北京周边部队新兵上呼吸道感染病例病原快速筛查结果分析

目的了解北京周边部队新兵上呼吸道感染病例常见呼吸道病原谱构成。方法采集409例出现上呼吸道感染症状新兵的咽部分泌物，采用胶体金免疫层析法（GICA）快速筛查流感病毒A、B（FluA、B）抗原，呼吸道合胞病毒（RSV）抗原，腺病毒（ADV）抗原，留取中段尿液筛查军团菌（LP）抗原，快速培养法筛查肺炎支原体（MP）抗原。比较上述抗原阳性率在南、北籍新兵间及MP抗原阳性率在5个驻地（1～5组）新兵间的差异。结果病原总检出率为28．85％，抗原阳性率由高到低依次为MP（17．85％）、LP（9．78％）、RSV（0．73％）、FluA（0．49％），FluB和ADV未检出。MP、LP、RSV、FluA阳性率在南、北籍新兵中存在差异，但无统计学意义（P〉0．05）。5个不同驻地新兵MP阳性率差异有统计学意义（p〈0．01）。结论GICA和快速培养法筛查上呼吸道感染病原体方便、快捷。新兵在人训期间上呼吸道感染病原以MP为主。提高官兵防病意识，科学施训，改善官兵的居住环境，有利于降低上呼吸道感染的发病率。

肺癌K-ras基因突变与呼吸道合胞病毒感染关系的研究

目的 探讨肺癌K ras基因突变与呼吸道合胞病毒 (RSV)感染的关系。方法 应用反转录聚合酶链反应 (RT PCR)结合单链构象多态性分析 (SSCP)免疫组化和ELISA方法检测肺癌组织中RSV、K ras基因和血清sIgM抗体。结果 ①RT PCR显示17.9% ( 7/3 9)的肺癌标本中存在有RSV基因序列。②RSVRT PCR阳性的肺癌组织冰冻切片免疫组化显示RSV抗原在细胞浆呈弥漫性着色。③不经反转录反应直接作PCR扩增 ,则RSV阳性的标本不能观察到RSV特异的电泳区带。④SSCP电泳示 2 5 .6% ( 10 /3 9)的肺癌组织标本中K ras基因的第 12位密码子有突变。⑤肺癌组织RSV基因的检出与K ras基因突变结果经配对计数资料McNemar检验分析 ,χ2 =0 .3 6,P >0 .0 5。结论 肺癌组织内有RSV感染 ,可能和K ras基因的突变有关。

呼吸道感染488例非典型病原体及病毒IgM抗体检测分析

目的了解呼吸道感染患者非典型病原体及病毒IgM抗体检测情况，以期指导临床治疗。方法对2012年2月1日-2013年5月31日北京军区总医院呼吸内科收治的呼吸道感染488例采用间接免疫荧光法（IIF）定性检测9种呼吸道常见病原体及病毒嗜肺军团菌（LP）、肺炎支原体（MP）、贝氏柯克斯体（Cb）、肺炎衣原体（CP）、腺病毒（ADV）、呼吸道合胞病毒（RSV）、流感病毒A（FluA）、流感病毒B（FluB）、副流感病毒（PIV）IgM抗体，对检测结果进行分析。结果488例9种呼吸道病原体及病毒IgM抗体阳性总检出率为57．0％，两种及以上混合感染阳性检出率为13．9％，其中以FluAIgM抗体阳性检出率最高；春季和冬季FluAIgM抗体阳性检出率均显著高于夏秋季（P〈0．01），春季LPIgM抗体阳性检出率高于秋季（P〈0．01），其他病原体及病毒不同季节间IgM抗体阳性检出率差异无统计学意义（P〉0．05）；不同病种间呼吸道病原体及病毒IgM抗体阳性检出率比较差异无统计学意义（P〉0．05）。15～65岁年龄段LP及MPIgM抗体阳性检出率高于65～99岁年龄段（P〈0．05）。结论非典型病原体及病毒是呼吸道感染的重要病原，混合感染是其显著特点。临床医师除掌握其特点外，还应重视季节、年龄等因素的影响，以更好地制订临床治疗方案。

冬季成人急性呼吸道疾病住院患者肺炎支原体抗体检测及分析

目的了解冬季住院既往体健和有慢性肺部基础疾病患者急性呼吸道疾病的肺炎支原体感染情况。方法选择2008年12月中旬至2009年3月北京军区总医院呼吸内科收治的急性呼吸道疾病患者73例,应用被动明胶颗粒凝集试验检测患者血清中肺炎支原体抗体滴度,以抗体滴度≥1:160判为阳性。结果既往体健组的肺炎支原体感染率为48.3%,慢性肺部基础疾病组肺炎支原体感染率为22.7%,两组之间感染率差异有统计学意义(P<0.05)。既往体健组的年龄明显小于有基础性肺部疾病组(P<0.05),而且MP的感染率与性别无关(P>0.05)。结论既往体健的急性呼吸道感染青壮年患者肺炎支原体感染率明显高于有慢性肺部基础疾病的患者。

人呼吸道合胞病毒M2-1基因原核表达质粒的构建与表达

目的 构建人呼吸道合胞病毒 (hRSV)M2 1基因原核表达质粒载体 ,使其于原核细胞中表达。方法 利用Hep 2细胞培养hRSV ,提取感染细胞总RNA ,通过RT PCR扩增M2 1基因片段。目的片段与质粒pGEX 2T经EcoRI、XhoI双酶切后 ,连接、转化 ,筛选出阳性克隆。阳性克隆菌经诱导剂诱导后 ,表达M2 1融合蛋白。结果 成功地构建了M2 1基因原核表达质粒载体 ,实现了其于原核中的表达。结论 建立了hRSV基因M2 1原核表达载体 ,为进一步研究hRSV奠定基础。

儿童呼吸道非典型病原体的检测及方法评价

目的应用多种检测方法对临床儿童患者非典型呼吸道病原体进行检测,并对检测结果进行分析和方法评价,为临床提供呼吸道感染性疾病病因诊断依据。方法应用IFA法检测儿童常见9种呼吸道病原体的IgM抗体,同时应用GICA法对流感病毒抗原、快速培养法对MP进行检测,并分析比较检测结果。结果 453例样本中,9种IgM抗体总共检出94例,阳性率20.8%。其中应用GICA法检测Flu A和Flu B抗原与IFA法检测抗体总体一致率分别达98.9%和99.6%(Kappa值>0.75,一致性满意),培养法检测MP与PCR法总体一致率达97.6%(Kappa值>0.75,一致性满意)。结论非典型病原体是儿童呼吸道感染的重要病原体,应用IFA抗体检测、流感病毒GICA抗原检测、MP快速培养法能够为临床提供早期诊断和正确治疗的依据。

非典型肺炎使用无创呼吸机的护理技巧

无创呼吸机以使用方便、无需气管插管或切开、并发症少、可间歇使用等优点,广泛应用于临床,特别是在抢救重症非典型肺炎中已成为治疗早期的重要手段.我科对3例重症非典型肺炎患者,使用了型号IUITRA的CPAP呼吸机,效果满意.由于在辅助通气治疗中,存在患者是否能积极配合,护士能否尽快掌握无创呼吸机的操作程序等问题,特将其技巧介绍如下.

葡萄糖酸锌喷鼻剂预防上呼吸道感染的随机、双盲安慰剂对照试验

目的评价葡萄糖酸锌喷鼻剂对上呼吸道感染(上感)的预防效果及安全性。方法随机、双盲、安慰剂对照试验。纳入健康男性新兵营战士901人,用随机数字表法将其分为试验组(447人,给予葡萄糖酸锌喷鼻剂)和对照组(454人,给予安慰剂),持续用药1个月,患者和实施者均不知道分组情况。试验中途剔除试验组61人、对照组67人。1个月后计算两组上感、流感样病例的月发病率及各种症状的月发生率,并观察不良反应。结果773人(试验组386人,对照组387人)完成试验。试验组的上感和流感样发病率[分别为26.94%(104/386)和0.26%(1/386)]均低于对照组[34.37%(133/387)和2.06%(8/387);上感=5.010,P<0.05;流感=4.047,P<0.05)]。试验组在用药期间各种上感症状的发生率均低于对照组,其中4项症状(咳嗽、咽痛、鼻塞、流涕)的差别有统计学意义(P<0.05)。两组均无严重不良反应。结论葡萄糖酸锌喷鼻剂对上感有预防作用且安全性好。

呼吸道合胞病毒M2-1蛋白多克隆抗体的制备

目的 :制备呼吸道合胞病毒 (RSV)M2 - 1蛋白多克隆抗体 ,为进一步研究RSV生物学特性奠定基础。方法 :纯化RSVM2 - 1蛋白 ,免疫新西兰家兔 ,Westernblot检测M2 - 1多克隆抗体效价。结果 :Westernblot检测可见约 4 8kD的特异性条带 ,M2 - 1蛋白多克隆效价为 1∶10 0 0。结论 :本实验成功的地制备了RSVM2 -

呼吸道非典型病原体检测技术的应用与评价

目的:应用多种检测方法对临床常见呼吸道非典型病原体进行检测,并对检测结果进行分析和方法评价,为临床提供呼吸道感染性疾病病因诊断依据。方法:应用APAAP法、PCR法检测常见4种8型呼吸道病毒和MP病原,同时应用GICA法对流感病毒、快速培养法对MP进行检测,并分析比较检测结果。结果:441例样本中,病原体检出率为59.2%,其中混合感染率占阳性患者的36.8%。其中应用GICA法检测Flu A和Flu B与APAAP法总体一致率分别达90.0%和76.9%(Kappa值<0.75,一致性不理想),培养法检测MP与PCR法总体一致率达88.4%,(Kappa值<0.75,一致性不理想)。结论:非典型病原体是成人呼吸道感染的重要病原体,应用APAAP法、PCR法的方法能够为临床提供早期诊断和正确治疗的依据,但GICA法的检测敏感性和MP快速培养法的特异性有待于改进。

无创正压通气治疗慢性阻塞性肺疾病合并呼吸衰竭的临床疗效

目的：探讨无创正压通气治疗慢性阻塞性肺疾病（COPD）合并呼吸衰竭的临床治疗效果。方法：选择我院呼吸内科2009年5月至2010年12月收治的92例慢性阻塞性肺病合并呼吸衰竭患者,随机分为无创正压通气组和对照组,每组46例。无创正压通气组患者在药物治疗的基础上采用双水平正压通气（VPAPⅢ）,经口鼻面罩通气治疗。通气后24 h行血气分析。结果：无创正压通气组PaO2/FiO2显著较高（P〈0.05）,PaCO2显著较低（P〈0.05）。无创正压通气组住院天数317天,平均（7.9±5.1）天;3例因分泌物较多而改行气管插管通气,1例死亡。两组患者的住院时间、气管插管率差异均有统计学意义（P〈0.05）。死亡率差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：采用无创正压通气治疗COPD合并呼吸衰竭具有无创、安全、有效的优点,值得临床上推广使用。

发热与不发热呼吸道疾病成人患者流感的检测

目的应用快速筛查法对发热及不发热的成人呼吸道疾病患者的甲型流感病毒(Flu A)、乙型流感病毒(Flu B)进行检测并结果分析,以了解流感病毒的流行及分布情况,为流感的防治奠定基础。方法对860例不发热呼吸道疾病成人患者和发热门诊407例发热成人患者鼻咽分泌物样本进行Flu A和Flu B的快速筛查检测,并对检测结果进行统计学分析。结果不发热病人Flu A检出率为9.5%,Flu B检出率为4.4%,发热病人Flu A检出率为32.9%,Flu B检出率为5.2%。发热病人的Flu A检出率明显高于不发热病人(P<0.01),而Flu B检出率二者则没有显著差异(P>0.05)。结论 Flu A和Flu B是呼吸道感染的重要病原体,并且能够共同流行,发热是其感染的重要症状之一,应用流感快速筛查的方法能够为临床提供一定的早期诊断依据。

三种呼吸道病原体快速筛查的临床研究

目的为了解三种病原体的分布情况和推广呼吸道常见病原体的快速筛查方法提供科学的依据。方法对2009年8月~2010年5月收治的860例呼吸道疾病患者的鼻咽分泌物样本,应用快速筛查方法对甲型流感病毒（FluA）、乙型流感病毒（Flu B）、肺炎支原体（MP）三种呼吸道感染常见病原体进行检测,对其中70例进行Flu A血清学检测,并对检测结果进行分析。结果 860例样本快速检测中,Flu A检出率为9.5%,Flu B检出率为4.4%,MP检出率为10.1%,70例样本中,快速检测Flu A方法与血清学检测方法总体一致率达94.3%,两种检测结果一致性较高（Kap-pa=0.767）,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 Flu A、Flu B和MP是呼吸道感染的重要病原体,应用快速筛查方法能够为临床提供早期诊断和正确治疗的依据。

新兵呼吸道感染肺炎支原体快速检测的结果分析

目的应用快速检测方法对出现呼吸道症状的新兵行肺炎支原体(MP)抗原和抗体的检测,并探讨其临床意义。方法收集北京部队5个营区新兵中出现咳嗽、咳痰、流涕、咽痛等呼吸道症状的398例患者的咽部分泌物,应用快速培养法检测MP抗原,应用间接免疫荧光法(IFA)对腋温≥37.3℃或抗原阳性的新兵MP的IgM抗体进行检测,分析检测结果。结果 MP抗原阳性率4.27%;快速培养法检测MP抗原与IFA法检测同一患者相应的IgM抗体结果的差异有统计学意义(P<0.05);不同籍贯、不同营区的新兵MP恢复期IgM抗体检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论 MP是成人呼吸道感染的重要病原体,快速培养法、IFA法能够提供早期诊断和治疗的依据,可以作为诊断MP感染的优选检测方法。

成人呼吸道合胞病毒感染对肺癌发生发展影响的研究

我们实验室自20世纪80年代末以来进行了有关呼吸道合胞病毒(RSV)感染的一系列研究,发现RSV不仅感染小儿,也会引起成人的各种严重感染.还发现肺癌患者鼻咽部分泌物中RSV的检出率比一般呼吸道感染病人要高1倍.本研究旨在探索成人RSV感染与肺癌的关系,即RSV感染对肺癌细胞发生发展影响的可能作用机制.本课题对成人呼吸道感染病原学的研究有较大促进作用,提高了临床病原学的诊断,避免滥用抗生素,也为生物因素致肺癌的病因研究提供新线索,为肺癌的进一步治疗提供新思路.

人呼吸道合胞病毒转录调节基因转染PAa和A549肺腺癌细胞系

目的探讨人呼吸道合胞病毒(hRSV)对肺癌细胞的影响。方法构建其转录调控因子M2-1基因真核表达质粒pXJ-41/M2-1,用DNA测序、酶切、PCR等方法鉴定基因重组情况。结果DNA测序表明该基因具有高度保守性;经脂质体转染、以-βactin为参照进行RT-PCR,筛选出了高效稳定表达M2-1基因的人肺腺癌PAa和A549细胞株,并经Westernblot验证有M2-1蛋白的表达。结论为进一步探讨M2-1基因在肺癌发生发展中的作用打下基础。

呼吸道合胞病毒M_(2-1)基因在人肺腺癌PAa细胞的转染及表达

目的 拟将呼吸道合胞病毒M2 -1基因转染人肺腺癌PAa细胞并获得表达。方法 应用基因重组和基因转染技术 ,将在呼吸道合胞病毒转录及复制过程中起调控作用的M2 -1基因cDNA片段插入质粒 pXJ41,再转染人肺腺癌PAa细胞 ,并通过RT -PCR和免疫荧光及Westernblot等技术鉴定M2 -1基因表达。结果 ①阳性重组子 pXJ41/M2 -1经双酶切 ,产生 6 2 0bp大小片段 ;②RT -PCR扩增M2 -1基因可见 6 2 0bp清晰的条带 ;③免疫荧光染色见转染M2 -1基因的PAa细胞胞浆内可见特异性绿色荧光 ;④Westernblot检测转染M2 -1基因的PAa细胞 ,于 2 2 0 0 0处可见特异性条带。结论 呼吸道合胞病毒M2

成人与儿童三种呼吸道病原体的检测比较

目的：应用快速筛查方法对成人和儿童呼吸道疾病患者的甲型流感病毒（Flu A）、乙型流感病毒（Flu B）、肺炎支原体（MP）进行检测并结果比较,以了解三种病原体在不同人群中的流行及分布情况。方法：对2011年9月~2012年2月间呼吸科408例呼吸道疾病成人患者和儿科279例呼吸道疾病儿童患者鼻咽分泌物样本,进行Flu A、Flu B、MP的快速筛查检测,并对检测结果进行统计分析。结果：成人患者Flu A检出率为2.5%,Flu B为0.2%,MP为6.4%；儿童患者Flu A检出率为8.2%,Flu B为2.9%,MP为17.6%。儿童患者的三种病原体检出率均明显高于成人患者（P〈0.01）。结论：Flu A、FluB、MP是呼吸道感染的重要病原体,儿童是易感人群,检测数据对探讨本地区三种病原体的流行及分布情况等有着重要的意义。