏｔａ不影响ＩＢＶ的增殖能力。同胚增殖ＩＢＶ，ＮＤＶ的关键是控制ＮＤＶ、ＩＢＶ的接毒量及选择合适的收毒时间。

鸡马立克氏病疫苗研究进展及病毒毒力进化态势

鸡马立克氏病是一种常见的以淋巴组织增生为主要特征的高度接触性传染病。本文分析了马立克氏病毒毒株进化情况,以及引起病毒毒力进化的原因,对马立克氏病疫苗研制进展进行了概述。提出应从免疫方法、免疫佐剂、遗传抵抗等方面入手,缓解病毒毒力增强的态势,进而减少马立克氏病的发生和传播,降低该病给养禽业带来的经济损失。

猪衣原体病在我国的流行情况

衣原体感染是一类十分重要的自然疫源性传染病。对我国猪衣原体病血清学抗体检测情况进行了总结,发现猪衣原体病广泛存在于我国27个省(市),感染率随着时间的增加直线上升。为了预防猪衣原体病的发生和保障人类的健康,建议养殖户使用疫苗进行预防和控制。