福氏2a宋内氏双价痢疾菌aroD基因缺失减毒株FS－5441的构建

通过Ｐｌｋｃ噬菌体将Ｔｎ１０插入灭活的ａｒｏＤ基因片段导入双价有毒痢疾菌ＦＳ－１５中，构建了该株的芳香族氨基酸营养缺陷减毒株，并通过Ｂｏｃｈｎｅｒ培养基去除Ｔｎ１０所携带的四环素抗性，经原位杂交从中检测到ａｒｏＤ基因缺失株ＦＳ－５４４１。该株稳定表达福氏及宋内氏双价Ｏ抗原，Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ显示该株表达Ｉｐａ蛋白，具有穿入ＨｅＬａ细胞的能力，穿入率为１９％。营养缺陷表型的回复突变率小于１０￣（－１１）。小白鼠毒力试验证明安全无毒，免疫小白鼠后对福氏及宋内氏毒株的攻击具有保护活性。