三种反义c-myc逆转录病毒表达载体的纯化、病毒包装、滴度测定及整合检测

为了增强逆转录病毒构建体对靶细胞的转染能力 ,本实验使用 Wizard TMDNA纯化系统对构建成功的三种反义 c- myc逆转录病毒表达载体进行了纯化 ,并经脂质体介导包装 PA317细胞 ,使用 NIH 3T3细胞测定了 PA317抗性细胞克隆的病毒滴度 ,用 neo基因 PCR扩增检测外源基因的整合情况。结果显示纯化后的DNA达到了真核细胞转染的要求 ,但其包装滴度的高低还受靶细胞生长状态、 PA317抽样量的高度影响 ,而neo基因 PCR检测是一种敏感。

丙型肝炎病毒外膜E_2／NS_1区基因在大肠杆菌中的表达

将丙型肝炎病毒外膜Ｅ_２／ＮＳ_１基因亚克隆至融合型表达载体，在大肠杆菌中进行表达，表达的重组蛋白经ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ和ＥＬＩＳＡ鉴定具有丙型肝炎病毒外膜蛋白的抗原性，能与丙型肝炎病毒感染血清发生特异性结合反应，为研究外膜蛋白抗体的意义创造了条件。

庚型肝炎病毒研究近况

庚型肝炎病毒研究近况孙柯儿综述凌世淦审校（北京军事医学科学院三所１００８５０）庚型肝炎（ＨＧＶ）是１９９５年下半年刚刚发现的人类致肝炎病毒。开始是Ａｂｂｏｔｔ实验室的Ｓｉｍｏｎｓ等研究人员从感染过ＧＢ肝炎病人血清的绢毛猴血清中，先后分离了三株病毒，分...

结直肠癌中雄激素受体及其与临床病理学特征关系的研究

应用放射性配基结合分析法，检测了４０例结直肠癌及部分癌旁正常粘膜组织中的雄激素受体（ＡｎｄｒｏｇｅｎＲｅｃｅｐｔｏｒ，ＡＲ），同时分析了ＡＲ水平与临床病理学变化的关系。证实结直肠癌ＡＲ数目（３３．７±２３．３ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白）明显低于癌旁５ｃｍ以外粘膜（５３．９±３２．４ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白），Ｐ＜０．０１，而其亲和力则无变化；结直肠癌时ＡＲ数目变化与女性、直肠癌、高分化癌及早期癌关系密切。提示ＡＲ与结直肠癌关系密切，本实验为临床上结直肠癌的诊断及内分泌治疗提供了初步资料。

慢性病毒性肝炎患者肝组织转化生长因子β_1及其mRNA分布的研究

目的了解慢性病毒性肝炎患者肝组织转化生长因β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｅｌ，ＴＧＦβ１）蛋白及ＴＧＦβｌｍＲＮＡ的分布状况及其意义。方法用免疫组织化学方法检测了４５例慢性病毒性肝炎患者肝组织ＴＧＦβ１蛋白表达，并做其中２１例ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ原位杂交检测。结果ＴＧＦβ１蛋白肝组织表达阳性率为８８８９％，主要为间质细胞、汇管区及纤维化发生活跃部位阳性，且随肝纤维化程度加重而表达增强（ｒ＝０７３，Ｐ＜００５）；ＴＧＦβｌｍＲＮＡ检测阳性率为５７．１４％，不仅定位于间质细胞，某些肝细胞也有阳性信号。结论ＴＧＦβｌ与肝纤维化发生发展密切相关。在病毒性肝炎，不仅间质细胞能够产生ＴＧＦβ１，肝细胞本身也能分泌ＴＧＦβ１。

反义人骨形态发生蛋白2基因逆转录病毒表达载体的构建及其对骨肉瘤细胞生物学行为的影响

目的 从分子水平探讨骨形态发生蛋白 2(BMP-2)基因对骨肉瘤生物学行为的影响，并为骨肉瘤的基因治疗提供理论依据。方法 将人 BMP-2基因约 1.0 kb的 cDNA片段反向插入逆转录病毒表达载体 PDOR,构建人 BMP-2基因的反义逆转录表达载体，然后用脂质体将重组的 PDOR-BMP-2质粒转染至人的骨肉瘤细胞 OS-9901，经 G 418筛选并获得阳性克隆。用免疫组织化学卵白素-生物素-过氧化酶 (ABC)方法检测肿瘤细胞中 BMP和增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达。应用流式细胞仪分析肿瘤细胞增殖周期并对其进行电镜观察。结果 转染后， OS-9901肿瘤细胞的内源性 BMP表达明显下降 (t=24.01。

桥本甲状腺炎诊断分析(附45例报告)

目的 探讨桥本甲状腺炎的临床表现及诊断。方法 经甲状腺细针穿刺细胞学检查确诊 45例桥本甲状腺炎患者 ,对患者的病史、临床特点、实验室资料、甲状腺彩超检查及甲状腺细针穿刺细胞学检查进行总结分析。结果 本病主要发生在中年女性 ,常有甲状腺肿大伴咽喉部不适感 ,患者甲状腺功能可以正常、减退或亢进。 3 9例患者的抗甲状腺球蛋白抗体和抗甲状腺微粒体抗体同时增高。甲状腺声像图有一些表现 :甲状腺内部回声减低者 19例 ;腺体弥漫肿大 ,内见散在无包膜低回声结节 15例 ;稍高回声结节 3例 ;甲状腺组织中有细带状网格样改变伴颈部淋巴结肿大者 8例。结论 对桥本甲状腺炎的诊断应重视病史 ,进行必要的辅助检查 ,甲状腺自身抗体检测和甲状腺超声是诊断本病的重要方法 ;如在鉴别诊断有困难时 ,甲状腺细针穿刺细胞学检查是不可缺少的一种诊断手段。