食品微生物实验微视频改革初探

食品微生物实验课是一门实践课程,学生实际操作环节的监督显得尤其关键和重要。文章分析了传统实验教学方法的优劣,引入实验课微视频对实验课教学进行改革,通过课堂多媒体播放,和微信平台推送微视频给学生。实验课微视频的应用易于学生课前复习课后巩固,也利于老师掌控实验课教学秩序,提高了教学效果。

食品微生物实验微视频内容设计及教学设计初探

本文分析了食品微生物实验教学中存在的问题,并对实验微视频教学改革进行了初探。在食品微生物实验微视频的应用中,对实验内容和教学阶段进行了精心的设计,使得微视频的引入对学生的学习效果和老师对课堂的秩序的控制都起到的积极作用。

体细胞组成对Cheddar干酪蛋白质水解及品质的影响（英文）

近年来,我国的干酪消费量迅速增加。小规模牧场的手工挤奶方式可能会导致体细胞混入原料奶中,从而影响终产品干酪的品质。但是,体细胞组成及相应酶的活力对干酪品质的影响尚未阐明。该研究分别从牛乳房表面、乳房炎牛乳和正常牛乳收集体细胞。通过将体细胞分离再与脱脂乳混合,原料乳质量的一致性得到保证。将含不同体细胞组成的牛乳用于Cheddar干酪制作,分别为干酪A,B和C。3种干酪的原料乳中,上皮细胞质量分数最高组为干酪A的原料乳(65.41%),巨噬细胞和淋巴细胞质量分数最高组为干酪B的原料乳(分别为78.15%和12.15%),而多核中性粒细胞在干酪C的原料乳中质量分数最高(34.23%)。结果表明,成熟过程中各干酪的蛋白酶活性和蛋白水解程度差异显著(P<0.05)。成熟90d后,干酪C中的血纤维蛋白溶酶和组织蛋白酶B活性显著高于其他组。此外,在整个成熟过程中,干酪中α_s1-,α_s2-和β-酪蛋白的存留率,以及pH值4.6的可溶性氮和12%三氯醋酸可溶性氮的质量分数均为C组<B组<A组。另外,3组试验干酪中干酪A的硬度最高,B和C之间无显著性差异。综上所述,体细胞对干酪品质的影响与体细胞的类型有关。体细胞中上皮细胞的增加对干酪品质的影响较小,而多核中性粒细胞的增加对干酪品质有显著影响。

牛乳和豆乳配比对酸奶品质特性的影响

为了探究牛乳与豆乳配比对酸奶理化性质、流变学特性、微观结构和感官特性的影响,将不同质量配比(100∶0、75∶25、50∶50、25∶75、0∶100)的牛乳与豆乳混合,加入1 g/L直投式发酵剂,在43℃条件下发酵至pH=4.8,在4℃条件下贮存并进行分析。结果表明,随豆乳比例的增加,酸奶中蛋白质含量增加,脂肪含量降低。与纯牛乳酸奶相比,混合乳酸奶的发酵时间缩短,持水力降低,储能模量和损耗模量增加;纯豆乳酸奶的持水力、储能模量和损耗模量居中。纯牛乳或纯豆乳制备的酸奶具有光滑规整的微观结构,混合乳酸奶微观结构粗糙,有大量的微孔。整体上,50%牛乳和50%豆乳制备的酸奶在28 d贮存期内具有良好的风味、较高的感官分数和贮存稳定性。

葡萄柚籽提取物和聚乙烯包装对香椿贮藏品质的影响

香椿(Toona sinensis)的嫩叶和嫩芽营养丰富,风味独特,但香椿属于季节性蔬菜,极易腐烂,严重影响货架期。葡萄柚籽提取物(grapefruit seed extract,GSE)是天然的强抗氧化剂、天然防腐剂。使用0.02 mm厚度的聚乙烯(polyethylene,PE)薄膜包装香椿并利用0.1%、0.3%和0.5%浓度的GSE进行处理,研究不同处理下贮藏期间香椿感官品质与理化指标的影响。结果表明:不同处理均具有一定的保鲜效果。其中,0.5%GSE+PE处理可以显著延缓香椿褐变和腐烂,降低失重率,控制叶绿素含量的升高,抑制呼吸速率和乙烯释放速率。研究结果为香椿的采后保鲜提供了重要的理论依据和实践参考。

品质因子和益生菌对草莓品质和贮藏的影响

运用品质因子和EM菌肥对草莓生长进行干预,通过代替传统的化学肥料来改善草莓的营养品质,降低草莓采后的腐烂率,一定程度上延长贮藏货架期,使草莓尽可能持续保鲜。结果表明,经过品质因子和EM菌肥处理的草莓,在6d的贮藏期间,腐烂率下降20.30%,营养品质处理组与对照组相比,除可溶性糖含量的表征没有显著性差异外,其余表征均呈现显著性差异(p<0.05)。进一步证实品质因子和EM菌肥对草莓的品质和贮藏具有一定的影响作用。

等离子体处理对生鲜牛肉杀菌效果及营养品质的影响

采用大气等离子体技术对生鲜牛肉进行处理,研究该处理对牛肉杀菌效果和品质特性的影响,包括水分含量、pH值、菌落总数、硫代巴比妥酸反应物值、总挥发性盐基氮(total volatile basic nitrogen,TVB-N)含量、色差值、游离氨基酸含量及脂肪酸含量等品质指标。结果表明:经过30 s等离子体处理可有效降低牛肉的菌落总数,减缓脂质氧化和TVB-N含量增加的趋势,有效增加牛肉部分游离氨基酸含量并减少部分脂肪酸含量;此外,等离子体处理后牛肉的亮度值不变,红度值和黄度值均小幅度降低。综上,等离子处理可以有效抑制生鲜牛肉的菌落生长和脂质氧化,有助于延长货架期,且对生鲜牛肉营养品质没有明显影响。

双抗夹心酶联免疫吸附快速检测冷鲜肉中的6种血清型沙门氏菌

为快速检测冷鲜肉中的沙门氏菌,筛选出1株产抗6种沙门氏菌单克隆抗体的细胞株,运用产生的抗体建立酶联免疫吸附检测方法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)。实验采用6种血清型致病沙门氏菌制备出混合抗原,对BALB/c小鼠及新西兰大白兔进行免疫,运用杂交瘤技术进行细胞融合,制备出抗沙门氏菌单克隆抗体以及多克隆抗体,并建立双抗夹心ELISA体系检测冷鲜肉中沙门氏菌。结果表明,成功筛选出1株能稳定分泌抗沙门氏菌的单克隆抗体杂交瘤细胞株6E7,保藏编号为CGMCC 10313以及多克隆抗体,效价分别为1∶1.28×106和1∶8.0×105;将多抗作为包被抗体吸附于96孔酶标板上,并用辣根过氧化物酶标记单抗,建立双抗夹心ELISA体系;检测模拟污染肉样中沙门氏菌,其检测限为800 CFU/g;并与其他血清型沙门氏菌、志贺氏菌、阪崎肠杆菌、大肠杆菌O157:H7、金黄色葡萄球菌及单增李斯特菌均无交叉反应,特异性良好。

快速检测生鲜肉中三种食源性致病菌

为同时快速检测生鲜肉中鼠伤寒沙门氏菌、单增李斯特菌和福氏志贺氏菌3种食源性致病菌,降低检测成本,制备了特异性单克隆抗体和多克隆抗体,研制出能够同时检测以上3种致病菌的胶体金免疫层析试纸条。结果表明,本试验成功筛选出3株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株2E3、2E7和2E8,3种单克隆抗体效价均在128×10^6以上,3种多克隆抗体效价均在200×10^6以上。制备的胶体金免疫层析试纸条对鼠伤寒沙门氏菌、单增李斯特菌和福氏志贺氏菌3种食源性致病菌的特异性良好,灵敏度均为1×10^4CFU/g。

肉制品中N-亚硝胺检测与控制的研究进展

N-亚硝胺是一类公认的带有强毒性的化合物,是在弱酸性条件下由亚硝酸盐和二级胺反应生成的一种致癌物质,在肉制品特定的加工环境中容易生成。以往研究表明:人类是挥发性亚硝胺引起癌症的易感群体,这些物质存在于食物中被认为是某些人类癌症包括胃癌、食道癌及鼻咽癌等癌症的致病危险因子,所以国内外对食物中挥发性亚硝胺的检测、形成和控制进行了大量的研究。本文介绍了肉制品中N-亚硝胺的来源和危害;总结了该类化合物的检测方法,如气相色谱法(GC)、气相色谱质谱联用法(GC-MS)、高效液相色谱法(HPLC)等;应用辐照和天然植物等阻断剂消除和控制肉制品中N-亚硝胺技术措施的研究进展。

不同净化柱处理对小麦粉中4种镰刀菌毒素的净化效果

比较MycoSep~?226多功能净化柱、DZT MS-PREP免疫亲和柱和实验室制备聚苯乙烯-二乙烯苯树脂免疫亲和柱在检测小麦粉中4种镰刀菌毒素(玉米赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、T-2毒素、HT-2毒素)过程中的前处理效果。选择MycoSep~?226多功能净化柱、DZT MS-PREP免疫亲和柱和实验室制备聚苯乙烯-二乙烯苯树脂免疫亲和柱,通过不同的提取和前处理方法,以及建立高效液相色谱-串联质谱检测法,对小麦粉中的4种镰刀菌毒素进行测定。DZT MS-PREP免疫亲和柱处理小麦粉样品所得的回收率为88.01%~107.31%,相对标准偏差为1.09%~14.42%;聚苯乙烯-二乙烯苯树脂免疫亲和柱的回收率为70.05%~112.80%,相对标准偏差为3.42%~12.25%;MycoSep~?226多功能净化柱的回收率为69.42%~111.12%,相对标准偏差为1.46%~13.24%。免疫亲和柱具有重复利用,有机溶剂耗用量少、特异性强等显著优势,且聚苯乙烯-二乙烯苯树脂免疫亲和柱为新载体免疫亲和柱的制备提供了依据。

一种高效稳定的微生物总RNA提取方法

本研究通过对玻璃珠-酚仿RNA提取方法进行改进优化,实现对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和真菌这3类微生物RNA高效稳定的提取。结果表明,玻璃珠-酚仿提取法能有效提取的RNA最低菌体细胞量为1×107个,远低于试验所选商业化试剂盒所需细胞量。以1×107个细胞量为例,利用Beadbeater仪破碎30 s,使用直径100μm的玻璃珠破碎提取得到的细菌RNA浓度显著高于使用直径500μm的玻璃珠提取的。使用2种直径的玻璃珠所得酵母菌RNA浓度无显著性差异。在直径100μm的条件下,破碎30 s即可保证RNA的高效提取,对于长双歧杆菌、大肠杆菌和酵母菌,破碎时间长达150 s也不会引起RNA降解。本法所提RNA的A260/A280为1.96~2.10,A260/A230为2.03~2.44,浓度和纯度均优于试验所选商业化试剂盒所提的RNA。

以聚苯乙烯-二乙烯苯为载体的多目标免疫亲和柱的制备及应用

选取3 种不同聚苯乙烯-二乙烯苯基材,通过硝基化、氨基化、活化、偶联抗体等步骤制备免疫亲和柱,用于4 种镰刀菌毒素（玉米赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、T-2毒素、HT-2毒素）的同时纯化,并将3 种基材制备的免疫亲和柱进行比较.以Cleanert PS型聚苯乙烯-二乙烯苯为基材制备的免疫亲和柱与抗体偶联的偶联率为97.64%,且其空白柱对样品的吸附作用最小,3 个加标水平下的回收率为66.16%～112.80%,相对标准偏差为3.09%～12.25%,可应用于实际样品的纯化.

酸枣仁总生物碱提取方法研究

【目的】确定从酸枣仁中提取总生物碱的最适方法和最佳提取条件。【方法】在单因素优化试验的基础上采用正交试验设计,比较优化了溶剂回流法提取酸枣仁总生物碱的工艺条件。【结果】溶剂回流法提取酸枣仁总生物碱的最佳条件为:以乙醇为提取溶剂,乙酸辅助提取,质量分数为20%乙酸的乙醇溶液(即,乙醇∶乙酸=80∶20(v/v)),以20∶1的液固比,在60℃下回流提取4.0h。【结论】该方法得到的提取物较之正交优化前酸枣仁提取物中的总生物碱含量可提高60%以上,且获得的总生物碱粗提物得率可达11%。

液质联用法检测粮谷制品中4种单端孢霉烯类真菌毒素

建立粮谷制品中4种单端孢霉烯类真菌毒素的液相色谱—质谱联用分析方法。样品经乙腈/水溶液（84︰16，v/v）提取后用MycoSep？226多功能柱净化，Agilent ZORBAX Bonus-RP色谱柱分离，液相色谱—质谱联用（LC-MS/MS）测定。结果表明，样品中4种单端孢霉烯类真菌毒素在各自的线性范围内线性关系良好，相关系数均不低于0.995，检出限为2~5 μg/kg，3个加标水平下平均回收率为73.19%~107.39%，相对标准偏差为1.46%~13.24%。表明该方法净化效果好、灵敏度高，适用于同时检测单种粮谷制品中4种单端孢霉烯类真菌毒素的残留量。

大气滑动弧放电对沙门氏菌的灭活机制及在鸡蛋保鲜中的应用

为了保持鸡蛋的新鲜度、延长其保质期,本研究提出了一种可在室温和大气环境中进行灭菌处理的新型冷杀菌技术,即滑动弧放电技术。首先,将配制好的沙门氏菌液均匀接种在鸡蛋表面,然后使鸡蛋以一定的自旋速率通过等离子体放电区域进行灭菌处理,从鸡蛋表面取得菌样后进行灭活机制研究,并将灭菌处理后的鸡蛋在37℃条件下进行贮藏,通过测定质量损失率和哈夫单位来评价大气放电技术对鸡蛋品质的影响。扫描电子显微镜观察和细胞外蛋白质质量浓度检测结果表明,大气滑动弧放电技术可对沙门氏菌产生有效的刻蚀作用,导致细胞膜破碎和胞内蛋白质泄漏。同时,鸡蛋品质检测表明,滑动弧放电处理组无论作用时间长短,鸡蛋质量损失率增大的程度均比对照组明显,但哈夫单位的降低程度小于对照组,说明大气滑动弧放电可在一定程度保持鸡蛋的新鲜度。

滑动弧放电等离子体处理对冷鲜猪肉保鲜的影响

为了探索滑动弧放电等离子体对冷鲜猪肉的贮藏保鲜效果,研究空气、氮气、氩气滑动弧放电等离子体对猪肉品质和卫生水平的处理效果,包括感官评价、红度、菌落总数、挥发性盐基氮等品质指标。结果表明:不同放电气体处理均提高了猪肉的感官评价值和红度值。菌落总数和挥发性盐基氮测试表明滑动弧放电处理可延长猪肉的贮藏期,其中氩气处理效果最好,而氮气和空气放电处理促进了冷鲜猪肉脂肪氧化,这与等离子体处理后肉表面形态的结果一致。试验结果表明大气等离子体对冷鲜猪肉的处理效果依赖于放电气体种类。综合保鲜品质的各项指标,氩气放电处理在提高猪肉保水性和感官性能,降低猪肉表面的微生物方面具有一定的优势,可为猪肉的贮藏保鲜提供一种新的处理方法。

6种清洗方法对果蔬中2种甲氧基丙烯酸酯类农药残留的去除效果

分别采用清水、果蔬洗涤盐溶液、奶粉溶液、比亚酶蔬菜速洗液、洗洁精浸泡和洗菜机清洗6种方法清洗吡唑嘧菌酯和嘧菌酯污染的黄瓜及草莓,Qu ECh ERS-LC-MS/MS法处理并检测黄瓜和草莓中吡唑醚菌酯及嘧菌酯的残留量。结果表明:奶粉对黄瓜和草莓上2种农药残留的整体清除效果最好,清除率为60.01%~69.91%,显著(p<0.05)高于洗洁精和清水浸泡。洗菜机对草莓上农药残留的清除率为59.55%~64.87%,高于对黄瓜上农药残留的清除率40.29%~48.40%。果蔬洗涤盐和比亚酶的农残清除效果无明显差异,清除率分别为39.91%~64.50%和39.63%~65.35%。洗洁精农残清除率为32.50%~52.02%。清水清除率最低,为22.45%~44.41%,显著低于奶粉、洗涤盐和比亚酶浸泡效果(p<0.05)。综上所述,不同清洗方法均可减少果蔬中的农药残留,其中奶粉溶液浸泡处理效果最好,清水最差。

酸枣仁微量生物碱成分的筛查方法研究

为了准确、迅速地筛查并确定酸枣仁中微量生物碱成分,运用含氮有机物(生物碱)分析包中的色谱柱建立酸枣仁生物碱成分的高效液相色谱在线分离方法,然后利用Mass Works分子识别软件和LC-ESI-MS/MS对在线分离的生物碱成分进行确认,共筛查到3种阿朴芬类生物碱:酸枣仁碱K(C_(17)H_(19)NO_3)、山矾碱(C_(17)H_(17)NO_2)和N-甲基巴婆碱(C_(18)H_(19)NO_2);2种环肽类生物碱:酸枣仁碱F(C_(31)H_(42)N_4O_5)和酸枣仁碱A(C_(31)H_(42)N_4O_4);还有一对同分异构体阿朴芬生物碱:木兰花碱和酸李碱(C_(20)H_(24)NO_4)有待进一步确定。

38%唑醚·啶酰菌悬浮剂在草莓和土壤中的残留及消解动态

为评价38%唑醚·啶酰菌悬浮剂（有效成分质量分数：12.8%吡唑醚菌酯,25.2%啶酰菌胺）在农产品和环境中的安全性,于2015年和2016年在中国北京及山东分别进行了该药剂在草莓及土壤中的残留及消解动态试验,建立了同时测定草莓及土壤中吡唑醚菌酯和啶酰菌胺残留量的高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）检测方法。样品用乙腈提取,经N-丙基乙二胺（PSA）净化,电喷雾多反应监测模式HPLC-MS/MS检测,基质匹配标准曲线外标法定量。结果表明：在草莓和土壤中添加0.015～3.0 mg/kg吡唑醚菌酯,平均回收率分别为97%～107%和94%～106%,相对标准偏差（RSD）分别为1.8%～3.9%和2.2%～4.1%,定量限（LOQ）为0.015 mg/kg;添加0.03～6.0 mg/kg啶酰菌胺,平均回收率分别为90%～101%和92%～97%,RSD为4.6%～13%和2.9%～14%,LOQ为0.03 mg/kg。田间试验结果表明,吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在草莓和土壤中的消解动态均符合一级动力学方程,在草莓中的半衰期分别为4.8～6.0 d和5.1～11 d,在土壤中为3.4～10.0和3.4～6.0 d。采用38%唑醚·啶酰菌悬浮剂,分别按有效成分228和342 g/hm2于草莓幼果期施药,最多施药4次,采样时间距离最后一次施药的间隔时间为3、5、7 d。吡唑醚菌酯在草莓中的最大残留量为0.13 mg/kg,低于欧盟规定的最大残留限量（MRL）（0.5 mg/kg）;啶酰菌胺在草莓中的最大残留量为0.78 mg/kg,低于中国的MRL值（3.0 mg/kg）。建议38%唑醚·啶酰菌悬浮剂在草莓上的安全间隔期为3 d,试验结果为农药在草莓中的安全使用和农产品的食用安全提供了数据支持。