一种白腐真菌的分离、鉴定、培养及产漆酶条件

白腐真菌是一类降解木质素使木材形成白色腐朽的担子菌，往往具有高产胞外漆酶的活性. 从北京农学院校园内分离到一株高温型、高产漆酶白腐真菌菌株，编号为BUA-01. 结合形态学特征与ITS序列分析，确定其分类学地位；进一步研究其菌丝生长的最适碳源、氮源、碳氮比（C/N）、生长因子、最适温度和最适pH值；利用不同浓度Cu^2＋（CuSO4）的诱导，探讨液体发酵条件下对胞外漆酶产量的影响；通过向发酵液中加入3种偶氮染料（依文思蓝、甲基橙和铬黑T），研究菌株对染料的降解效果. 结果表明，该菌株与毛栓菌（Trametes hirsuta）的同源性最高，为100%，遗传距离为0，确定BUA-01菌株为栓菌属（Trametes）真菌. 菌丝体生长的最适碳源为淀粉，最适氮源为黄豆粉、酵母浸粉，最适C/N值为40/1和10/1，最适温度为37 ℃，最适pH为6.0-7.0，供试生长因子对菌丝生长无显著促进作用. 0.25 mmol/L的Cu^2＋对胞外漆酶产量有极显著的促进作用，在96 h时，发酵液的活性达到最高，为1081.33 ± 6.3 U/mL，是对照组的26倍. BUA-01菌株对偶氮染料降解效果显著，12 h对依文思蓝、甲基橙和铬黑T的脱色率分别为93.31% ± 0.16%、92.37% ± 0.42%和79.25% ± 0.64%. 本研究表明菌株BUA-01在产胞外漆酶和染料降解方面具有潜在应用价值. （图3 表7 参42）

野生槐耳的分离、鉴定、培养条件及产漆酶能力

以采集自北京香山公园加拿大杨（Populus canadensis）的槐耳子实体为材料,利用组织分离获得纯培养并保存,编号为XS-01.结合形态与ITS鉴定确定其分类地位,进一步开展菌丝最适生长条件和液体发酵产漆酶研究.通过PCR扩增,获得长度为598 bp的部分ITS序列（KY933481）,采用MEGA 6.0构建发育树、测定遗传距离,XS-01与槐生多年卧孔菌（Perenniporia robiniophila）相似性最高,为100%,遗传距离为0.000.进一步结合子实体和菌丝形态,确定XS-01为槐生多年卧孔菌.结合生长速度和长势,确定了该菌株的最适生长碳源为淀粉和麦芽糖,最适生长氮源为酵母浸粉,最适生长C/N比为30/1-60/1,最适生长温度为32℃,最适生长pH 7,最适生长因子为VB1.Cu^（2＋）诱导的胞外漆酶发酵研究表明,1.0 mmol/L Cu^（2＋）对漆酶产量有显著的促进作用,产量在96 h达到最大值,为417.5 U/mL,比对照组提高93.4%,而2.0 mmol/L Cu^（2＋）对漆酶产量有显著抑制作用,96 h酶活为79.0 U/mL,是对照组的36.6%.本研究获得具有高产胞外漆酶能力的槐耳菌株,具有潜在的应用开发价值.