东北传统豆酱发酵过程中微生物的多样性

以东北传统发酵豆酱为研究对象,分析豆酱发酵过程中微生物群落的动态变化。分别选择发酵豆酱0、35、65、75和105 d(成品豆酱)作为研究材料,通过PCR-DGGE分析微生物多样性,检测了豆酱发酵过程中蛋白质和氨基酸态氮的变化。结果表明,豆酱发酵过程中主要优势细菌为芽孢杆菌和乳酸菌,芽孢杆菌包括枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、淀粉液化芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌的近缘种等;主要乳酸菌为乳球菌、明串珠菌、魏斯氏菌等种属细菌的近缘种;东北豆酱发酵过程中优势真菌为米曲霉、散囊菌和谢瓦氏曲霉的近缘种,随发酵时间延长数量逐渐减少;粗蛋白相对含量先略有平稳上升后下降,最后成品酱粗蛋白含量下降为24.76%;氨基态氮含量一直在增加,成品酱中为101.2 g/kg。

蔬菜种植对土壤微生物性状的影响

土壤微生物作为土壤中活的有机体系,是衡量土壤质量的重要指标之一。随着蔬菜消费量的增加,我国蔬菜种植面积不断扩大,引起的问题不断出现。通过综述蔬菜种植各种因素对土壤中微生物数量等性状的影响,以期为农业的可持续发展提供一定的参考依据。

食品安全综合实验教学改革回顾

本文回顾了十多年来为了适应社会对食品方面的人才需求多次修改并完善食品安全综合大实验课程的本科生培养方案，从实验内容、实验技术和教学手段等方面阐述了其教育教学改革历程，以便从中吸取经验和教训更好地开展今后的工作。

菠菜土壤中典型抗生素的微生物降解及细菌多样性

【目的】研究抗生素在土壤中残留情况及其对土壤细菌多样性的影响,为今后抗生素类污染物的土壤微生物修复和环境风险评价提供依据。【方法】通过在种植菠菜土壤中添加抗生素的盆栽试验,以庆大霉素和泰乐菌素及对应功能降解微生物(庆大霉素降解真菌FZC3和泰乐菌素降解细菌无色杆菌)为研究对象,设计7个处理,分别为庆大霉素(CG)、庆大霉素+FZC3(CGF)、泰乐菌素(CT)、泰乐菌素+无色杆菌(CTW)、两种抗生素(CM)、两种抗生素+两种降解菌(CMM)和空白(CC),其中庆大霉素残留率的对比组为CG、CGF、CM和CMM处理;泰乐菌素残留率的对比组为CT、CTW、CM和CMM处理。借助固相萃取-液质联用及Illumina高通量测序技术,对试验过程中抗生素残留及其对土壤细菌多样性影响进行研究。【结果】添加FZC3和无色杆菌可分别显著提高土壤中庆大霉素和泰乐菌素的去除效果,但随着菠菜的生长,各处理间抗生素残留率差异逐渐变小:第一周不同处理抗生素残留率差异最为显著,其中CMM处理中庆大霉素的残留率最低,为53.93%;CTW处理中泰乐菌素的残留率最低,为3.92%。第一周CGF处理比CG处理中庆大霉素残留率下降了约3.3%,CTW处理比CT处理中泰乐菌素的残留率降低了4.1%。同时,添加抗生素及其降解菌会不同程度影响土壤细菌丰富度和多样性:与CC相比,CG、CTW和CMM 3个处理中土壤细菌的丰富度和多样性有显著差异(P<0.05)。FZC3可以缓解庆大霉素对土壤细菌的抑制作用,与CC处理相比,CG处理马赛菌和芽胞杆菌的相对丰度更高,而CGF与CC组群落结构相似;无色杆菌对土壤细菌菌群的影响程度大于其对缓解泰乐菌素毒性抑制作用的影响,相较于CT和CC处理,CTW处理中无色杆菌的添加抑制了土壤其他细菌的生长,而CT与CC处理各属细菌菌群相对丰度差异不显著。CM与CC处理相比,土壤中细菌丰富度、多样性和细菌群落结构均无显著差异,表明两种抗生素同时添加其相互间呈现拮抗作用。【结论】土壤中庆大霉素和泰乐菌素的残留对土壤微生物群落结构有不同程度的影响。添加功能微生物可以提高两种抗生素的去除效率,FZC3添加可以缓解庆大霉素对土壤细菌的影响,而无色杆菌添加对土壤细菌菌群影响较大。

次氯酸钠对鲜切洋葱品质与微生物多样性影响研究

为评价次氯酸钠对鲜切洋葱安全营养品质与微生物多样性的影响,采用工厂消毒鲜切蔬菜方式,用次氯酸钠消毒鲜切洋葱,分析在25℃贮藏条件下感官指标、生理生化指标、营养指标、微生物指标、风味物质和微生物多样性。研究发现,随着贮藏时间延长:鲜切洋葱感官品质下降,消毒处理组比未消毒处理组下降慢;0~4 d内未消毒组pH持续下降至4.75左右,消毒组pH值基本不变,始终保持在6.4左右;失重率逐渐上升至4%(消毒组)和4.5%(未消毒组)。消毒和未消毒鲜切洋葱POD酶活性均持续下降;鲜切洋葱Vc和类黄酮含量不断下降,4 d后消毒组Vc高于未消毒组,但类黄酮含量无显著差异;菌落总数上升,但消毒组和未消毒组无显著差异;鲜切洋葱经次氯酸钠消毒后,损失了洋葱特有的风味物质甲基丙基二硫化合物和二甲基四硫化合物,3~4 d后,未消毒和消毒组洋葱中均损失了醇类和大部分酯类芳香物质,以及洋葱特有的风味物质二丙基二硫,其中未消毒洋葱还损失了甲基丙基二硫化合物和二甲基四硫化合物,产生了具有硫臭异味的二甲基三硫醚,以及其他物质硫代丙酰胺、双酚A和棕榈酸,表明鲜切洋葱品质的下降与风味有关。洋葱中细菌的物种多样性随着贮存时间延长降低,次氯酸钠消毒可以降低洋葱中细菌物种多样性。次氯酸钠对洋葱中的细菌总数无明显变化,对洋葱中的肠细菌属和明串菌属细菌有明显抑制作用,对魏斯氏属细菌可能具有促进作用。研究结果表明,次氯酸钠可以延缓鲜切洋葱感官品质、失重率、维生素含量的降低,破坏POD酶的活性,对类黄酮含量无影响,使醇类、酯类物质与部分硫代化合物减少,产生具有硫臭异味的二甲基三硫醚。同时抑制肠细菌属和明串菌属细菌生长,对魏斯氏属细菌无抑制作用。

EDXRF光谱法快速检测猪预混合饲料中的镉铅砷

试验旨在探讨能量色散X射线荧光(EDXRF)光谱快速检测猪预混合饲料中镉(Cd)、铅(Pb)和砷(As)元素的新方法。样品加入淀粉和水,经94℃水浴糊化后,用EDXRF光谱扫描,通过光谱识别进行定性,标准加入法进行定量。结果表明:各元素的EDXRF谱峰无干扰,在考察的浓度范围内,方法线性良好(R2>0.998);Cd、Pb和As的检出限分别为1.06、1.68、1.97 mg/kg;总体回收率为93.72%~105.10%;总体相对标准偏差为2.30%~9.40%。说明该方法简便快速,准确可靠,能够满足猪预混合饲料Cd、Pb和As快速检测的需要。

臭氧溶解特性及对哈密瓜中农药残留降解的研究

为探讨臭氧水处理对农残降解的影响,研究了臭氧水的溶解特性以及臭氧水在不同浓度、不同处理时间、不同pH和不同处理方式对哈密瓜中4种农残(马拉硫磷、毒死蜱、高效氯氰菊酯和百菌清)降解的效果。结果表明:臭氧的溶解度随吸收液体积增大、pH的升高而下降,pH 4时的溶解度最高为10.15 mg/L;哈密瓜中4种农残的降解率随着臭氧浓度的增加、浸泡时间的延长均有不同程度的提高;动态臭氧水处理的降解率显著高于静态处理(P<0.05);pH 10的臭氧水动态处理30 min效果最佳,马拉硫磷、毒死蜱、高效氯氰菊酯、百菌清4种农药的降解率分别是90.87%、85.62%、78.31%和85.26%。

果蔬中农药残留降解方法研究进展

随着食品安全问题日益受到重视,果蔬中的农药残留已成为世界各国的研究热点。目前国内外有关果蔬中农药残留降解方法的研究报道很多,本文全面综述了果蔬中农药残留降解的方法和技术,主要从物理、化学和生物降解3个方面阐述。其中物理方法主要包括洗涤、加工和储藏等;化学方法主要是指采用化学试剂、臭氧和光照等方法;而生物方法是利用生物酶破坏农药的结构或者利用基因工程将生物体内能降解农药的酶基因转移到载体基因中,从而降解农药。并对新降解技术如油茶素内酯降解法等进行了展望,以期为进一步研究提供参考和借鉴。

北京地区引种文冠果品质分析

【目的】为了了解北京地区文冠果引种栽培的经济价值,对文冠果种子品质进行综合评价分析。【方法】选取北京昌平、北京怀柔和内蒙古赤峰三个地区的文冠果为试验材料,对种子形态和种子品质进行检测分析。【结果】北京昌平、北京怀柔和内蒙古赤峰三个地区的文冠果种子形态性状、出仁率、种仁的维生素C、总糖、总酸、灰分、矿质元素含量各不相同。三个地区间文冠果种仁含油量无显著差异。脂肪酸主要组成中,含量较多的是亚油酸和油酸以及亚麻酸,分别是19.88%~27.59%、17.90%~19.10%和7.23%~9.06%;棕榈酸、硬脂酸含量大致都在3.00%~4.00%之间;北京昌平、北京怀柔与引种地内蒙古赤峰比较,北京昌平引种的文冠果硬脂酸、亚油酸、亚麻酸和北京怀柔引种的文冠果亚麻酸显著高于内蒙古赤峰的文冠果,油酸、棕榈酸含量等三个地区间均无显著差异。

葡萄酒酿造过程中12种残留杀菌剂的归趋追踪

追踪了葡萄酒酿造过程中12种残留杀菌剂的归趋,为葡萄酒残留控制提供了有实用价值的数据。结果表明,各杀菌剂的酒渣残留分量为41.63%~95.91%,平均为66.08%;酒泥残留分量为1.25%~21.40%,平均9.54%;降解分量为2.43%~40.45%,平均为17.24%,其中酒精发酵期无降解,二次发酵期降解分量为2.09%~17.62%,平均为10.82%,陈酿期（陈酿3个月时）降解分量为0.84%~23.46%,平均为6.42%;酒汁中各杀菌剂的平均残留分量最低,为7.14%,各残留分量分别为多菌灵20.56%、甲霜灵14.32%、精甲霜灵9.34%、嘧霉胺7.15%、烯酰吗啉6.49%、氟环唑2.66%、戊唑醇2.33%、氟硅唑1.71%、咪鲜胺0.40%、吡唑醚菌酯1.00%和腐霉利12.55%,且与其log P值显著负相关,脂溶性越强,葡萄酒中的残留分量越小。

液相色谱—串联质谱法快速筛查葡萄中的农药和相关污染物

依据已知目标物液相色谱—串联质谱检测的母离子和子离子参数,设计了葡萄样品中512种农药和相关污染物的快速筛查分析方法。葡萄样品经打浆、乙腈提取和氨基柱净化,液相色谱—串联质谱多重反应监测方式进行筛查检测;以同一保留时间处,目标物两个子离子色谱峰同时出现,作为目标物疑似检出的依据;疑似检出目标物通过与标准物质比较进行确证和内标法定量。实际应用表明,多菌灵、腐霉利、嘧霉胺、烯酰吗啉和吡唑醚菌酯是试验葡萄样品中的主要农药污染物,含量远低于其最大残留限量。

奶粉中三聚氰胺含量的NIR检测技术

以奶粉为原料,采用偏最小二乘法(PLS)建立奶粉中添加的三聚氰胺含量的预测模型,旨在利用近红外分析方法无损、快速、准确的特点,探究其在奶粉掺假识别中应用的可行性。结果表明:大梯度模型覆盖范围广,模型参数Rc为0.9997,Rp为0.9996,RMSEP为0.245,RMSEC为0.275,RMSEC/RMSEP为1.122,模型线性关系良好,预测值与实际值拟合良好,在较大浓度情况下可以应用于未知样品中三聚氰胺含量的检测;小梯度预测模型受仪器检测限的影响,Rc为0.9991,Rp为1.0000,虽然线性关系良好,但是模型参数RMSEP为0.176,RMSEC为0.0275,RMSEC/RMSEP为0.156,预测值与实际值的拟合情况不理想,无法实现三聚氰胺含量的精确预测,实际应用中具有一定的局限性,但可以对其是否掺假正确定性。

牛奶蛋白与四种有机磷农药的结合行为研究

采用平衡透析法研究了牛奶蛋白与敌敌畏、杀螟松、马拉硫磷和毒死蜱四种有机磷农药的结合行为,探明pH值及离子强度对牛奶蛋白结合农药的影响。结果表明,牛奶蛋白具有结合毒死蜱的能力,且浓度越高,其结合毒死蜱的量越多,两者具有一定的量效关系,20mg牛奶蛋白结合毒死蜱的量为(0.49±0.06)μg。体系的pH值(3.5、5.5、7.5和9.5)和离子强度(0.1、0.5和1.0mol/L)对两者的结合影响不大。可见,食物蛋白质能够与农药发生相互作用,以此可以降低人体血液中的农药残留,缓解相应的毒性。

铜绿假单胞菌检测方法的比较与优化

通过铜绿假单胞菌检测方法比较和优化以期获得一种准确度高、操作简单且对实验条件要求不高的检验方法。实验以VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定系统鉴定结果为参考,采用GB 8538.57-2016和GB/T7918.4-1987中铜绿假单胞菌的检测方法,对27株试验菌株进行鉴定试验。结果表明,GB 8538.57-2016方法检测结果准确度最低,假阳性检出率为29.6%,GB/T7918.4-1987假阳性检出率为7.4%。以GB 8538.57-2016铜绿假单胞菌的检测方法为例,优化后的检测方法增加了血琼脂平板培养、革兰氏染色及镜检和对血平板所有可疑菌落进行绿脓菌素试验。用改进后的GB 8538-2016铜绿假单胞菌检测方法对27株试验菌株进行验证试验,检验结果与VITEK 2 Compact一致。

38%唑醚·啶酰菌悬浮剂在草莓和土壤中的残留及消解动态

为评价38%唑醚·啶酰菌悬浮剂（有效成分质量分数：12.8%吡唑醚菌酯,25.2%啶酰菌胺）在农产品和环境中的安全性,于2015年和2016年在中国北京及山东分别进行了该药剂在草莓及土壤中的残留及消解动态试验,建立了同时测定草莓及土壤中吡唑醚菌酯和啶酰菌胺残留量的高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）检测方法。样品用乙腈提取,经N-丙基乙二胺（PSA）净化,电喷雾多反应监测模式HPLC-MS/MS检测,基质匹配标准曲线外标法定量。结果表明：在草莓和土壤中添加0.015～3.0 mg/kg吡唑醚菌酯,平均回收率分别为97%～107%和94%～106%,相对标准偏差（RSD）分别为1.8%～3.9%和2.2%～4.1%,定量限（LOQ）为0.015 mg/kg;添加0.03～6.0 mg/kg啶酰菌胺,平均回收率分别为90%～101%和92%～97%,RSD为4.6%～13%和2.9%～14%,LOQ为0.03 mg/kg。田间试验结果表明,吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在草莓和土壤中的消解动态均符合一级动力学方程,在草莓中的半衰期分别为4.8～6.0 d和5.1～11 d,在土壤中为3.4～10.0和3.4～6.0 d。采用38%唑醚·啶酰菌悬浮剂,分别按有效成分228和342 g/hm2于草莓幼果期施药,最多施药4次,采样时间距离最后一次施药的间隔时间为3、5、7 d。吡唑醚菌酯在草莓中的最大残留量为0.13 mg/kg,低于欧盟规定的最大残留限量（MRL）（0.5 mg/kg）;啶酰菌胺在草莓中的最大残留量为0.78 mg/kg,低于中国的MRL值（3.0 mg/kg）。建议38%唑醚·啶酰菌悬浮剂在草莓上的安全间隔期为3 d,试验结果为农药在草莓中的安全使用和农产品的食用安全提供了数据支持。

4种常见农药的耐受真菌筛选、鉴定及降解作用初探

【目的】针对吡虫啉、草甘膦异丙胺盐、乙酰甲胺磷、高效氯氰菊酯4种常见农药,利用实验室前期分离保存的26种真菌,开展农药高耐受菌筛选,并对高抗菌株进行分子鉴定及农药降解率研究。【方法】以分别添加吡虫啉等4种农药的培养基,进行农药耐受菌株初筛。对获得的4种高抗菌株进行菌丝体总DNA提取、ITS扩增与测序、BLAST在线比对,与GenBank进行序列比对,利用MEGA 6.0软件构建发育树,并计算遗传距离。进一步以HBY-11菌株为对象,测定液体发酵条件下对4种农药的降解率。【结果】结果表明,HBY-11、HBY-12、HBY-17和HBY-23菌株对检测农药的抗性较强,在4种农药的培养基中的平均生长速率分别为:6.92±0.63、6.75±0.25、6.67±0.38、2.79±0.07;6.58±0.14、5.92±0.14、5.25±0.00、1.46±0.07;6.25±0.25、5.5±0.66、3.25±0.13、0.33±0.04 mm/d;3.96±0.14、4.67±0.26、3.0±0.13、0.6±0.07mm/d。HBY-11菌株为残孔菌属(Abortiporus),HBY-12菌株为栓菌属(Trametes),HBY-17菌株为浅黄囊孔属(Flavodon),HBY-23菌株为亚灰树花菌属(Meripilus)。HBY-11对吡虫啉的降解率在12h时最高(66%);对草甘膦异丙胺盐的降解率在72h时最高(65%);对乙酰甲胺磷的降解率在12h时最高(79%);对高效氯氰菊酯的降解率在72h时最高(55%)。

原料乳中金黄色葡萄球菌环介导等温扩增(LAMP)检测方法的建立及应用

为了建立原料乳中金黄色葡萄球菌的环介导等温扩增(LAMP)检测方法,本研究根据金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶基因(nuc)在保守区域设计特异性引物,建立LAMP检测方法,并用于原料乳中金黄色葡萄球菌的快速检测。结果表明,针对金黄色葡萄球菌的基因组DNA,使用设计合成的4条引物和建立的LAMP方法能够有效检测金黄色葡萄球菌DNA,每25.0μl反应体系的灵敏度为110.0 fg,并且此方法针对金黄色葡萄球菌具有良好的特异性。针对原料乳中金黄色葡萄球菌的污染,建立的LAMP检测方法的检测限为67 CFU/ml。本研究结果为进一步将LAMP方法应用于食品中金黄色葡萄球菌的安全检测奠定了基础。

纯化作用对五味子木脂素抗氧化性的影响

[目的]研究五味子木脂素在不同纯化程度下的抗氧化性能,为开发富集木脂素的五味子功能食品提供理论依据。[方法]采用微波-超声波联用法提取五味子木脂素,得木脂素粗提液;首先用AB-8大孔吸附树脂对粗提液初步纯化,用p H10、体积分数100%的乙醇进行洗脱;采用高效液相色谱进行定性分析,检测方法为：Venusil XBP C18柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为甲醇（B）-水（A）,梯度洗脱条件：0～7 min（67%B）、7～13 min（67%～75%B）、13～22 min（75%～80%B）、22～30 min（80%～67%B）,检测波长220 nm,流速0.8 m L·min-1,进样量10μL,柱温为室温;面积归一法计算木脂素纯度,粗提液中木脂素纯度为29.33%,大孔树脂初步纯化后的木脂素纯度为58.95%;再采用制备液相色谱进一步纯化粗提液,检测方法为：Adsorbosphere XL C18柱（250 mm×22 mm,5μm）,流动相为甲醇（A）-水（B）,梯度洗脱条件：0～10 min（75%A）、10～15 min（75%～78%A）、15～38 min（75%～80%A）,检测波长220 nm,流速10 m L·min-1,进样量3 m L,柱温为室温;经制备液相纯化后,得到4个木脂素单体,五味子醇甲纯度为95.40%,五味子酯甲纯度为98.85%,五味子甲素纯度为94.76%,五味子乙素纯度为96.44%;比较不同纯度组分木脂素的还原能力,对·O2-、·OH、H2O2、DPPH自由基、ABTS自由基的清除能力,评价纯化作用对五味子木脂素抗氧化能力的影响。[结果]在0.1～0.5 mg·m L-1范围内,不同纯度组分的五味子木脂素均表现出一定的抗氧化能力,但均低于抗坏血酸;纯化后的木脂素抗氧化能力均低于未纯化的木脂素粗提液,制备液相得到的单体中,五味子乙素的抗氧化能力较强。[结论]五味子木脂素粗提液中含有多糖等成分,五味子多糖具有抗氧化能力;木脂素、多糖等成分协同作用,抗氧化能力强;经大孔树脂初步纯化后,除去了多糖等大分子物质,单独的木脂素抗氧化能力相对变弱。此结果说明,随着纯化程度增大,物质组分单一程度高,物质的生物活性不一定随之增强;制备液相得到的单体中,五味子乙素的抗氧化能力较强,原因可能与其联苯环、辛烯环上的取代基有关。

预处理对核桃肽抗氧化活性的影响

比较了不同的预处理方式对低温和高温脱脂核桃粕酶解得到核桃肽的抗氧化活性和得率的影响。结果表明,对低温脱脂核桃粕进行加热、超声波、微波和碱提等预处理可以提高其酶解得到核桃肽的抗氧化活性和得率。其中,碱提得到核桃肽的抗氧化活性和得率分别为0.85±0.01、32.55%,微波预处理得到核桃肽的抗氧化活性和得率分别为0.86±0.03、34.63%,高于直接酶解得到的核桃肽的抗氧化活性和得率(0.72±0.08、18.46%),且差异具有显著性(p<0.05)。而高温脱脂核桃粕进行碱提等预处理与直接酶解得到核桃肽的抗氧化活性无明显差异。

苦荞总皂苷的提取工艺优化

为了确定热回流法提取苦荞总皂苷的最佳提取工艺条件,采用响应曲面分析方法,研究提取温度、提取时间、液固比、乙醇体积分数及其交互作用对苦荞总皂苷提取效果的影响。用SAS及Design expert软件确定了苦荞总皂苷的最佳提取工艺参数为:乙醇体积分数69.51%,液固比12.37 mL/g,提取温度50.7℃,提取时间63.24 min,总皂苷得率最大值为22.82 mg/g。同一条件下进行验证试验,实际测得的平均得率为(22.54±0.31)mg/g(n=3),试验数据稳定,说明回归模型能较好地预测苦荞中总皂苷的提取得率。