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禽流感病毒重组核蛋白抗原的纯化及在琼脂免疫扩散试验中的应用
被引量:
3
1
作者
乔彩霞
张鹤晓
+5 位作者
高志强
谷强
吴丹
蒲静
郭晋优
刘继红
《中国动物检疫》
CAS
北大核心
2006年第7期32-35,共4页
采用RT-PCR扩增我国H5N1禽流感病毒NP基因,亚克隆于含有组氨酸标签的原核表达载体中,在大肠杆菌中高效表达。所表达的蛋白经Ni+亲和色谱法纯化,SDS-PAGE电泳分析其纯度达95%以上,Western-Blotting鉴定具有良好的免疫反应活性。利用纯化...
采用RT-PCR扩增我国H5N1禽流感病毒NP基因,亚克隆于含有组氨酸标签的原核表达载体中,在大肠杆菌中高效表达。所表达的蛋白经Ni+亲和色谱法纯化,SDS-PAGE电泳分析其纯度达95%以上,Western-Blotting鉴定具有良好的免疫反应活性。利用纯化蛋白作为诊断用抗原,建立了禽流感的琼脂扩散诊断方法。所建立的诊断方法在对禽流感强阳性和弱阳性血清的检测中,均出现了致密而清晰的沉淀线,且沉淀线的亮度与所加入的重组抗原的量成正比;而对鸡新城疫、鸡传染性法式囊等8种禽疫病阳性血清和SPF鸡血清的检测中,无沉淀线出现且没有交叉反应;利用该方法对30份进出口送检样品进行检测,其结果与国内同类试剂盒相符性达100%。实验室和现地使用证明,利用纯化的重组NP抗原所建立的方法简便、可靠、易于标准化,可为我国禽流感的兽医诊断、流行病学普查和出入境检验检疫提供有力的保障。
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关键词
AIV
核蛋白
琼脂免疫扩散试验
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职称材料
题名
禽流感病毒重组核蛋白抗原的纯化及在琼脂免疫扩散试验中的应用
被引量:
3
1
作者
乔彩霞
张鹤晓
高志强
谷强
吴丹
蒲静
郭晋优
刘继红
机构
北京出入境检验检疫局动检中心
出处
《中国动物检疫》
CAS
北大核心
2006年第7期32-35,共4页
文摘
采用RT-PCR扩增我国H5N1禽流感病毒NP基因,亚克隆于含有组氨酸标签的原核表达载体中,在大肠杆菌中高效表达。所表达的蛋白经Ni+亲和色谱法纯化,SDS-PAGE电泳分析其纯度达95%以上,Western-Blotting鉴定具有良好的免疫反应活性。利用纯化蛋白作为诊断用抗原,建立了禽流感的琼脂扩散诊断方法。所建立的诊断方法在对禽流感强阳性和弱阳性血清的检测中,均出现了致密而清晰的沉淀线,且沉淀线的亮度与所加入的重组抗原的量成正比;而对鸡新城疫、鸡传染性法式囊等8种禽疫病阳性血清和SPF鸡血清的检测中,无沉淀线出现且没有交叉反应;利用该方法对30份进出口送检样品进行检测,其结果与国内同类试剂盒相符性达100%。实验室和现地使用证明,利用纯化的重组NP抗原所建立的方法简便、可靠、易于标准化,可为我国禽流感的兽医诊断、流行病学普查和出入境检验检疫提供有力的保障。
关键词
AIV
核蛋白
琼脂免疫扩散试验
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
S854.43 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
禽流感病毒重组核蛋白抗原的纯化及在琼脂免疫扩散试验中的应用
乔彩霞
张鹤晓
高志强
谷强
吴丹
蒲静
郭晋优
刘继红
《中国动物检疫》
CAS
北大核心
2006
3
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