Granocyte在妇科肿瘤化疗期间及外周血干细胞移植中的应用

研究G－CSF（Granulocyte－ColonyStimulatingFactor）即粒细胞集落刺激因子在化疗中对粒细胞的刺激作用。方法：观察20例肿瘤患者化疗期间应用小剂量Granocyte（1～2μg／kg／日）治疗化疗引起的白细胞减少及应用大剂量Granocyte（5μg／kg／日），在超大剂量化疗外周血干细胞移植时的干细胞动员。A组：46个周期，为停化疗2周白细胞低于3．5×109时给小剂量G－CSF（1～2μg／kg／日）；C组：9个周期，为停化疗24小时后给小剂量G－CSF（1～2μg／kg／日）；B组：不给G－CSF，为对照组。结果：A组给药2～3天后白细胞可达5×109／L以上，C组化疗后白细胞未降至3×109／L以下。观察中同时发现大剂量G－CSF对血小板减少也有治疗作用。结论：G－CSF对化疗后白细胞降低有较好的治疗作用。

卵巢上皮癌首次术中残留肿瘤组织最大径超过2cm患者的治疗与预后

目的：对北京医科大学人民医院１９７０～１９９４年首次术中残留肿瘤组织最大径超过２ｃｍ的６９例卵巢上皮癌患者的治疗与预后进行回顾性分析。方法：６９例卵巢上皮癌中浆液性癌５４例、粘液性癌１０例、内膜样癌４例、透明细胞癌１例，其中Ⅱ期１例、Ⅲ期６４例、Ⅳ期４例。全部先行手术，确定组织类型、临床分期。２２例行第２次手术；７例行第３次手术。首次术后６７例进行了全身和腹腔化疗，２、３次术后对复发者又进行了全身化疗；对复发者中出现远处转移的９例患者除进行全身化疗，还进行了局部化疗，６例肺转移并出现胸水者加用了胸腔局部化疗，２例肝转移行肝动脉化疗，２例脑转移者行开颅术后全身化疗。结果：６９例中２年存活３２例（５０．７％）；５年存活１１例（２８．１％）；１０年存活３例，生存率１４．８％。６例肺转移合并胸水者，平均延长生存７个月（２～１２月）；２例肝转移者分别延长生存９及２９个月；２例脑转移者分别延长生存５、１６个月。结论：在卵巢癌首次术中应尽可能切除肿瘤组织，对残留肿瘤组织最大径超过２ｃｍ患者术后应积极化疗，对复发者应再次手术，化疗可延长患者生命。

抗独特型抗体在肿瘤主动免疫治疗研究中的进展

抗独特型抗体具有模拟抗原及免疫调节双重作用,能代替肿瘤抗原,诱发特异性免疫反应,临床初步应用显示出一定疗效。本文对抗独特型抗体及其在肿瘤主动免疫治疗研究中的进展作一综述。

卵巢肿瘤患者血清CP_2及抗独特型mAb6B_(11)Ab_2的检测意义

目的 探讨应用卵巢癌抗原 CP2 及卵巢癌抗独特型单克隆抗体 6 B1 1 Ab2 进行血清中相关抗体检测的可行性及临床应用价值 .方法 应用 EL ISA法对 95例恶性卵巢肿瘤、40例良性卵巢肿瘤及 9例子宫内膜异位症患者血清进行卵巢癌相关抗原及抗体的检测 ,并以 5 0例正常女性为对照 .结果 非粘液性卵巢上皮癌抗原阳性率为 10 0 % ,抗体阳性率为 6 6 .7% ,高于粘液性卵巢上皮癌、非上皮性卵巢恶性肿瘤及生殖系统其他恶性肿瘤 ,并且明显高于卵巢良性肿瘤 (P<0 .0 1) .

肿瘤探测仪研制及其在卵巢癌放免导向手术中的应用

目的：进行自制肿瘤探测仪（ＧＤＰ）体内、外测试，为肿瘤导向手术提供帮助。方法：（１）体外用１３１Ｉ或９９ｍＴｃ核素及模拟的肿瘤放射性结节进行ＧＤＰ灵敏度和空间定位力测试；（２）建立荷人卵巢癌裸鼠模型，随机将其分为３组，分别经腹腔注入９９ｍＴｃＣＯＣ１８３Ｂ２Ｆ（ａｂ′）２（Ａ、Ｂ组）或ＩｇＧ（Ｃ组），进行ＧＤＰ裸鼠体内瘤及邻近组织探测，并与井型探测仪比较。结果：（１）ＧＤＰ探测核素最小活性１８５Ｂｑ，可探测１０ｍｍ厚度及３ｍｍ范围内放射性结节；（２）ＧＤＰ探测体内最小肿瘤为０．３ｃｍ×０．１ｃｍ，分辨瘤与组织最小间距为０．２ｃｍ；单抗组Ｔ／ＮＴ值大于２∶１，与对照组相比差异有显著性；与探测仪结果呈线性相关。结论：自制肿瘤探测仪具有较好的探测灵敏度和空间分辨力。

腹腔镜手术在妇科恶性肿瘤中的应用

目前，腹腔镜手术已广泛应用于许多妇科良性疾病的治疗，如子宫内膜异位症、附件肿物及异位妊娠等，具有创伤小、术后恢复快及术后病率低等优点。９０年代以来，随着腹腔镜设备的改进，操作技术的不断熟练，使其在治疗妇科恶性肿瘤方面也取得了显著进展。现将腹腔镜的应用...

吡柔比星（THP－ADM）联合化疗治疗上皮性卵巢癌临床观察

作者应用（ＴＨＰ－ＡＤＭ）联合用药治疗上皮性卵巢癌２８例、输卵管癌１例，原发腹膜浆液性腺癌１例。初治病例２３例，复治７例，重点分析疗效及心脏毒性反应。初治者ＣＲ５６．５％（１３／２３），ＰＲ３４．８％（８／２３），ＣＲ＋ＰＲ９１．３％。复治者ＣＲ２８．６％（２／７），ＰＲ２８．６％（２／７），ＣＲ＋ＰＲ５７．１％，总有效率ＣＲ＋ＰＲ８３．３％。结论：ＴＨＰ联合化疗治疗上皮性卵巢癌疗效肯定，心脏毒性低，轻度心功能不良者可采用ＴＨＰ联合化疗。

卵巢的子宫内膜样癌临床情况及DNA倍体分析与p^(53)基因蛋白增殖细胞核抗原表达测定的研究

目的：研究卵巢的子宫内膜样癌ｐ５３基因蛋白、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达与ＤＮＡ倍体分析之间的相互关系，并对其与临床分期、病理学分级与残存瘤的关系等进行分析、比较。方法：应用流式细胞技术及ｐ５３、ＰＣＮＡ单克隆抗体免疫组化技术对卵巢的子宫内膜样癌１３例进行倍体分析及基因、抗原测定。结果：ＤＮＡ异倍体率为７８％，ｐ５３基因蛋白表达率为４６％，ＰＣＮＡ表达率为９２％。ＤＮＡ倍体分析与临床Ⅱ～Ⅳ期、病理２～３级及残存瘤＞２ｃｍ者有关，异倍体阳性率分别为９０．９％、８８．８％、８７．５％，明显高于临床Ⅰ期、病理１级及无残存瘤者。ｐ５３在临床Ⅱ～Ⅳ期、病理２～３级表达率分别为６８．６％和５５．５％，均高于临床Ⅰ期及病理１级者，并对ＤＮＡ倍体水平与ｐ５３表达之间的关系进行了探讨。结论：ＤＮＡ异倍体与ｐ５３基因蛋白表达阳性可作为卵巢的子宫内膜样癌恶性程度的重要指标。

C－erbB＿2、p53、p21在卵巢粘液性癌表达及其临床意义的研究

本实验对５０例卵巢粘液性囊腺癌中Ｃ－ｅｒｂＢ２（ｎｅｕ）癌基因，ｐ５３抗癌基因、ｐ２１蛋白（ｒａｓ基因产物）的表达进行研究，观察其在卵巢癌、交界性瘤、良性瘤的表达率，并采用半定量的ＡＢＣ免疫组化染色方法，研究不同强度表达与病理分化、临床分期、预后关系，得到初步结果。Ｃ－ｅｒｂＢ２在卵巢粘液癌中表达４８％，其限性表达率及表达强度与预后和病理分化有关。ｐ５３在卵巢粘液癌中表达４Ｏ％，但其表达率、表达强度与预后、手术分期和病理分化无明显相关性。ｐ２１在粘液癌中表达１２％，其表达率及强度与预后和病理分化无明显关系。在交界瘤、良性瘤中无表达。

EGFR、neu、PCNA在卵巢浆液性癌中表达与临床、病理、预后的关系

本实验对７０例卵巢浆液癌、１０例交界性癌、２０例卵巢浆液瘤中ＥＧＦＲ（表皮生长因子受体）、ｎｅｕ癌基因、ＰＣＮＡ（增殖细胞核抗原）表达进行研究，观察其在卵巢癌、交界性肿瘤、良性瘤的表达率，并采用半定量的ＡＢＣ免疫组化方法研究不同强度表达与病理分化、临床分期、预后的关系，得到初步结果。ＥＧＦＲ在浆液癌表达５８．５％，交界瘤５０％，浆液瘤５％，其表达率与预后呈负相关，与病理分化、临床分期无明显相关性。ｎｅｕ在卵巢浆液癌中表达４５．７％，交界瘤２０％，浆液瘤０，其阳性表达率及表达强度与预后和病理分化有关。ＰＣＮＡ在浆液癌中表达４７％，交界瘤中３０％，良性瘤１０％，其表达强度与预后和病理分化有关。本实验表明ＥＧＦＲ、ｎｅｕ、ＰＣＮＡ与卵巢浆液癌预后有相关性，ｎｅｕ、ＰＣＮＡ与病理分化也有一定相关性。可能成为判断病理分化、临床预后的指标。

检测卵巢癌细胞活性的XTT比色法的建立

检测卵巢癌细胞活性的ＸＴＴ比色法的建立吴楠△崔恒钱和年冯捷傅天云李小平（北京医科大学人民医院妇科肿瘤中心，北京１０００３４）ＸＴＴ（２，３ｂｉｓ（２ｍｅｔｈｏｘｙ４ｎｉｔｒｏ５ｓｕｌｆｏｐｈｅｎｙｌ）５［（ｐｈｅｎｙｌａｍｉｎｏ）ｃａ...

^(99m)Tc标记卵巢癌单抗片段F(ab')_2放射免疫显像的实验研究

目的：为了改进放射免疫显像（ＲＩＩ），进行９９ｍＴｃ标记卵巢癌单克隆抗体ＣＯＣ１８３Ｂ２Ｆ（ａｂ’）２ＲＩＩ的研究。方法：采用无花果酶制备单抗ＣＯＣ１８３Ｂ２片段Ｆ（ａｂ’）２，改进ＳｎＣｌ２法进行９９ｍＴｃ标记片段Ｆ（ａｂ’）２及正常鼠ＩｇＧ（ＮＭＩｇＧ）；９９ｍＴｃＣＯＣ１８３Ｂ２或９９ｍＴｃＮＭＩｇＧ标记物分别经腹腔注入荷人卵巢癌裸鼠体内，１８ｈ进行ＲＩ。显像后测定并计算肿瘤与非肿瘤组织放射性活度比值（Ｔ／ＮＴ）。结果：（１）无花果酶可制备ＣＯＣ１８３Ｂ２单抗片段Ｆ（ａｂ’）２；（２）改进ＳｎＣｌ２法进行９９ｍＴｃ标记Ｆ（ａｂ’）２，标记率达９０％以上；（３）１８ｈ后ＲＩ，可见９９ｍＴｃＣＯＣ１８３Ｂ２组荷瘤裸鼠较９９ｍＴｃＮＭＩｇＧ对照组移植瘤图像清晰，且Ｔ／ＮＴ值明显高。结论：应用片段Ｆ（ａｂ’）２可改善ＲＩＩ。

HPV16E6E7转导的卵巢癌细胞系顺铂耐药性的变化

目的 人乳头瘤病毒 16型 E6 E7区基因编码的蛋白具有转导人上皮细胞 ,使之获得永生化特性的作用。为建立卵巢癌永生细胞系 ,我们对 HPV16 E6 E7转导卵巢癌细胞的方法及转导细胞对顺铂的耐药性进行了研究。 方法 采用脂质体方法 ,将含有 HPV16 E6 E7的重组逆转录病毒载体 p L XSN16 E6 E7,转染逆转录病毒包装细胞 PT6 7,经 G418筛选 ,病毒滴度测定 ,筛选出 1株高滴度 (1.9× 10 7/m l)的产病毒克隆 ,将之转导卵巢癌细胞系SKOV3、3AO,各筛选出 1株稳定表达 HPV16 E6 E7的克隆 ,SKOV3/E6 E7、3AO/E6 E7。经 RT- PCR、免疫细胞化学检测证实 HPV16 E6 E7的表达 ,之后采用 MTT法检测了 HPV16 E6 E7转导的卵巢癌细胞系对顺铂耐药性的变化。结果 HPV16 E6 E7转导的卵巢癌细胞系 SKOV3/E6 E7、3AO/E6 E7对顺铂的耐药性无改变。 结论 HPV16 E6 E7转导的卵巢癌细胞没有发生顺铂耐药性的改变。本研究为采用此法建立卵巢癌永生细胞系 ,特别是建立耐药卵巢癌细胞系奠定了基础。

免疫磁珠技术在卵巢癌研究中的应用

免疫磁珠技术在卵巢癌研究中的应用范蓉钱和年冯捷付天云叶雪（北京医科大学人民医院妇科肿瘤中心，北京１０００３４）免疫磁珠技术（ｉｍｍｕｎｏｍａｇｎｅｔｉｃｂｅａｄｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ）是近年来国内外研究比较热门的一种新的免疫学技术。磁珠是一种球形小粒...

绝经后妇女卵巢可及综合征

目的：研究绝经后妇女卵巢可触及患者的肿物性质，以及诊断和处理方法。方法：回顾性分析97例50岁以上绝经后卵巢未萎缩、经盆腔检查可触及卵巢（PMPO）的患者。结果；赘生性肿物占86．6％，恶性肿物占23．7％。其中72例（74．2％）因有临床症状而就诊，82．5％的PMPO可通过一般盆腔检查发现，91．3％的PMPO患者可通过腹部超声发现，而阴道超声对PMPO患者则无一例漏诊。结论：对PMPO患者予以手术治疗是必要的。

卵巢癌细胞共刺激分子的表达

依据Ｔ细胞活化的双信号学说[1],利用免疫基因修饰肿瘤细胞,使其更具有免疫原性和抗原呈递细胞的功能,是肿瘤疫苗设计的重要策略之一。近年的研究发现,共刺激分子ＣＤ80和ＣＤ86在诱发Ｔ细胞介导的抗肿瘤免疫方面起着重要的共刺激作用,在鼠的体内外试验以及人的体外试验中...

卵巢癌抗独特型单链抗体6B11ScFv/mGM-CSF融合蛋白的构建、表达及活性测定

目的 构建卵巢癌抗独特型单链抗体 6 B11Sc Fv和鼠 GM- CSF融合蛋白 (6 B11m GM) ,以观察其在动物体内诱导的特异性免疫反应 ,为卵巢癌抗独特型疫苗应用于临床提供依据。 方法 用 DNA重组技术 ,将m GM- CSF连于单链抗体 6 B11Sc Fv羧基末端 ,构建重组质粒 p ET30 - 6 B11m GM,转化大肠杆菌 BL2 1(DE3) ,IPTG诱导 ,以包涵体形式获高效表达 ,超声破碎细菌细胞获得包涵体 ,用 8mol.L- 1尿素溶解包涵体后直接稀释复性 ,SDS- PAGE分析蛋白纯度 ,EL ISA分析技术和细胞增殖实验测定融合蛋白的抗体和细胞因子活性。 结果 复性蛋白纯度达 90 %以上。采用氧化型谷胱甘肽 (GSSG)浓度为 1mm ol.L- 1 ,还原型谷胱甘肽 (GSH)浓度为 5 m mol.L- 1 ,10℃复性 48h,复性率达 36 %。表达的融合蛋白分别能与 COC16 6 - 9单抗和大鼠抗小鼠 GM- CSF单抗特异结合 ,并能刺激 m GM- CSF依赖株 NFS- 6 0细胞增殖。 结论 以包涵体表达的融合蛋白 6 B11m GM保留了两种蛋白的活性 。

以包涵体形式表达的6B11卵巢癌抗独特型单链抗体的复性、纯化和活性研究

目的：探讨以细菌胞浆内包涵体形式表达的６Ｂ１１卵巢癌抗独特型单链抗体（６Ｂ１１ｓｃＦｖ）的复性、纯化及其活性。方法：重组质粒ｐＬ６Ｂ１１ｓｃＦｖ转化大肠杆菌ｐｏｐ２１３６，温度诱导，以包涵体形式获高效表达。超声破碎细菌细胞得包涵体，用８ｍｏｌ·Ｌ－１尿素溶解包涵体后直接稀释复性，探讨复性条件并采用ＤＥＡＥＳｅｐｈａｒｏｓｅＦａｓｔＦｌｏｗ离子交换层析纯化复性蛋白，ＳＤＳＰＡＧＥ分析蛋白纯度，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ、ＥＬＩＳＡ及竞争抑制ＥＬＩＳＡ测活性。结果：复性蛋白质经纯化，纯度达９５％以上。当氧化型谷胱甘肽（ＧＳＳＧ）浓度为５ｍｍｏｌ·Ｌ－１，还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）浓度为０．５ｍｍｏｌ·Ｌ－１，１０℃复性４８ｈ以上时，复性率较高。纯化后的表达蛋白６Ｂ１１ｓｃＦｖ能与ＨＲＰＣＯＣ１６６９卵巢癌单抗反应并与卵巢癌抗原共同竞争结合卵巢癌单抗ＣＯＣ１６６９，抑制率达６７％，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ显示其相对分子质量为２８×１０４，证明纯化后的表达蛋白质，能模拟卵巢癌抗原与卵巢癌单抗特异结合。结论：以包涵体表达的６Ｂ１１ｓｃＦｖ，经溶解复性纯化后，纯度高，活性好。

6B11卵巢癌抗独特型单链抗体表达及序列分析

目的：克隆和表达６Ｂ１１卵巢癌抗独特型抗体单链可变区基因，并进行序列分析。方法：采用逆转录ＰＣＲ和基因重组技术，扩增并构建６Ｂ１１鼠抗独特型抗体单链可变区基因，重组至噬菌体表面表达载体，在大肠杆菌表达，并利用双脱氧末端终止法进行核苷酸序列分析。结果：阳性克隆表达产物与卵巢癌单克隆抗体ＣＯＣ１６６－９特异结合；ＤＮＡ序列分析表明重链和轻链可变区分属小鼠免疫球蛋白重链第Ｉ亚群和轻链第Ⅱ亚群。结论：自６Ｂ１１小鼠杂交瘤细胞成功地克隆表达了该抗独特型单链抗体基因，为进一步人源化改造，推进卵巢癌的免疫治疗奠定了良好基础。