世界大战中的军犬(二)

（续上期）当时的一些令人沮丧的情形，即在国防部军犬工作处的控制下，抑制了开展犬的获取和训练用于军事目的这一工作的活力。由于对警戒犬的要求已经开始超越了最初的极为有限的数量需求计划，这样一个新的训练计划于1942年的夏季随之而生。明确这个项目的第一步是将采办、管理训练犬的责任从工厂保卫科转移到“军犬调配处”。

薤白甙J，K和L的结构

进一步用ＨＰＬＣ自小根蒜（ＡｌｌｉｕｍｍａｃｒｏｓｔｅｍｏｎＢｕｎｇｅ）鳞茎中分得两种新的呋甾皂甙，薤白甙Ｊ（１）和薤白甙Ｌ（ＩＩＩ），以及Ｉ的甲基化人工产物薤白甙Ｋ（ＩＩ）。经过化学降解和光谱（１Ｈ－ＮＭＲ，１３Ｃ－ＮＭＲ和ＦＡＢ－ＭＳ等）分析，确定其结构分别为：（２５Ｒ）－２６－Ｏ－β－Ｄ－吡喃葡萄糖基－２２－羟基－５β－呋甾－２β，３β，２６－三醇－３－Ｏ－β－Ｄ－吡喃葡萄糖基（１→２）－β－Ｄ－吡喃半乳糖甙（Ｉ）；（２５Ｒ）－２６－Ｏ－β－Ｄ－吡喃葡萄糖基－２２－甲氧基－５β－呋甾－２β，３β，２６－．三醇－３－Ｏ－β－Ｄ－吡喃葡萄糖基（１→２）－β－Ｄ－吡喃半乳糖甙（ＩＩ）和（２５Ｒ）－２６－Ｏ－β－Ｄ－吡喃葡萄糖基－５β－呋甾－２０（２２）－烯－２６β，３β，２６－三醇－３－Ｏ－β－Ｄ－吡喃葡萄糖基（１→２）－β－Ｄ－吡喃半乳糖甙（ＩＩＩ）。

胚胎肝发育相关基因-1在氯高铁血红素诱导分化的红白血病细胞中的表达

目的 研究胚胎肝发育相关基因 1(EDAG 1)在红系肿瘤分化中的表达及意义。方法 用细胞生物学、RT PCR及Northern杂交法。结果 含 4 0× 10 -5mol·L-1氯高铁血红素 (Hemin)的RPMI 16 40培养K5 6 2细胞 5天 ,可使70 %～ 80 %细胞呈现正常红系特征 ;EDAG 1、c fos表达降低。结论 Hemin可诱导红白血病细胞分化 ;EDAG 1、c fos表达下调可能与其有关。

生物素标记寡核苷酸探针检测B群轮状病毒

用５′端接氨基标记法，用生物素对Ｂ群轮状病毒（ＧＢＲＶ）ＩＤＩＲ株具有群特异性的３片段基因上２３ｂｐ寡核苷酸序列进行标记，经高效薄层层析板（ＨＰＴＬＣ）纯化，制备了Ｂ群轮状病毒生物素寡核苷酸探针，探针显色灵敏度达１０Ｐｇ，与ＧＢＲＶ、ＫＢ６３株基因杂交可检测到１００ｐｇ靶序列，而与Ａ群和Ｃ群轮状病毒及无关基因均不产生杂交信号，该探针可用于Ｂ群轮状病毒的检测、鉴定，以及同群不同毒株间基因相关性研究。

SARS相关冠状病毒感染致全身多脏器损伤电镜观察

目的:探讨 SARS 肺脏及全身多脏器超微结构病变的特点及意义。方法:6例 SARS 尸检标本超薄切片,透射电子显微镜观察。结果:SARS 患者全身多个脏器中都存在着不同形态的冠状病毒样颗粒,包括肺、心、肝、肾、胃、脾、淋巴结及睾丸。而在脑、肠道、胰腺及甲状腺等器官仅在血管内皮中发现冠状病毒样颗粒。肺脏主要超微病变为肺泡Ⅰ型上皮脱落、基底膜裸露破坏,肺泡Ⅱ型上皮增生,纤维蛋白颗粒构成透明膜,毛细血管内皮肿胀及通透性增加,病程较长病例出现间质纤维化。脾脏与淋巴结中树突状细胞萎缩失活,淋巴细胞大量凋亡及溶解坏死,单核吞噬细胞系统细胞肿胀变性和机能减退。全身其它脏器的实质细胞多呈线粒体与内质网肿胀扩张及空泡变性,还可见凋亡与坏死改变。全身所有器官组织中的内皮细胞都呈高度水肿、空泡变性及连接结构破坏,而且在内皮基质中多含有大量的冠状病毒样颗粒。结论:冠状病毒在人体内具有多种形态和较广泛的侵袭性,并具有强烈的嗜血管性。血管内皮损伤是肺脏、免疫器官及全身器官病变的重要基础。

^(60)Coγ射线照射对心肌细胞蛋白表达的影响

目的研究60Coγ射线照射对体外培养的大鼠心肌细胞蛋白表达的影响。方法体外培养新生大鼠心肌细胞,分为未照射组(0 Gy组)5、Gy1、0 Gy2、0 Gy照射组,分别用60Coγ射线0 Gy5、Gy1、0 Gy2、0 Gy单剂量照射心肌,在照射后48 h:(1)用蛋白检测试剂盒检测各组心肌细胞中的总蛋白含量;(2)用流式细胞仪检测检测各组细胞的细胞周期变化;(3)用带绿色荧光蛋白基因的腺病毒(AdGFP)感染各组心肌细胞,感染后48 h用流式细胞仪检测各组心肌细胞中所含的绿色荧光蛋白的平均荧光强度(MFI),间接比较各组心肌细胞中绿色荧光蛋白的生成量。结果照射后48 h,各照射组心肌细胞中的总蛋白含量较未照射组减低,照射组心肌细胞的绿色荧光强度明显弱于未照射组(P<0.01),抑制程度与照射剂量呈正相关。结论60Coγ射线单剂量照射抑制体外培养的心肌细胞的蛋白合成。

辐射促进多药耐药反义寡脱氧核苷酸体外逆转耐药的实验研究

目的 探讨辐射促转染的多药耐药(multidrug resistance,MDR)基因mdr_1反义寡核苷酸(ASON)体外逆转肿瘤细胞KBv200的耐药效果。方法 应用MTT法比较脂质体介导的ASON直接转染与联合辐射转染的情况下KBv200细胞对长春新碱(VCR)的半数抑制量(IC_(50)),再利用RT-PCR方法和流式细胞仪检测两种不同的转染方法对KBv200细胞的mdr1_-mRNA及其表达产物P-糖蛋白(P-gp)的调控情况。结果MTT实验显示,联合辐射的脂质体介导的ASON使KBv200对VCR的IC_(50)从处理前的2694.37±23.21nmol/L降至处理后的35.19±10.09nmol/L,而单纯ASON组的IC_(50)仅降至88.32nmol/l,表明联合辐射组的逆转效果明显优于单纯ASON组(P<0.05)。RT-PCR和流式细胞术的结果显示,辐射组KBv200细胞mdr_1-mRNA的表达水平及P-gp的阳性率均明显低于ASON组(P<0.05)。结论 辐射促转染的md_1 ASON对肿瘤细胞具有较强的耐药逆转作用。

单倍体造血干细胞联合脐带间充质干细胞移植对再生障碍性贫血的临床观察及其促进造血机制的初步疗效研究

目的探讨单倍体造血干细胞联合脐带间充质干细胞移植治疗再生障碍性贫血的初步疗效。方法选取2012年12月至2014年12月间我院收治的5例再生障碍性贫血患者为研究对象,给予患者单倍体造血干细胞联合脐带间充质干细胞移植治疗。术后观察患者回输的MNC、CD34+细胞数,GVHD发生率,血象恢复时间,SDF-1α、G-CSF、IL-6、GM-CSF、TPO、IL-11、SCF等细胞因子变化情况,以及骨髓有核细胞磷酸化ERK1/2蛋白改善情况,并统计并发症发生情况。结果 5例患者均获得造血重建,移植后血小板恢复时间平均为15 d,血细胞恢复时间平均为10.4 d。3例患者发生Ⅲ度a GVHD,3例患者发生局限性c GVHD,经治疗后均好转,4例患者恢复良好,1例患者术后73 d死于真菌性肺炎。移植后患者血清SDF-1α、G-CSF、IL-6、GM-CSF、TPO以及SCF水平明显改善(P<0.05);治疗后骨髓有核细胞磷酸化ERK1/2蛋白明显高于治疗前(P<0.05);1例患者EB病毒血症,2例出血性膀胱炎,2例真菌性肺炎。结论单倍体造血干细胞联合脐带间充质干细胞移植治疗再生障碍性贫血疗效显著,能够明显改善患者骨髓造血微环境,安全且并发症低,值得进一步开展临床应用研究。

辐射促进多药耐药反义寡脱氧核苷酸体内逆转耐药的实验研究

目的:探讨辐射促转染的多药耐药(MDR)基因mdr;反义寡核苷酸(ASON)体内逆转肿瘤耐药的效果。方法:采用耐药细胞株KBv_(200)移植于裸鼠皮下,建立肿瘤耐药模型,肿瘤局部2Gy^(60)Co-γ辐射后1h,瘤内注射脂质体介导的mdr_1 ASON,经长春新碱联合化疗。结果:对照组与联合辐射组、未联合辐射组肿瘤生长曲线差异有显著性(P<0.01),联合辐射组与未联合辐射组肿瘤生长曲线差异有显著性(P<0.01)。对照组与联合辐射组、未联合辐射组肿瘤体积和肿瘤重量差异有显著性(P<0.01),联合辐射组与未联合辐射组肿瘤体积和肿瘤重量差异有显著性(P<0.01)。联合辐射组肿瘤重量抑制率为(80.78±1.9)%,肿瘤体积抑制率为(84.91±2.1)％。结论:辐射促转染的mdr_1 ASON对肿瘤细胞具有较强的耐药逆转作用。

新抗肿瘤化合物8-氯腺苷代谢物在大鼠体内的药代动力学研究

目的 :全面了解一次静注 8 氯腺苷后其代谢产物在大鼠体内药代动力学的规律及特点 ,为临床实验提供理论依据。方法 :给大鼠单次静注 4种剂量 8 氯腺苷后 ,应用HPLC方法测定在体液和组织中 8 氯腺苷代谢产物8 氯肌苷和 8 氯嘌呤的含量。结果 :8 氯腺苷在大鼠体内迅速转化为代谢产物 8 氯肌苷和 8 氯嘌呤。代谢产物之一 8 氯嘌呤半衰期 (t1/2 )有随用药剂量的增加而延长的趋势 ,为 10 .15～ 32 .84min。药时曲线下面积 (areaunderthecurve ,AUC)在 8 氯腺苷剂量增加至 15 0mg·kg-1时不成比例地增高 ,呈非线性动力学消除的特点。另一代谢产物 8 氯肌苷的t1/2 约为 10 0min ,在剂量增加至 10 0mg·kg-1时 ,其AUC不成比例地增加 ,呈非线性动力学消除的特点。除脂肪、脑、睾丸组织外 ,8 氯肌苷和 8 氯嘌呤在体内分布广泛 ,其中肝、肾等代谢和排泄器官的含量较高。药物主要以代谢物形式从尿及胆汁中排泄 ,排泄量占总给药量的 39.81%。结论 :静注 8 氯腺苷后 8 氯嘌呤在大鼠血中迅速生成 ,消除也比较迅速 ,8 氯肌苷在大鼠血中出现较晚 ,消除也比较缓慢 ,两种代谢物在用药剂量 2 5～ 10 0mg·kg-1范围内呈线性动力学消除 ,当剂量增加至 10 0～ 15 0mg·kg-1有非线性动力学消除的趋势。

世界大战中的军犬(三)

最初，美军对军犬的训练是1个训犬员训练8头警戒犬，然而不久发现最好的训教活动是人、犬比例为1：4。这样的训练方式，在1942年12月上旬就发生变化。海岸警卫队表示，他们希望能够2个甚至1个训犬员配备1头警戒犬，结果导致当时海岸警卫队的训犬员有2662名，而其它战术科目的训犬员才有2169名，数量上超过其它战术科目的训犬员。

磁性分离法快速提取HCV mRNA用于RT－PCR检测

以异硫氰酸胍裂解血清，释放病毒核酸（ＲＮＡ），加生物素化的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）寡核苷酸探针与ＨＣＶｍＲＮＡ特异结合，用亲和素包被的磁珠与其连接，经洗涤，即获纯化的ＨＣＶｍＲＮＡ模板，作逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）。磁性分离法提取模板用于ＰＣＲ检测肝病患者血清３０例，ＨＣＶＲＮＡ阳性２１例（７０％）。该法与常规有机溶剂抽提法相比，操作简便，仅需１小时，且更为稳定，可适用于临床标本的检测应用。

骨骼肌源性抑瘤物的体外初步研究

目的 观察骨骼肌细胞条件培养液 (MCM)体外对肿瘤细胞增殖的影响 ,并初步分析骨骼肌源性抑瘤物的理化特性及抑瘤机理。 方法 用噻唑蓝分析法 (MTT法 )分析新生大鼠MCM对不同肿瘤细胞系的体外抑瘤作用。用超滤分离、热灭活处理、胰酶消化、凋亡分析及形态学观察分析骨骼肌源性抑瘤物的理化特性及抑瘤机理。 结果 MCM与哺乳动物源性肿瘤细胞 (小鼠骨髓瘤SP2 / 0及Wistar大鼠癌肉瘤Walker2 5 6 )、人源性白血病细胞 (人慢性粒细胞白血病K5 6 2及人急性淋巴细胞白血病HL6 0 )、实体瘤细胞 (人结肠腺癌细胞LS 174 T及人前列腺癌细胞PC3 M) ,以及不同转移潜能肺癌细胞 (人肺癌低转移株PLA80 1 C及人肺癌高转移株PLA80 1 D)共同培养后 ,肿瘤细胞的增殖显著下降 (P <0 0 1～ 0 0 5 ) ,且肿瘤细胞增殖呈不同程度MCM浓度依赖性。MCM与正常细胞 (兔关节骺板细胞RGP 2 )共同培养后 ,细胞增殖无下降。同一来源肺癌细胞 ,在MCM稀释至原液的 6 2 5 %时 ,仍见高转移株增殖显著受抑 (P <0 0 1～ 0 0 5 ) ,而在MCM稀释至原液的 2 5 %时 ,低转移株增殖即无显著受抑。MCM的抑瘤活性存在于分子量 10 0 0 0以下超滤组分 ,热灭活后活性消失 ,胰蛋白酶消化后活性仍存在。MCM不引起K5 6 2细胞凋亡 ,而导致肿瘤细胞膜变?

地塞米松对海水淹溺性肺损伤兔肺组织炎症反应的抑制作用

目的了解地塞米松对海水淹溺性肺损伤兔肺组织炎症反应的影响。方法机械通气的麻醉新西兰兔随机分成对照组(CG)和地塞米松治疗组(DG),每组12只。CG兔的气管内灌注4 mL／kg体重海水,DG兔在CG的基础上静注1 mg/kg地塞米松。取部分右下肺行常规病理学检查。分别用RT-PCR和ELISA检测肺组织中TNF-α、IL-1β和IL-8的mRNA表达及蛋白含量。结果病理学观察显示CG的肺组织内有大量的炎性细胞浸润,肺泡腔内有出血及透明膜形成。DG的上述改变轻于CG。DG肺组织内TNF-α、IL-1β和IL-8的mRNA表达及蛋白含量显著低于CG(P<0．05)。结论地塞米松治疗可抑制海水淹溺性肺损伤兔肺组织TNF-α、IL-1β和IL-8的表达,减轻肺组织内炎症反应。

辐射促进胰岛素样生长因子-1受体反义寡核苷酸对裸鼠移植性实体瘤的杀伤作用

目的 探讨辐射促转染的胰岛素样生长因子 1受体 (IGF 1R)反义寡核苷酸 (ASON)对肿瘤组织的杀伤效果。方法 采用裸鼠移植瘤局部 2Gy60 Co γ辐射后 1h ,瘤内注射脂质体介导的IGF 1RASON ,对实验组和对照组裸鼠抑瘤率和抑瘤曲线进行检测。结果 对照组与联合辐射组、未联合辐射组肿瘤生长曲线差异有显著性 (P <0 .0 1) ,联合辐射组与未联合辐射组肿瘤生长曲线差异有显著性 (P <0 .0 5 )。对照组与联合辐射组、未联合辐射组肿瘤体积和肿瘤重量差异有显著性 (P <0 .0 1) ,联合辐射组与未联合辐射组肿瘤体积和肿瘤重量差异有显著性 (P <0 .0 5 )。联合辐射组肿瘤重量抑制率为 90 .6 8% ,肿瘤体积抑制率为 95 .2 5 %。结论 辐射促转染的IGF 1RASON对肿瘤细胞具有较强的杀伤作用 ,并能有效抑制肿瘤生长。

面肩肱型肌营养不良症基因诊断

目的 观察面肩肱型肌营养不良症 ( facioscapulohumeral muscular dystrophy,FSHD)患者p13E- 11标记的 4 q35 Eco R / Bln 片段分子量变化特点 ,对 FSHD进行基因诊断。方法 提取基因组DNA,Eco R / Bln 双酶切后进行脉冲凝胶电泳 ,用同位素标记的探针 p13E- 11进行 Southern印迹 ,以小于 38kb为诊断 FSHD标准 ,观察 4 q35 Eco R / Bln 片段分子量大小的分布。结果 FSHD组 2 6例患者中 ,2 0例 4 q35 Eco R / Bln 片段小于 38kb,基因诊断阳性率为 76 .92 %。 FSHD亲属组 12例 ,其中两例该片段小于 38kb。对照组 2 1人 ,该片段均大于 38kb。结论 以小于 38kb为诊断标准较满意 。

多巴酚丁胺-美托洛尔负荷超声心动图检测心肌缺血的实验研究

目的通过定量组织速度成像(QTVI)技术分析多巴酚丁胺-美托洛尔负荷超声心动图(DMSE)在心肌缺血检测中的价值及机制。方法采用Ameroid环套扎冠状动脉左回旋支建立22只小型猪慢性心肌缺血模型,于造模术前行常规超声心动图及DMSE检查,术后3周复查DMSE,并与冠状动脉造影(CAG)及放射性核素心肌灌注条件下行单电子发射计算机断层摄影(SPECT)检查结果进行比较,确定缺血节段;计算DMSE检查中多巴酚丁胺及美托洛尔各剂量级别的室壁运动计分指数(WMSI),采用QTVI测定各剂量级别缺血节段心内膜及心外膜下心肌收缩期峰速度(Vs-end、Vs-epi),并计算心肌速度梯度(MVG)。结果19只模型猪存活并完成各项检测,造模后12只实验猪DSE阳性,15只实验猪DMSE阳性。造模前Vs-end、Vs-epi、MVG均随多巴酚丁胺剂量的增大而升高(P<0.05),并在美托洛尔静脉注射后下降(P<0.05);造模后Vs-end、MVG随多巴酚丁胺剂量的增大及美托洛尔的注射无明显改变,而Vs-epi在达负荷心率时明显高于基础状态(P<0.05),并在美托洛尔静脉注射后降低(P<0.05)。结论DMSE可提高DSE对冠心病检测的敏感性,其机理在于美托洛尔静脉注射后能快速阻断β受体,缓解心外高动力状态,从而有利于揭示多巴酚丁胺诱导的局限于心内膜下的心肌缺血。

大鼠严重烧伤后大脑皮质和腓肠肌早期损害的差异性及其机制

目的 探讨严重烧伤早期大脑皮质和腓肠肌损害的差异性及其发生机制。 方法Wistar大鼠 4 0只 ,随机分为正常对照组 (10只 )和烧伤组 (30只 ) ,后者又分为烧伤后 1,3,6 ,12 ,2 4h组 ,每组 6只大鼠 ,制作大鼠 30 %TBSAⅢ度烧伤模型。应用组织化学、分光光度比色法及免疫组化对两组大鼠的大脑皮质及腓肠肌组织琥珀酸脱氢酶 (SDH)、乳酸脱氢酶 (LDH)、黄嘌呤氧化酶(XO)、髓过氧化物酶 (MPO)、丙二醛 (MDA)的含量或活性及c -fos、bcl- 2蛋白表达和组织病理学改变进行一系列动态观察和比较分析。 结果 严重烧伤后大脑皮质病变较腓肠肌出现早、程度重 ,在烧伤后各时相点腓肠肌SDH、LDH活性显著高于大脑皮质 ,而XO、MPO及MDA的含量或活性则低于大脑皮质。c-fos蛋白在大脑皮质神经元持续高表达 ,而bcl- 2蛋白在腓肠肌持续高表达。结论 严重烧伤后大脑皮质和腓肠肌损伤存在差异 ,能量代谢改变、脂质过氧化及c -fos、bcl-